原发性肝癌患者血清HBV DNA含量的测定

HBV感染与肝细胞癌的发生密切相关,血清HBV DNA是HBV复制活动最直接和可靠的标志,可以反映病变活动程度及不同临床演变过程。本文采用免疫荧光定量PCR检测186例原发性肝癌患者的血清HBV DNA含量,综合分析其与HBV血清学标志物的关系,并比较HCC肝炎活动期与静止期患者血清HBV DNA水平及与血清甲胎蛋白（AFP）的关系,为HCC的发病机制、诊断及治疗提供理论依据。     

浙江汉族人群线粒体DNA ND1基因G3316A突变与2型糖尿病

目的：研究与日本人2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）相关的线粒体DNA（mitochondria DNA,mtDNA）ND1基因G3316A突变在浙江汉族T2DM人群中的发生率及其临床意义。方法：采用PCR产物直接测序法对浙江籍汉族人群中无血缘关系的315名T2DM患者及158名正常对照的外周血mtDNA进行检测,并用DNASTAR和Antheprot 5.0软件分析突变位点。结果：在T2DM患者中检测到6例（占1.90%）G3316A突变,对照组中发现3例（占1.90%）突变,突变发生率在两组间差异无显著性（P＆gt;0.05）。携带G3316A位点突变的T2DM组与无该突变的T2DM组之间的临床特点（发病年龄、体重指数和血糖水平等）比较差异亦无显著性。蛋白二级结构中α-螺旋、β-折叠、β-转角和不规则卷曲的构成比没有发生改变。结论：线粒体DNA ND1基因G3316A突变可能与浙江汉族人群T2DM的发生无关,仅为人群中的基因多态性。     

浙江省HIV抗体盲样质控考核结果分析及不同品牌分析灵敏度比较

目的调查医疗机构选用不同方法学检测抗HIV抗体的能力情况,比较不同品牌和方法学对抗HIV抗体和抗原的分析灵敏度。方法定制6个不同浓度的抗HIV-1抗体标准物质,对218家实验室开展盲样质控考核,统计医院满分率、项目脱靶率和方法学脱靶率。采用3种不同稀释液对定制标准物质倍比稀释,获得低浓度抗HIV-1抗体和HIV-p24抗原标准物质,对考核中的6款化学发光品牌和3款ELISA品牌进行分析灵敏度的比较以及稀释液的影响比较。结果医院满分率为95.9%(209/218),抗HIV-1抗体项目脱靶率为1.8%,均为假阴性脱靶。ELISA、化学发光法(CLIA)和胶体金法(GICA)的脱靶率分别为0、13.3%和40.0%。在抗HIV-1抗体浓度为1 NCU/m L时3款CLIA品牌不能检出,1款CLIA品牌不能检出2 NCU/m L的抗体浓度。2款GICA品牌不能检出12 NCU/m L的抗体浓度。3、4代ELISA和3代CLIA品牌对抗HIV-1抗体检测的分析灵敏度优于部分4代CLIA品牌,而4代CLIA品牌对HIV-p24抗原的分析灵敏度显著高于4代ELISA。不同稀释液对检测结果影响存在显著差异,但不影响定性结果判断。结论 GICA检测抗HIV抗体存在较高的漏检风险。4代CLIA对HIV抗原检测分析灵敏度较高,但对抗HIV抗体检测的分析灵敏度相对弱于ELISA和3代试剂。稀释液的差异不是免疫定性分析的主要影响因素。     

非酒精性脂肪性肝病的血清蛋白质指纹图谱的临床研究

[目的]分析非酒精性脂肪性肝病患者血清蛋白质指纹图谱,探讨非酒精性脂肪性肝病患者蛋白表达的差异性。[方法]应用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）及弱阳离子交换蛋白质芯片（weak cationic exchanger protein chip）技术检测29例非酒精性脂肪性肝病患者和16例正常健康人血清,获得血清蛋白质指纹图谱。[结果]在非酒精性脂肪性肝病患者与正常对照组之间检测到14种差异蛋白（P〈0.05）。[结论]非酒精性脂肪性肝病与正常健康人之间存在一些差异表达蛋白质。     

应用SELDI-TOF-MS技术研究急性胰腺炎特异性血清标志物

目的 应用蛋白芯片表面加强激光解析电离-飞行时间-质谱（SELDI-TOF-MS）术揭示胰腺炎患者血清蛋白指纹特征,查找病情特异性血清标志物,探讨急性重症胰腺炎的早期诊断及评估的新方法.方法 收集急性胰腺炎患者血清标本52份,其中急性重症胰腺炎患者24份（SAP组）,急性轻型胰腺炎28份（MAP组）,同期健康人群血清52份（正常对照组）,应用SELDI检测急性胰腺炎患者及健康人群的蛋白质谱,按照临床胰腺炎分级,获得不同临床级别胰腺炎和健康人群的血清蛋白指纹图谱,应用计算机软件分析处理所有峰谱.结果 在质荷比（M/Z）1 000~20 000检出到127个蛋白峰,其中MAP组与正常对照组比较5个峰差异有明显统计学意义（P＜0.05）,MAP组与SAP组比较3个峰值差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 用SELDI-TOF-MS蛋白指纹图谱技术可筛选出有意义的生物标记差异蛋白,这对急性胰腺炎的诊断以及病情轻重的评估提供了新的路径.     

大萼香茶菜甲素对白血病细胞株Kasumi-1体外作用的研究

目的：观察大萼香茶菜甲素（macrocalyxin A,MA）体外对Kasumi-1细胞增殖、分化、凋亡的作用。方法：以不同质量浓度的（4、8、12、16μg/mL）MA体外作用于Kasumi-1细胞,运用细胞计数、MTT比色法检测细胞生长抑制率;细胞形态学、细胞免疫表型CD11b、CD13检测研究细胞分化;细胞形态学、Hoechst 33258荧光染色、DNA梯度电泳观察细胞凋亡;DNA亚二倍体及Annexin-V/PI双标记检测细胞凋亡率;质谱分析技术检测用药前后细胞小分子蛋白变化。结果：MA对Kasumi-1细胞有明显的抑制增殖作用,呈现作用时间和剂量的量效关系。较低浓度MA可以诱导细胞分化,CD11b表达明显上升,且有剂量量效关系;高浓度促进细胞凋亡,细胞瑞氏染色后出现典型的凋亡小体,亚G1峰显著增加,Annexin-V＋/PI-表达升高,Hoechst33258荧光染色出现凋亡特征性改变,琼脂糖电泳观察到DNA＂梯状条带＂。质谱分析显示,药物作用组与空白组对照分析出现13个差异蛋白峰,质荷比集中在1053-8581之间。结论：MA能抑制Kasumi-1细胞增殖,促进细胞分化,诱导细胞凋亡的作用。     

单纯线粒体DNA变异的2型糖尿病的检验诊断和临床研究

目的 分析线粒体DNA(mitochondria DNA,mtDNA)变异与2型糖尿病(T2DM)及其并发症的关系,探讨mtDNA检测对于T2DM的诊断价值.方法 采用PCR产物直接测序法对浙江籍汉族人群中无血缘关系的315例T2DM患者及158名正常对照个体的mtDNA片段(nt3153～nt3551)进行分析,同时对每例患者作常规生化检测.结果 T2DM患者组和健康对照组与标准序列比对存在着大量的基因变异位点,具有中国汉族人的多态性.把患者检测到的变异位点结合临床资料分析发现T3183A、A3243G、T3290C、T3338C、T3398C、G3421A、C3435T等基因变异与糖尿病家族史或并发症有密切联系.比较有家族史和无家族史的有基因变异的T2DM患者,有家族史组发病年龄较无家族史组明显提前[(47.7±11.1)岁与(55.1±13.8)岁,t=2.489,P＜0.05],有家族史组的体重指数(BMI)显著低于无家族史组[(20.59±5.16)kg/m2与(23.82±2.32)kg/m2,t=3.234,P＜0.01],差异有统计学意义;而两组的甘油三酯(TG)[(1.32±0.60)mmol/L与(1.33±0.68)mmol/L,t=0.071,P＞0.05]、总胆固醇(TC)[(4.07±1.23)mmol/L与(4.13±0.72)mmol/L,t=0.277,P＞0.05]、空腹血糖(FBG)[(9.27±2.52)mmol/L与(9.49±3.36)mmol/L,t=0.308,P＞0.05]等差异无统计学意义.结论 中国汉族人mtDNA存在多态性,T2DM患者mtDNA中存在着大量的变异位点,尽管mtDNA变异位点与糖尿病特征、家族史或并发症有一定关系,但目前尚不能作为诊断T2DM的独立指标.     

HBV感染者在不同感染期血清HBV DNA含量变化及意义

我国是乙型肝炎高发地区，感染乙型肝炎病毒（简称HBV）后的临床表现轻重不一，急性感染者大多可清除病毒，慢性感染者反复发作，部分演变成重型化、肝硬化。血清HBV DNA的复制水平变化可以反映其病变活动及不同临床演变过程。本文收集了272份HBV感染者在不同感染期血清标本，检测HBV DNA含量，并分为HBeAg阳性组和HBeAg阴性组，探讨不同感染状态下的HBV复制水平。     

浙江地区2型糖尿病危险因素分析

目的:探讨浙江地区2型糖尿病发病的潜在危险因素,以便科学有效地预防糖尿病发生。方法:通过对浙江省人民医院18岁～83岁的642例2型糖尿病住院患者采用非条件Logistic回归方法分析糖尿病的危险因素。结果:单因素分析显示腰臀围比≥1.3、BMI≥23.8 kg/m2、吸烟史、饮酒史、家族史、高血清总胆固醇(TC)、高血清甘油三酯(TG)、高水平低密度脂蛋白(LDL)、高水平空腹胰岛素、高血尿酸和高血压可能是2型糖尿病的危险因素。经多因素非条件Lo-gistic回归分析显示腰臀围比(OR=2.203),甘油三酯(OR=1.223),低密度脂蛋白(OR=1.273),高血压(OR=1.672),家族史(OR=2.570)是2型糖尿病的主要危险因素。结论:本研究显示肥胖、高血脂、高血压和家族史是2型糖尿病的独立危险因素。