灵芝孢子油与深海鱼油联合应用对小鼠学习记忆及海马神经元表达NOS的影响

目的探讨灵芝孢子油与深海鱼油联合应用对小鼠学习记忆及海马神经元表达NOS的影响。方法将受孕小鼠随机分为4组,自受孕第1天起分别胃饲生理盐水、灵芝孢子油、深海鱼油和灵芝孢子油加深海鱼油。在母鼠分娩21d后改为胃饲其幼鼠,然后将出生后45d的幼鼠处死。处死前进行Morris水迷宫行为学测试,处死后应用酶组织化学法检测海马神经元NOS的表达。结果在Morris水迷宫检测中,灵芝孢子油组、深海鱼油组和灵芝孢子油加深海鱼油组小鼠的逃逸潜伏期明显缩短。灵芝孢子油组和灵芝孢子油加深海鱼油组的小鼠平台象限游泳距离有增加。灵芝孢子油加深海鱼油组的小鼠大脑海马NOS阳性神经元与其它组的小鼠比较有显著性增加。结论灵芝孢子油和深海鱼油联合应用能够促进小鼠学习记忆能力及其大脑海马神经元表达NOS。     

移植神经干细胞促进脊髓全横断大鼠结构与功能修复的研究

目的 探讨移植神经干细胞对脊髓全横断性大鼠部分结构与功能修复的影响。方法 在脊髓全横断处移植神经干细胞60d后，在横断处下方3mm注射荧光金逆行标记轴突再生的上运动神经元，用免疫组织化学检测神经干细胞在宿主内的分化，同时用体视学方法观测脑干红核和大脑皮质感觉运动区内锥体细胞层的神经元密度变化。用BBB评分法和爬网格法观测大鼠后肢运动功能的恢复等。结果 移植的神经干细胞能在宿主内存活并向前后方向迁移到脊髓内，部分神经干细胞分化为GFAP、NF-200和GAP-43阳性细胞。移植神经干细胞后在红核和感觉运动区内锥体细胞层可见有被荧光金标记的神经元胞体，脊髓横断处附近脊髓组织的溃变程度减轻，红核及躯体感觉运动区内神经元密度高于未移植组，大鼠后肢的自主运动功能明显好于未移植组。结论 神经干细胞移植入损伤脊髓后能分化为神经元及神经胶质细胞，能减轻脊髓的继发性损伤，保护受损伤的神经元，促进运动功能的恢复。     

施万细胞和一氧化氮合酶抑制剂对大鼠脊髓损伤后背核神经元存活及其轴突再生的影响

目的探讨施万细胞(SCs)和一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-NNA联合应用能否促进脊髓损伤后背核神经元存活及其轴突再生。方法20只成年大鼠分为对照组、SCs组、L-NNA组和SCs L-NNA组。在SCs L-NNA组动物T11脊髓段半横断后在损伤处植入施万细胞，术后腹腔内注射L-NNA。结果脊髓半横断后30d，对照组L1脊髓段损伤侧背核神经元数量减少，其胞体皱缩，NOS表达阳性。SCs组存活的神经元增加的同时其NOS表达增强，胞体也发生皱缩。L-NNA组和SCs L-NNA组存活的神经元也增加，但NOS表达降低，其胞体皱缩得到改善。各组中仅在SCs L-NNA组L1脊髓损伤侧背核观察到有被FG标记的神经元胞体，提示其再生轴突穿越损伤区到达头端脊髓组织。结论SCs和L-NNA都可促进脊髓半横断背核受损伤神经元的存活；两者联合应用能更好地促进受损伤背核神经元存活及其轴突再生。     

红景天镇静催眠作用的实验研究

目的探讨中药红景天(Rhodiola rosea)的镇静催眠作用。方法取雄性SD大鼠30只,设正常对照组(不灌服任何药物)、阴性对照组(灌服羧甲基纤维素钠溶液)、地西泮组(灌服地西泮溶液)、红景天低剂量组(灌服低剂量红景天)、红景天中剂量组(灌服中剂量红景天)和红景天高剂量组(灌服高剂量红景天),每组5只。灌服药物1h后,各组动物按照55mg/kg的剂量腹腔注射0.1%戊巴比妥钠溶液,记录每只大鼠从腹腔注射戊巴比妥钠到翻正反射消失的时间为睡眠潜伏期,翻正反射消失的到翻正反射开始出现的时间为睡眠时间,观察灌服不同剂量红景天对大鼠睡眠潜伏期及睡眠时间的影响。结果与正常对照组(3.24±0.22、93.96±2.25)相比,灌服中剂量及高剂量的红景天可以缩短大鼠的睡眠潜伏期(2.42±0.33,P<0.01;2.16±0.13,P<0.01),亦可延长大鼠的睡眠时间(102.54±3.15,P<0.05;107.10±7.75,P<0.05)。结论中剂量及高剂量的的红景天对大鼠具有镇静催眠作用。     

施万细胞对大鼠脊髓半横切后背核神经元存活及其表达NOS的影响

目的：探讨移植的施万细胞对大鼠脊髓半横切后背核神经元存活及其表达NOS的影响。方法：50只成年SD大鼠被分为实验组和对照组。在胸11脊髓段半横切后立即在损伤处移植入施万细胞。结果：脊髓半横切后，15d和25d对照组L1脊髓段损伤侧背核神经元的存活数均比未损伤侧的明显减少。存活的神经元胞体出现明显皱缩，有些神经元呈现NADPH－d阳性。15d和25d施万细胞组L1脊髓段损伤侧背核神经元的存活数则比同期对照组的明显增加，表达NOS的存活神经元数也随之增多。但存活的神经元胞体仍然是皱缩的。结论：移植的SCs可促进受损伤的背核神经元存活及其表达NOS，但不能阻止其胞体出现皱缩。     

督脉电针与神经干细胞移植联合应用促进大鼠受损伤脊髓组织产生神经生长活性物质

目的探讨督脉电针与神经干细胞移植联合应用能否促进受损伤脊髓组织产生神经生长活性物质。方法成年大鼠分为正常组、对照组、神经干细胞移植组（NSCs组）、督脉电针组（电针组）和督脉电针＋神经干细胞移植组（电针NSCs组）。除正常组外均实施T10段脊髓全横断手术，其中电针组和电针NSCs组于术后5d进行电针治疗。分别于术后14d和28d取材，进行受损伤脊髓组织环-磷酸腺苷（cAMP）含量的放射免疫检测；用Westen blottlng检测神经营养素-3（NT-3）、神经营养因子受体（Trk）以及生长相关蛋白-43（GAP-43）的水平。结果 1．在术后14d，NSCs组、电针组和电针NSCs组的脊髓损伤区cAMP含量较正常组有增加。但除电针组外，脊髓损伤区的上段或下段组织cAMP含量低于正常组。在术后28d，电针NSCs组脊髓损伤区上段、下段组织cAMP含量仍保持较高水平。NSCs组和电针NSCs组的脊髓损伤区cAMP含量较正常组有所增加。2．NT-3、Trk及GAP-43的表达以电针组和电针NSCs组较为明显，对照组和NSCs组的3种蛋白表达均低于电针组和电针NSCs组。结论督脉电针能促进受损伤的脊髓组织产生cAMP；督脉电针与NSCs移植联合应用能保持受损伤的脊髓组织较高水平的cAMP，而且NT-3、Trk及GAP-43的含量也有增高的趋势。     

一种快速、经济、省时的施万细胞体外培养和纯化方法

目的 探讨一种快速、简单、经济的施万细胞(SCs)培养和纯化方法,为SCs体内移植研究提供稳定及可靠的细胞来源.方法 选用SD乳鼠,取坐骨神经和臂丛神经,用单细胞双酶消化法和半植块单酶消化法培养SCs.结果 用同样多的组织材料,半植块单酶消化法所获得的SCs比单细胞双酶消化法所获细胞至少多两倍,省时40min.免疫组织化学染色显示,获得的施万细胞96%以上呈S-100阳性.结论 用半植块单酶消化法培养SCs,可以在短时间内获得足够数量和足够纯度的SCs.     

灵芝孢子对大鼠受损伤的脊髓神经干细胞增殖和分化的影响

目的探讨灵芝孢子对大鼠受损伤的脊髓自身神经干细胞增殖和分化的影响。方法将成年SD 大鼠随机分成损伤不用药组和损伤用药组。对两组动物 T12脊髓段施行右侧半横断后,在其腹腔内注射溴脱氧尿嘧啶(5’-Bromo-2’-deoxyuridine,BrdU 50mg/kg),每天2次,连续注射10天。损伤用药组动物胃饲灵芝孢子。在脊髓损伤后2周和4周,用免疫荧光组织化学法检测两组动物脊髓中央管室管膜细胞的 BrdU、nestin、neurofilament(NF)、oligodendrocyte specific protein 和 glial fibrillary acidic protein(GFAP)标记物,并分析其增殖和分化情况。结果损伤用药组大鼠脊髓室管膜细胞 BrdU 阳性染色数量[(45.67±3.62)个]高于损伤不用药组[(29.91±3.68)个]。在脊髓白质中,有些 BrdU 阳性细胞同时表达 oligodendrocyte specific protein 或nestin 或 NF 或 GFAP。结论灵芝孢子能够促进大鼠受损伤脊髓中央管室管膜细胞增殖,少数增殖后的细胞能分化为神经干细胞、神经元...     

灵芝孢子对大鼠脊神经腹根切断后脊髓运动神经元存活及其NT-3、NOS表达的影响

目的探讨灵芝孢子（萌动激活赤灵芝孢子）对大鼠脊髓受损伤运动神经元存活和表达神经营养素-3（NT-3）及一氧化氮合酶（NOS）的影响.方法对单侧腹根切断后的大鼠胃饲不同剂量的灵芝孢子,计算受损伤运动神经元存活率;用免疫组织化学及原位杂交方法检测NT-3的表达;用酶组织化学方法检测NOS的活性.结果腹根切断后35 d,对照组运动神经元存活率为47.32%,灵芝孢子低、中、高剂量组的运动神经元存活率分别为67.11%、72.67%和81.67%;腹根切断后高剂量组存活的运动神经元NT-3和NOS的表达都高于对照组. 结论灵芝孢子促进大鼠脊髓前角受损伤的运动神经元存活,其存活率与用药剂量有关;灵芝孢子促进大鼠脊髓存活的运动神经元表达NT-3和NOS.     

体外诱导的皮肤源性神经干细胞在大鼠受损伤脊髓内的存活和分化

为寻找新的神经干细胞来源用于治疗急性脊髓损伤的实验研究,本实验采用绿色荧光大鼠（GFP转基因鼠）有毛皮肤在体外经剪碎,胰酶消化,过滤细胞,无血清培养液培养分离细胞,用表皮生长因子和成纤维细胞生长因子促进细胞增殖,去除生长因子后用含血清培养液培养细胞等过程,采用神经上皮干细胞蛋白（nestin）、微管相关蛋白（MAP2）、神经丝蛋白（NF-200）和胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）抗体免疫细胞化学染色法对培养细胞的分化状况进行鉴定。结果：培养3d的细胞大多数出现贴壁或死亡,仅少量悬浮生长,5～6d时悬浮生长细胞增殖成球形,10d已形成较多的细胞球。