转化生长因子-β1诱导体外失神经骨骼肌肌源性干细胞分化的研究

目的 探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)对体外失神经骨骼肌肌源性干细胞(MDSCs)分化方向的作用.方法 采用差速贴壁法分离出大鼠失神经骨骼肌肌源性干细胞,利用TGF-β1诱导分化.将细胞随机分为两组:A,对照组;B,10 ng/ml TGF-β1处理组.在相差显微镜下观察细胞生长情况,用免疫细胞化学法、RT-PCR和Western blot检测两组细胞中Ⅰ型胶原蛋白(COL-Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(COL-Ⅲ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(vimentin)和干细胞抗原-1(Sca-1)的表达水平变化.结果 在体外,对照组失神经骨骼肌MDSCs表达和合成COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA和vimentin的水平极低,而表达和合成Sca-1的水平很高.10 ng/ml TGF-β1处理后,失神经骨骼肌MDSCs能高表达COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA和vimentin,而低表达Sca-1.在TGF-β1的作用下,失神经骨骼肌MDSCs中COL-Ⅰ的表达水平在第2天时达最高值(12.5591±0.3389),约为对照组的3倍;COL-Ⅲ在5d时达最高值(0.8956±0.0438),约为对照组的23倍;α-SMA在第5天时达最高值(1.1090±0.0018),约为对照组的18倍;vimentin在5d时达最高值(0.1794±0.0019),约为对照组的8.5倍;Sca-1在第2天时开始降低,第5天时降低最显著(0.0636±0.0015).结论 TGF-β1能诱导体外失神经骨骼肌MDSCs向肌成纤维母细胞(myofibroblasts)分化,促进细胞合成和分泌细胞外基质.     

经皮Herbert-Whipple空心螺钉固定治疗无移位腕舟骨骨折

目的探讨经皮掌背侧入路Herbert-Whipple空心螺钉固定治疗无移位腕舟骨骨折的手术方法及临床经验。方法经皮掌背侧入路治疗无移位腕舟骨骨折18例,B2和D2型均采用掌侧入路,B1型采用背侧入路。结果术后随访18例骨折均愈合,平均愈合时间8.3周。患手握力恢复至健侧的85%(80%～93%),患侧腕关节屈伸活动度恢复至健侧的80.3%(71%～95%)。患者于术后平均7.2周返回原工作岗位。结论新鲜的无移位舟骨骨折,术前常规给予舟骨CT三维重建以明确其骨折分型,早期经皮空心螺钉固定,术后早期开始功能锻炼,骨折愈合率高,功能恢复良好。     

防老花眼从40岁开始

50岁的周先生平时喜欢看报纸，但最近觉得看上面的小字有点吃力，把报纸放远点又稍微能看清楚些，而且有越来越严重的趋势。周先生到医院就诊，被诊断为眼睛老视。     

CTGF shRNA表达质粒的构建及对大鼠肌源性干细胞CTGF表达的影响

目的 观察针对结缔组织生长因子(CTGF)所构建的短发卡RNA(shRNA)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导大鼠肌源性干细胞(MDSCs)表达CTGF的影响.方法 针对CTGF mRNA上的序列,体外合成表达shRNA的DNA质粒载体pGenesil-3-shRNA并行测序鉴定;从新生SD大鼠骨骼肌中分离培养MDSCs并鉴定.实验分成对照组(MDSCs+TGF-β1培养),实验组(MDSCs+ TGF-β1+pGenesil-3-shRNA培养).观察shRNA质粒转染结果.利用Real-Time PCR及Western Blot检测CTGF mRNA和CTGF蛋白表达.结果 正确构建了靶向CTG,F基因的质粒载体pCenesil-3-shCTGF;大鼠MDSCs 48 h、72h和96h时实验组的CTGF mRNA及蛋白质水平均低于对照组(P＜0.05).结论 针对CTGF构建的pGenesil-3-shCTGF能够转染MDSCs,并在48h、72h和96h时能明显降低TGF-β1刺激MDSCs所产生CTGF的表达.     

基因干扰机制及其在细胞信号转导中的应用

基因干扰是一种新兴的基因阻断技术,是外源和内源性双链RNA在细胞内使特异性序列的基因表达受抑。基因干扰技术能高效特异的阻断基因的表达,可以确定复杂的信号传导途径中不同基因的上下游关系,是研究信号转导通路的有力工具。基因干扰技术可有效抑制目的基因表达mRNA以及蛋白质产物,其可以简便、特异、高效、稳定地下调目的基因的表达,亦可在不影响其他物质的情况下,剔除目的基因。基因干扰技术比以前用于基因功能研究和应用的各种方法更优秀,但基因干扰技术对于哺乳动物细胞株的转染效率低;哺乳动物细胞中对双链RNA或小干扰RNA的导入会产生拮抗作用等方面亦有待改进。将有效且具高度安全性的小干扰RNA用于医疗,前景令人期待。     

周围神经卡压综合征诊断与治疗进展

周围神经卡压综合征是一种周围神经特定部位受卡压或压迫引起的相应神经功能障碍性疾病,多发生于上臂、肘、前臂、腕部及肩胛部.临床上多根据病史及特有临床表现进行定位诊断,并根据神经卡压的不同病理变化采取合理的治疗方案,既不可一律手术,也不能一味等待拖延而失去良好治疗时机,造成不可逆性神经损伤.该文就周围神经卡压综合征临床诊断、治疗进展作一综述.     

重建感觉的腓肠神经营养皮瓣修复足跟部缺损的临床研究

目的 利用腓肠神经皮瓣所带的腓肠神经内侧支和外侧支与创面周围胫神经端侧缝合,重建皮瓣的感觉以及恢复足背外侧感觉,以解决患者足踝部感觉缺失的痛苦并恢复覆盖足跟皮瓣的感觉.方法 1999年8月-2007年8月,收治足跟部皮肤软组织缺损25例(27足),进行腓肠神经营养血管皮瓣移植,其中14例行腓肠神经营养皮瓣与腓动脉皮瓣联合皮瓣移植.切取皮瓣时,在腓肠神经近端多取1～3cm.腓肠神经内侧支和外侧支,断端与胫神经行端侧缝合.术后6～9个月随访,按照感觉检查分级标准把皮瓣和足背外侧感觉恢复情况分成S_1～S_55级,并按感觉恢复范围分成R_1,小于25%;R_2,25%～50%;R_3,50%～75%;R＿4,75%～100%.结果 术后随访6～9个月,皮瓣及足背外侧皮肤感觉恢复情况:S_46足、S_318足、S_23足.皮瓣及足背外侧感觉恢复范围:R_412足、R_315足.结论 作腓肠神经营养皮瓣移植时行腓肠神经与创面周围胫神经端侧缝合手术简单,对胫神经无不良影响,而皮瓣和足背外侧感觉恢复较好.腓肠神经营养皮瓣与腓动脉皮瓣的联合皮瓣切取面积大,对大面积的足部皮肤缺损是一种理想的方法.     

肿瘤坏死因子对周围神经损伤后感觉神经元的保护作用

目的 探讨肿瘤坏死因子－α（ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ ａｌｐｈａ，ＴＮＦ－α）对周围神经损伤后感觉神经元的保护作用。方法 取Ｗｉｓｔａｒ大鼠２０只，分成ＴＮＦ－α他ＳＡＬ两组。右侧坐骨神经切断后，将神近断端套入硅胶管内。ＴＮＦ－α组自硅胶管内注入１６αｌＴＮＦ－α（３０Ｕ／ｍｌ）。ＳＡＬ组在硅胶管内注射等量生理盐水。术后２周观察脊神经节内感觉神经元乙酰胆碱脂酶（ＡＣｈＥ０、一氧化     

三磷酸腺苷抑制肿瘤坏死因子-α诱导的肌源性干细胞凋亡及机制

目的 探讨三磷酸腺苷(ATP)对肌源性干细胞(MDSCs)凋亡的抑制作用及其机制.方法 采用差速贴壁法分离新生小鼠MDSCs,利用40μg/L肿瘤坏死因子(TNF)-α诱导MDSCs凋亡,100 μmol/L ATP抑制细胞凋亡.经流式细胞仪检测MDSCs的凋亡率和半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶( Caspase) -3/8的表达.结果 TNF-α诱导后,脱壁细胞明显增多,MDSCs的凋亡率由5.17％升至31.58％,增加了5倍,Caspase-3染色阳性细胞率由5.01％增至19.25％,Caspase-8染色阳性细胞率由2.97％增至8.58％.ATP作用后,MDSCs的凋亡率降至12.06％,减少了2/3,Caspase-3染色阳性细胞率降至9.86％,Caspase-8染色阳性细胞率降至6.96％,但仍高于对照组.结论 ATP能抑制MDSCs表达Caspase-3/8,减轻TNF-α诱导的MDSCs凋亡.     

前臂骨间背侧神经损伤误诊原因分析

目的 分析前臂骨间背侧神经损伤误诊的原因，以减少骨间背侧神经损伤的误诊。方法 对25例骨间背侧神经损伤的病例进行临床分析。结果 25例中诊断为皮肤损伤18例，合并骨折2例，肌腱损伤5例，误诊率为92％(23／25)。结论 缺乏对骨间背侧神经损伤的认识是引起误诊的主要原因。肌电图有助于确诊骨间背侧神经损伤。