超声背向散射积分对基因转染猪 慢性缺血心肌的实验研究

目的：研究心肌背向散射积分（IBS）及IBS周期变化幅度（CVIB）用于检测基因转染猪慢性缺血心肌治疗的价值。方法：在猪冠脉左旋支（LCX）放置Ameroid环建立慢性心肌缺血模型，4周后分组注射携带血管内皮生长因子-B基因的重组腺病毒液（Ad.VEGF-B）或磷酸盐缓冲液（PB）。应用背向散射积分技术联机分析技术，观测正常状态、置环后2周、4周及注射Ad.VEGF-B液或PB液2208062后2周、4周左室乳头肌短轴观侧后壁标化平均背向散射积分（％AⅡ）和背向散射积分周期变化幅度（CVIB）的变化。结果：对照组置环后2周、4周及PB对照注射后％AⅡ逐渐升高，而CVIB逐渐降低；基因转染组置环后2周、4周％AⅡ和CVIB变化同对照组，注射后2周和4周％AⅡ较对照组明显降低，CVIB较对照组明显增加。结论：IBS能早期、快速、准确地检测慢性缺血心肌基因转染治疗前后心肌结构和室壁运动改善的情况，为临床研究和治疗冠心病提供可靠指标。     

人酸性成纤维细胞生长因子基因重组腺病毒粘粒载体的构建

目的 :构建人酸性成纤维细胞生长因子 (aFGF)重组腺病毒粘粒载体。方法 :抽取人胎脑组织mRNA ,经RT PCR获取aFGF基因 ,测序后将其插入腺病毒粘粒载体pAxCAwt的SwaI位点。结果 :RT PCR合成的DNA片段经克隆、测序后证实为aFGF基因 ,酶切结果显示 ,aFGF腺病毒重组粘粒 (pAxCAwt aFGF)中aFGF的插入方向正确。结论 :构建的aFGF腺病毒重组粘粒 (pAxCAwt aFGF)可用于进一步的基因治疗的研究中 ,为心肌缺血区促血管生长因子基因转染作准备     

猪慢性缺血心肌基因转染前后心肌灌注图像的研究

目的　用声学造影技术观察猪慢性缺血心肌基因转染前后心肌灌注图像的变化。方法　将健康家猪 10头分为基因转染组 (6头 )和对照组 (4头 ) ,于正常状态 ,在冠脉回旋支放置Ameroid环 4周 ,缺血心肌局部注射携带VEGF B基因的重组腺病毒液、对照组局部注射磷酸盐缓冲液后 4周共 3次进行心肌声学造影 ,观察正常心肌、慢性缺血心肌和基因转染后心肌及对照组心肌声学造影图像变化。结果正常状态下左室心肌厚度均匀 ,声学造影图像色泽明亮 ;慢性缺血心肌变薄 ,声学造影图像基本不充填 ;基因转染 4周后局部心肌不均匀灌注 ;而对照组局部心肌回声仍低暗 ,内散在点状高回声。结论　猪慢性缺血心肌基因转染后 ,其局部心肌血供改善。不同血供心肌的图像灌注特点可反映心肌的血供状态     

酸性成纤维细胞生长因子促血管内皮细胞增殖作用的实验研究

目的　探讨不同浓度的aFGF对体外培养的大鼠主动脉内皮细胞生长的影响。方法　通过组织块培养法获取主动脉内皮细胞。将浓度为 5ng/ml,10ng/ml,2 0ng/ml的aFGF分别加入内皮细胞的培养液中作为实验组(Ⅰ～Ⅲ组 ) ,不加aFGF的组作为对照组。分别在 2 4h、48h和 72h应用MTT法进行细胞计数。结果　从大鼠主动脉成功地获取了内皮细胞。 3天内 ,实验组和对照组的主动脉内皮细胞都有不同程度的增殖 :培养 2 4h ,实验各组与对照组比较P >0 .0 5 ,无统计学差异 ;48h和 72h时 ,Ⅱ、Ⅲ组与对照组以及与Ⅰ组两两比较 ,有非常显著的差异 (P <0 .0 0 1) ;各时间段内 ,Ⅰ组与对照组 ,Ⅲ组与Ⅱ组比较 ,细胞数改变未见差异 (P >0 .0 5 )。结论　一定浓度的aFGF有非常明显的促血管内皮细胞生长的作用 ,可能对缺血性心脏病的促血管形成治疗有较大的帮助。     

超声背向散射积分和多普勒组织成像检测慢性心肌缺血的实验研究

目的 :建立心肌慢性缺血动物模型 ,探讨超声背向散射积分 (IBS)和多普勒组织成像 (DTI)技术检测慢性心肌缺血的价值。　方法 :健康家猪 5头。在猪冠状动脉左旋支放置Ameroid环 ,应用IBS检测置环后 2、4、6、8周左心室侧后壁标化平均IBS(%AⅡ )、IBS周期变化幅度 (CVIB)及CVIB跨壁梯度指数 (TGI)的变化 ;应用DTI检测各阶段左心室乳头肌短轴观和心尖四腔观左心室侧后壁DTI频谱 [收缩期峰值速度 (VS)、舒张早期峰值速度(VE)、舒张晚期峰值速度 (VA) ]的变化。　结果 :正常心肌 %AⅡ为 2 .2 9± 0 .32 ,CVIB为 (9.6 9± 2 .2 2 )dB ,TGI为0 .2 2± 0 .0 8。置环后 %AⅡ逐渐增加 ,CVIB逐渐减小 ,心内膜下CVIB减小幅度大于心外膜下 ,使TGI亦逐渐减小 ,置环后 2～ 4周减小幅度最大 ,至 8周跨壁梯度消失 (P <0 .0 1) ;正常心尖四腔观VS 大于左心室短轴观VS(P <0 .0 1) ,VE 小于左心室短轴观VE(P <0 .0 5 )。置环后 2周 ,两者VS、VE 均显著减小 (P <0 .0 5 ) ,心尖四腔观VS 减小幅度大于左心室短轴观VS。以后各阶段两者VS、VE 继续减小 ,仍以心尖四腔观VS 减小幅度最大。　结论 :用Ameriod环建立猪心肌慢性缺血模型 ,能很好模拟人类冠心病的病变过程 ;超声IBS和DTI技术从回声和心室壁运动等不同方面检测慢性心肌     

Pig model of chronic myocardial ischemia and its investigation by ultrasonic integrated backscatter and Doppler tissue imaging

Thedevelopmentandprogressofischemicheartdis ease(IHD)isacomplexandchronicprocess .Inourstudy ,weuseAmeroidconstrictortoproduceachronicischemiamyocardiummodelanduseIBSandDTItodetectitsoastoprovidemoreinformationforclinicalinvestigationandtreatmentofcoronaryheartdisease(CHD) .MATERIALSANDMETHODS　　Machine　HPSonos 5 5 0 0echocardiographicsystemwithaS4tranducer (frequency 2～ 4MHz) .　　Animalsandsurgicalprocedure　Fivedomesticpigs [weight,(2 0± 5 )kg]werestudied .Aftergeneralan…     

酸性成纤维细胞生长因子基因转染猪慢性缺血心肌促进侧支血管的增生

目的：探讨人酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)基因重组腺病毒载体（Ad.aFGF)转染缺血心肌后促进侧支血管增生的作用。方法：实验用小型猪开胸于左冠回旋支（Lcx)放置Ameroid环，4周后，将Ad.aFGF(n=7)、Ad.Null(n=6)、PBS（n=6)直接注射到Lcx供血区域，每只10点，每点10^9pfu或100μl；4周后心脏超声检测局部心功能的改善，体外冠状动脉造影观察侧支血管的增生，注射点心肌Ⅷ因子免疫组化染色检测心肌中的新生血管。结果：冠状动脉造影显示Ad.aFGF组较其他两组心肌中有明显的侧支血管增生，局部室壁功能显著提高；Ⅷ因子免疫组化染色显示Ad.aFGF组心肌中新生血管的密度显著高于另两组（P＜0.01)。结论：Ad.aFGF转染慢性缺血心肌后可促进侧支血管增生，可以成为治疗缺血性心脏病的有效途径。     

缺血性心脏病中的治疗性血管新生

冠心病是西方国家最常见的导致死亡的疾病之一 ,在我国的发病率和病死率也呈明显上升趋势。目前治疗冠心病的主要方法不外乎内科药物治疗以及冠状动脉旁路移植术 (ＣＡＢＧ)、经皮冠状动脉成形术 (ＰＴ ＣＡ)等 ,但是对于冠状动脉呈弥漫性狭窄的病人 ,手术往往不能起到再血管化的作用 ,而且许多病人由于心功能差 ,甚至无法耐受手术。近年来 ,有关血管发生的基础研究取得了重大进展 ,为缺血性心脏病的治疗带来了新思路 ,它被称为“生物旁路”。具体说 ,就是以促血管生长因子诱导心肌新生血管形成 ,提高心肌侧支循环的代偿能力 ,实现内源性心…     

多普勒组织成像检测基因转染猪慢性缺血心肌的实验研究

目的　探讨多普勒组织成像 (DTI)技术检测基因转染猪慢性缺血心肌的价值。方法　在猪冠状动脉左旋支放置Ameroid环建立慢性心肌缺血模型 ;4周后分组注射携带血管内皮生长因子 -B基因的重组腺病毒液 (Ad .VEGF B)或磷酸盐缓冲液 (PB) ;再 4周后取心进行病理学检查。观察术前、置环后 2周、4周及注射后 2周、4周左心室侧后壁心肌彩色二维和M型速度图的变化 ,检测各阶段DTI频谱 (收缩期峰值速度VS,舒张早、晚期峰值速度VE 和VA)的变化。结果　正常心肌色彩充盈明亮 ,分层清晰 ;缺血心肌色彩暗淡缺失 ,分层模糊 ;基因转染后心肌较对照组色彩明亮 ,缺失减少 ,分层较清晰。对照组正常心尖四腔观VS 大于左心室乳头肌短轴观 (P <0 .0 1) ,VE 小于乳头肌短轴观 (P <0 .0 5)。置环后 2周 ,两者VS、VE 均显著减小 (P <0 .0 5) ,心尖四腔观VS 减小幅度大于乳头肌短轴观。以后各阶段VS、VE 均继续减小 ,以心尖四腔观VS 减小幅度最大。基因转染组治疗前DTI频谱变化同对照组 ,注射后 2周乳头肌短轴观和心尖四腔观VS、VE 均较对照组增加 ,以前者VE 和后者VS 增加显著 (P <0 .0 5) ;注射后 4周两者VS 和乳头肌短轴观VE 较对照组有明显增加 (P <0 .0 1)。结论　DTI技术可快速、准确检测慢性缺血心肌基因治疗前后心肌结构和     

aFGF基因转染改善猪慢性缺血心肌心功能的实验研究

为探讨携带人酸性成纤维细胞生长（aFGF)基因的的重组缺陷型腺病毒载体（Ad，aFGF）转染对缺血心肌心功能改善的作用，采用小型猪，开胸后于左回旋支起始部放置Ameroid环，4周后，Ad,aFGF(n=7),Ad,Null(n=5)，PBS（n=9)直接注射到左回旋支供血芳肌，每只注射10点，每点注射病毒10^9pfu或PBS 100μl，注药后4周进行心脏超声检测。结果显示，Ad，aFGF组动物心功能较Ad.Null组和PBS组有显著改善。研究表明，Ad.aFGF能改善缺血心肌的心功能，可用于缺血性心脏病的治疗。