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目的 制备兔抗人KiSS-1多克隆抗体.方法 聚合酶链反应(PCR)法扩增出KiSS-1基因,将其克隆入原核表达载体pET28中,转化大肠埃希菌BL21(DE3).采用异丙基-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白的表达,采用镍离子螯合琼脂糖凝胶(Ni^2+-NTA)亲和层析法纯化重组蛋白,以之为免疫原免疫家兔,制备多克隆抗体,并用酶联免疫吸附测定(ELISA)、Western blot及免疫组织化学法检测抗体.结果 成功构建了KiSS-1原核表达载体pET28/ KiSS-1,高效表达并纯化KiSS-1蛋白,间接ELISA检测所制备抗体的效价为1:6 400.Western blot鉴定制备的抗体与KiSS-1蛋白能特异性结合,免疫组织化学法检测结果表明该抗体识别人卵巢癌组织中的天然KiSS-1.结论 成功制备了效价高、特异性较强的兔抗人KiSS-1抗体,为进一步探讨KiSS-1在卵巢癌的发生、发展过程中的作用奠定了基础. 相似文献
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慢性粒细胞白血病伴假性低血糖2例 总被引:2,自引:0,他引:2
1临床资料1.1例1男,丁**,27岁。主因反复发热2周,于2004年11月10日人我院血液科诊治,查体:一般状态较好,胸骨下端压痛,脾大肋下可及8cm、质硬。血常规:WBC428.0×109/L,原始+早幼粒0.06,中幼粒0.26,嗜酸0.03,嗜碱0.05;HGB96g/L,PLT1247×109/L。骨髓象诊断为慢性粒细胞白血病。空腹血糖2.1mmol/L(参考范围3.89~6.11mmol/L),静点葡萄糖治疗后2次复查血糖分别为1.64~1.83mmol/L,患者无低血糖表现,胰岛系列结果示空腹及餐后两小时胰岛素及C肽测定值正常,B超示胰腺正常,除外胰岛细胞瘤所致低血糖。同时检测指端全血葡萄糖值正常,考虑为… 相似文献
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乙型肝炎病毒血清标志物和ALT、AST与HBV-DNA含量间的关系探讨 总被引:1,自引:0,他引:1
乙型肝炎病毒(HBV)感染人体后,血液中会出现大量的病毒颗粒.目前ELISA法主要检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb即乙肝五项标志物。判断患者体内是否发生HBV感染.检测乙肝病毒基因表达产物及患者的免疫反应产物.只能间接地提供标本HBV感染的依据。乙型肝炎病毒HBV-DNA含量是判断病毒复制活跃和具有传染性最为直接和可靠的依据.其含量能直接代表患者病毒血症的水平。在病毒的致病机制上,目前认为肝脏的损伤不是HBV直接导致.而是HBV的复制启动和激发集体的免疫反应所致。按照现代循证医学的方法观点.我们既要对新的检测方法进行比较分析.也有必要对已有的检测方法进行重新评估,为探讨慢性乙肝血清HBV-DNA含量与血清标志物和肝功能(ALT,AST)的关系.设计了以下实验。 相似文献
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目的 探究新型炎症指标NLR、LMR及NMP在急性胰腺炎(AP)严重程度评估中的价值.方法 选取2012年5月至2019年2月于本院收治的且明确诊断为AP患者113例作为研究对象,按照AP诊断结果分为MAP组(n=38)、MSAP组(n=37)及SAP组(n=38).记录患者入院首次白细胞(WBC)、血小板(PLT)、白蛋白(ALB)、C-反应蛋白(CRP)和淀粉酶(AMY)等指标,并依据中性粒细胞/淋巴细胞(NLR)=NEU/LYM、淋巴细胞/单核细胞(LMR)=LYM/MON及中性粒细胞×单核细胞(NMP)=NEU×MON公式计算NLR、LMR和NMP等炎症指标.采用受试者诊断曲线评价上述炎症指标对于预测中重度AP发生的诊断性能.结果 3组WBC、PLT、ALB、CRP、AMY、NLR、LMR、NMP及住院期间死亡率等指标比较差异有统计学意义(P<0.05).ROC曲线表明单一指标NMP鉴别中重度AP发生的诊断价值最高,而联合检测诊断曲线下面积高达0.92.结论 新型炎症指标NLR、LMR和NMP在不同严重程度AP患者中存在差异,且联合检测对于预测中重度AP发生具有较高的诊断价值. 相似文献
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目的探讨血清α-L-岩藻糖苷酶(AFU)和腺苷脱氨酶(ADA)联合检测在妊娠期糖尿病(GDM)病情控制中的临床价值。方法选取我院86例GDM患者和36例正常妊娠对照人员进行血清AFU和ADA测定。比较糖尿病组和正常对照组间AFU、ADA相关指标的差异,并分析AFU、ADA与空腹血糖(FPG)和糖化血红蛋白(HbA1c)的相关性。结果两组实验对象血清AFU、ADA比较,差异有统计学意义(P0.05);实验组AFU、ADA与FPG和HbA1c有显著相关性(P0.05),而对照组AFU、ADA水平与FPG和HbA1c无显著相关性(P0.05);血清AFU、ADA与FPG、HbA1c、AST及ALT呈正相关,具有统计学差异(P0.05);与年龄、BMI、血压无相关性。结论 GDM患者血清AFU和ADA活性明显升高,分别与FPG、HbA1c呈正相关,联合检测可反映患者糖代谢控制的情况,是临床诊疗的有效指标。 相似文献
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目的探讨血清及腹腔液CA125测定在子宫内膜异位症(endometriosis,EM)中的诊断价值。方法采用放射免疫法测定60例子宫内膜异位症患者(试验组)及30例正常女性(对照组)血清及腹腔液中的CA125。结果试验组的血清CA125及腹腔液CA125阳性率显著高于对照组(P〈0.05);血清CA125诊断子宫内膜异位症的敏感性及特异性分别为63.33%及76.67%;腹腔液CA125诊断子宫内膜异位为80.00%及93.33%。结论测定腹腔液CA125可提高诊断EM的灵敏度,较血清CA125具有更高的敏感性及特异性,对EM的辅助诊断有一定的价值。 相似文献
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目的探讨分子杂交技术检测人乳头瘤病毒(HPV)的基因分型情况。方法利用核酸扩增和分子杂交技术检测临床送检标本19种HPV型别。结果 451例标本中共检出HPV阳性89例,感染率19.7%。单型感染72例,感染率16%,多型感染17例,感染率3.7%.共检出14种HPV。结论该技术对HPV进行基因分型,可同时检测19种HPV型别,并检出具体的感染型别,对于生殖道感染以及子宫颈癌的早期发现,预防和治疗具有重要意义。 相似文献
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目的 探讨分离胶促凝剂真空负压采血管采集全血标本对荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)结果的影响.方法 分别用分离胶促凝剂真空负压采血管和普通第二代促凝剂真空负压采血管同时采集90例乙型肝炎患者空腹静脉血,对不同方式所采集标本测得的HBV DNA结果进行统计学分析.结果 以HBV... 相似文献