脑胶质瘤干细胞衍生的外泌体lncRNA HOXA-AS2促进脑胶质瘤的增殖、迁移、侵袭和干细胞特性

背景与目的：外泌体是介导肿瘤微环境中肿瘤细胞与受体细胞间相互作用的重要信使。然而，细胞外泌体长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）在脑胶质瘤干细胞（glioma stem cell，GSC）和脑胶质瘤细胞的细胞间通信中的作用尚不清楚。本研究探究外泌体衍生的lncRNA对脑胶质瘤增殖、迁移、侵袭和干细胞特性的影响。方法：从中国脑胶质瘤基因组图谱（the Chinese Glioma Genome Atlas，CGGA）和癌症基因组图谱（the Cancer Genome Atlas，TCGA）数据库下载包含低级别脑胶质瘤（low-grade glioma，LGG）和高级别脑胶质瘤（high-grade glioma，HGG）lncRNA表达数据的数据集，识别LGG和HGG组织之间的差异表达lncRNA（differentially expressed lncRNA，DelncRNA），并分析HOXA-AS2水平与胶质瘤患者总生存期（overall survival，OS）之间的关系。从人胶质瘤细胞系SHG44中分离GSC，用流式细胞术检测CD133⁺富集的细胞，再用蛋白质印迹法（Western blot）检测干细胞相关蛋白（CD133、SOX2和OCT4）的表达水平。提取和识别SHG44-GSC衍生的外泌体，并用PKH26细胞膜染料进行荧光标记；再将转染了Cy3标记HOXA-AS2的SHG44-GSC与SHG44细胞进行间接共培养；后用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction，RTFQ-PCR）检测SHG44-GSC和SHG44-GSC衍生外泌体中HOXA-AS2的水平。使用pLVX-IRES-PURO HOXA-AS2慢病毒质粒和含靶向HOXA-AS2质粒的慢病毒shRNA进行慢病毒转染。采用细胞计数试剂盒-8（cell counting kit-8，CCK-8）和transwell实验检测SHG44-GSC衍生的外泌体HOXA-AS2对SHG44细胞增殖和侵袭能力的影响。结果：HOXA-AS2在胶质瘤中呈现高表达，且与患者较差的OS相关（P<0.01）。SHG44-GSC中CD133⁺细胞比例明显高于SHG44细胞（P<0.000 1），SHG44-GSC中干细胞相关蛋白（CD133、SOX2和OCT4）的表达水平明显高于亲代SHG44细胞（P<0.000 1），并且SHG44-GSC中HOXA-AS2水平显著升高（P<0.000 1）。PKH26标记的外泌体被SHG44细胞吸收，且SHG44细胞中可观察到Cy3标记的HOXA-AS2；HOXA-AS2 OE转染的SHG44-GSC细胞（SHG44-GSC/HOXA-AS2 OE）和SHG44-GSC/HOXA-AS2 OE衍生的外泌体（SHG44-GSC/HOXA-AS2 OE-Exo）中HOXA-AS2水平显著升高（P<0.01），在与SHG44-GSC/HOXA-AS2 OE细胞共培养的SHG44细胞中HOXA-AS2水平显著升高（P<0.01）。SHG44-GSC/HOXA-AS2 OE-Exo可显著促进SHG44细胞增殖、迁移和侵袭。结论：来自SHG44-GSC的外泌体HOXA-AS2能显著促进胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭和干细胞特性，提示HOXA-AS2可能是脑胶质瘤潜在的治疗靶点。     

维吾尔医“库西提”法炮制技术规范化研究及巴豆脂肪油含量测定

目的:评价维吾尔医“各立衣克买提”泥法炮制技术和在这种炮制方法前提下改进的新“库西提”法炮制技术对巴豆中脂肪油的含量测定的影响。方法:利用两种炮制方法炮制生巴豆,按《中国药典》2015年版一部巴豆项下的脂肪油含量测定方法进行测定。结果:采用这两种方法炮制的巴豆根据炮制时间不同脂肪油含量依次递减。结论:采用新“库西提”法炮制技术炮制的巴豆的脂肪油含量明显降低。     

穴位埋线治疗进行性肌营养不良的疗效观察

目的观察穴位埋线联合糖皮质激素及神经营养药物治疗进行性肌营养不良的临床疗效。方法 50例进行性假肥大性肌营养不良患者,随机分为治疗组和对照组,每组25例。对照组采用糖皮质激素及神经营养药物治疗,治疗组在对照组基础上采用穴位埋线治疗。观察两组治疗前后10米步行时间和登梯时间及血清肌酸磷酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)水平的变化,并比较两组临床疗效。结果两组治疗后及随访10米步行时间和登梯时间与同组治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗后及随访10米步行时间和登梯时间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后及随访血清CPK、LDH水平较同组治疗前明显下降,差异有统计学意义(P<0.01);治疗组治疗后及随访血清CPK和LDH水平低于对照组(P<0.01)。治疗组总有效率为96.0%,对照组总有效率为72.0%,治疗组总有效率高于对照组(P<0.05)。结论穴位埋线联合糖皮质激素治疗进行性肌营养不良的临床疗效显著,可作为临床治疗进行性肌营养不良方案的优选方法。     

肾虚证动物模型研究进展

肾虚证动物模型一直是中医证候研究的重点,提供与人类疾病类似的肾虚证动物模型,有助于深入研究肾虚证本质及其治疗。近年来建立了不少肾虚证动物模型,然而不同的肾虚证模型特点也不尽相同。对临床常见肾虚证型,从肾阳虚、肾阴虚、肾精不足、肾气虚方面进行概述,并对其存在的不足进行思考,以期为肾虚证动物模型的构建及其证候生物学机制研究提供新思路。     

不同严重程度鼻炎患者尘螨舌下特异性免疫治疗临床效果观察

目的　评估不同严重程度变应性鼻炎（allergic rhinitis，AR）患儿进行规范化舌下特异性免疫治疗（sublingual immunotherapy， SLIT）的疗效。方法　选取2017年5—12月首都儿科研究所附属儿童医院耳鼻喉科就诊的3～14岁对粉尘螨过敏的AR患儿181例， 按治疗方式不同分为对照组（n＝92， 给予常规药物治疗）和SLIT组（n＝89， 给予尘螨特异性免疫治疗）； 采用AR评分标准， 根据患儿鼻部症状总评分（total nasal symptoms score， TNSS）， 将对照组分为轻度组（n＝35）、中度组（n＝28）和重度组（n＝29）；将SLIT分为轻度组（n＝27）、中度组（n＝33）和重度组（n＝29）。收集第6个月、 1年、 2年的随访数据， 分别对患儿进行TNSS、 鼻炎用药评分（total rhinitis medication scores， TRMS）和视觉模拟量表（visual analogue scale，VAS）评分。结果　（1）治疗2年后， SLIT组与对照组患儿TNSS评分分别为0.61±0.73、 1.61±1.17， TRMS分别为0.21±0.41、 0.59±0.70， VAS分别为0.63±0.70、 1.53±1.24， 两组间差异有统计学意义， Z值分别为6.269、 4.139、5.174， P值均＜0.05； （2）轻度组（n＝62）组内分析： SLIT组（n＝27）与对照组（n＝35）比较， 治疗6个月、 1年， 两组的TNSS、 TRMS、 VAS差异均无统计学意义（Z值分别为-0.108、 0.232、 0.788， 0.774、 0.033、 -0.718； P值均＞0.05）； 治疗2年时两组的TRMS、 VAS差异无统计学意义（Z值分别为0.230、 1.255， P＞0.05）， TNSS在两组间差异有统计学意义（Z值为2.528， P值均＜0.05）； （3）中度组（n＝61）组内分析： 与对照组（n＝28）比较， SLIT组（n＝33）治疗6个月， TRMS、 VAS在两组间差异均无统计学意义（Z值分别为-0.413、 0.412， P值均＞0.05）， 但两组的TNSS差异有统计学意义（Z值为2.397， P＜0.05）； 治疗1年、2年的TNSS、 TRMS、 VAS两组间比较， 差异均有统计学意义（Z值分别为4.952、 2.740、 3.293； 4.743、 2.505、 3.330； P值均＜0.05）； （4）重度组（n＝58）组内分析： 与对照组（n＝29）比较， SLIT组（n＝29）治疗6个月、 1年、 2年的TNSS、 TRMS、 VAS在两组间差异均有统计学意义（Z值分别为2.567、 2.086、 2.781， 4.996、 4.264、 2.756， 4.253、 4.480、 4.515， P值均＜0.05）。结论　采用标准化粉尘螨滴剂舌下治疗尘螨致敏AR患儿， 治疗2年可获得较单纯药物治疗更佳的疗效， 尤其在病情严重患儿，其获益更大。     

中性粒细胞蛋白-1、-2、-3在膀胱癌患者组织中的 表达及与预后的相关性

目的：研究中性粒细胞蛋白（HNP）-1、-2、-3 在膀胱癌患者组织中的表达及与预后的关系。方法：采用 免疫组织化学法检测膀胱癌组织中HNP-1、HNP-2、HNP-3 的表达情况，分析HNP-1、HNP-2、HNP-3 在膀胱癌 组织中的表达与膀胱癌临床病理特征的相关性及预后相关因素的关系。结果：HNP-1、HNP-2、HNP-3 蛋白在膀 胱癌患者组织中的阳性表达率分别为70.51%、72.66%、71.94%，均明显高于癌旁正常组织8.10%、3.23%、6.45%， 差异有统计学意义；HNP1、HNP2、HNP3在膀胱癌患者中的表达水平与肿瘤的病理分级、临床分期、淋巴结转 移及复发等生物学行为相关；生存曲线结果提示这3 种蛋白表达阳性的5 年生存率均显著低于表达阴性的患者。 Cox 比例风险模型分析结果提示HNP-1、HNP-2、HNP-3 的表达是影响膀胱癌预后的关键风险因素。结论：HNP- 1、HNP-2、HNP-3 在膀胱癌组织中高表达且表达程度随肿瘤发展进一步增加；HNP-1、HNP-2、HNP-3 是影响患 者预后的关键危险因素，阳性表达的患者５年生存率显著降低；HNP-1、HNP-2、HNP-3 与膀胱癌病情发展、炎 症程度及预后密切相关。     

干扰素-α诱导蛋白27在胰腺癌组织中的表达及临床意义北大核心

目的:探讨干扰素-α诱导蛋白27(IFI27)在胰腺癌组织中的表达情况及其临床意义。方法:免疫组织化学法检测IFI27蛋白在胰腺癌、癌旁及慢性胰腺炎组织中的表达情况,分析阳性表达与胰腺癌患者相关临床病理参数和预后的关系。利用生物信息学方法基于TCGA数据库分析IFI27在胰腺癌组织中的表达差异和预后相关性。结果:IFI27在胰腺癌组织中表达的阳性率高于癌旁以及慢性胰腺炎组织(P<0.05),且与血管侵犯、淋巴结转移以及肿瘤分化程度相关。胰腺癌患者的总体生存期与肿瘤分化程度、血管侵犯、淋巴结转移以及IFI27阳性表达相关。多因素分析显示IFI27阳性表达是胰腺癌患者预后的独立危险因素。基于TCGA数据库分析得出IFI27在胰腺癌组织中的表达量高于正常组织(P<0.05),生存曲线提示IFI27低表达患者的预后优于高表达患者(P<0.05)。结论:IFI27高表达的胰腺癌患者预后差,IFI27阳性表达是胰腺癌患者的独立预后指标。