体外培养破骨细胞功能的定量评定

目的 建立适用于体外药理学研究的破骨细胞骨吸收功能的定量评定方法。方法 机械分离法获得破骨细胞,接种于象牙薄片底物上,分别于培养１ｄ、３ｄ、５ｄ、７ｄ取出象牙薄片各４张,采用光镜和扫描电镜观察骨陷窝数量的变化;对随机拍摄的陷窝照片进行计算机形态计量分析,测算陷窝的面积和浓度。结果 骨吸收陷窝计数光镜法和扫描电镜法具有良好的相关性,ｒ＝０．９９９８,Ｐ〈０．００１。随着培养时间的延长,陷窝数量逐渐增     

中药对早期激素性股骨头坏死血管的影响

目的 研究不同中药在股骨头坏死中的作用。方法 直接的墨汁灌注,对股骨头进行观察。结果 造模组中血管有破坏,补肾组中有大量的新生血管,祛痰湿组的血管较少出现血管的扭曲。结论 补肾和祛痰湿法可改善股骨头内的微循环,减少骨坏死的程度。     

健脾方对废用性肌肉萎缩小鼠Akt/FOXO3a通路表达的机制研究

目的：探究健脾方基于Akt/FOXO3a信号通路预防小鼠废用性肌肉萎缩的作用机制。方法：将45只10周龄雄性C57/BL6小鼠随机分为对照组、模型组及健脾方组。通过后肢卸载构建废用性肌肉萎缩小鼠模型。对照组和模型组小鼠每天每只灌胃给予0.2 ml 0.9%NaCl溶液,健脾方组小鼠每天每只灌胃给予0.2 ml健脾方混悬液。给药28 d后,称取小鼠体质量、肌肉湿重（累积肌肉、腓肠肌、比目鱼肌、胫骨前肌、趾长伸肌及股四头肌）,qRT-PCR检测腓肠肌中IGF-1、PI3K、Akt、Atrogin及MuRF1 mRNA的表达水平,Western blot检测腓肠肌中p-Akt、p-FOXO3a、Akt、FOXO3a蛋白的表达水平。结果：(1)与对照组比较,模型组小鼠四肢抓力/体质量比值、肌肉湿重/体质量比值、肌纤维横截面积和直径明显降低（P<0.05）。与模型组比较,健脾方组小鼠四肢抓力/体质量比值明显增加（P<0.05）;累积肌肉、比目鱼肌、胫骨前肌、股四头肌的湿重/体质量比值明显增加（P<0.05）;肌纤维横截面积明显增加（P<0.05）。(2)健脾方干预后,小鼠...     

密骨胶囊延缓原发性骨质疏松症骨量丢失的Ⅲ期临床试验

目的确证密骨胶囊维持或升高原发性骨质疏松症骨矿密度的临床有效性。方法采用随机、阳性药物平行对照、双盲单模拟、多中心的试验设计方法,将480例原发性骨质疏松症（肝肾亏虚）患者随机分为试验组（360例）和对照组（120例）;试验组口服密骨胶囊,对照组口服仙灵骨葆胶囊及模拟剂。两组疗程均为6个月,分别观察L2-L4、股骨颈、大粗隆和Ward三角部位骨矿密度值的变化情况。结果试验组维持或升高骨矿密度的总有效率为95.49%,对照组为95.80%,组间差异无统计学意义（P〉0.05）。试验组治疗后股骨颈和Ward三角部位骨矿密度值显著升高,与基线水平比较差异有统计学意义（P〈0.05）;L2-L4和大粗隆部位治疗前后无明显变化;对照组治疗后Ward三角部位骨矿密度值显著升高,与基线水平比较差异有统计学意义（P〈0.05）,其他3个部位骨矿密度值变化均无统计学意义（P〉0.05）。组间治疗后比较,各部位骨矿密度值差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论密骨胶囊可通过维持腰椎骨矿密度、升高髋部骨矿密度,有效治疗原发性骨质疏松症。     

补肾中药对自然衰老雄性大鼠骨髓微环境中Smad1基因表达的影响

目的:研究补肾中药对自然衰老雄性大鼠骨髓微环境中Smad1基因表达的影响。方法:以12月龄自然衰老雄性大鼠60只为模型,随机分为两组,每组30只。自鼠龄12月龄始,分别给予生理盐水、补肾方(密骨胶囊)灌胃,在给药8、16、24w末三个时间点,各时间点每组各取10只大鼠,取股骨骨髓,Trizol法抽提总RNA,RT-PCR技术半定量检测Smad1基因表达,采用天能GIS凝胶图像处理系统分析各组表达灰度值。结果:补肾方组大鼠骨髓微环境中Smad1基因表达明显优于生理盐水组。在8、16、24w末,补肾方组与生理盐水组的基因表达灰度值分别为0.61(95% CI=0.41,0.83)VS0.76(95% CI=0.56,0.98)、0.97(95% CI=0.81,1.13)VS0.61(95% CI=0.45,0.78)、1.75(95% CI=1.59,1.92)VS0.56(95% CI=0.40,0.73)。两组间差异有统计学意义(P<0.01)。结论:补肾中药(密骨胶囊)可以上调骨髓微环境中Smad1基因表达水平,可能是其促骨形成、修复骨损伤作用的分子机制之一。     

浅谈“以气为主、以血为先”在伤科临床中的应用

上海石氏伤科肇始于清末石兰亭先生,19世纪70年代由江苏无锡迁至上海;其子晓山先生以理伤续断声誉日盛,至筱山、幼山先生昆仲则名震沪上,誉及江南。石氏伤科传人石印玉教授执诊于上海中医药大学附属曙光医院,带领学术团队,全面继承石氏伤科经验,并结合当代中医骨伤科学之特点,形成了系列石氏伤科学术理论。石氏伤科精于内治,“以气为主、以血为先”是石氏伤科重要的学术思想,学者同道也对此多有阐发。笔者有幸跟师学习,感悟良多,此结合l临床体会,对“以气为主、以血为先”的具体运用作一浅谈。     

早期激素性股骨头缺血坏死病理及超微结构

目的：探讨激素性股骨头缺血坏死的病理发展过程及超微结构的变化。方法：6月龄新西兰大白兔臀肌注射醋酸氢化泼尼松6周时模型成功,作HE染色观察骨髓、骨小梁、软骨的变化及透射电镜观察骨、软骨组织的变化。结果：激素性股骨头坏死最早变化出现在骨髓,然后为骨小梁、软骨;电镜示骨细胞、软骨细胞内有大量的脂肪滴堆积。结论：脂肪代谢的失调是激素性股骨头缺血坏死的主要原因,其变化涉及骨髓、骨小梁及软骨。     

补肾复方含药血清对骨吸收陷窝影响的时效关系研究

目的探讨补肾复方用于破骨细胞药效观察的含药血清制备条件之一(时效关系)。方法取体重270±20g的SD大鼠,雌雄各半,每组10只,同等条件下制备补肾复方含药血清和对照血清,分别观察不同采血时间、不同喂药时间的含药血清对骨吸收陷窝数量的影响。结果末次灌胃后1h采血组的骨吸收陷窝数明显少于其它各组(P＜0.05);灌胃1d和3d、7d组比较其含药血清的药效无差异,而与对照血清差异显著。结论补肾复方含药血清对破骨细胞骨吸收功能具有明显的抑制作用;补肾复方用于破骨细胞药效观察的大鼠含药血清制备条件之一为连续2次(间隔2h)灌胃、末次灌胃后1h采血。     

金利胶囊对膝骨关节炎兔骨骼肌收缩蛋白基因与软骨基质蛋白多糖表达的影响

[目的]通过观察免膝骨关节炎（KOA）骨骼肌蛋白与软骨基质蛋白多糖（PGs）表达,探讨柔肝中药金利胶囊治疗KOA的作用及机理.[方法]42只新西兰大白兔分为空白对照组（K组）,模型对照组（MD组）,金利干预组（R组）;MD组与R组动物以改良Hulth法造模,R组造模并给药;取膝关节行番红/固绿染色、Mankin评分;RT-PCR检测肌肉α-肌动蛋白（a-actin）、重链肌球蛋白亚型（MHC Ⅰ,MHCⅡa,MHCⅡd/x,MHCⅡb）、Aggrecan与ADAMTS5 mRNA表达,检测关节软骨糖胺聚糖（GAG）水平.[结果]与模型组比较,R组Mankin评分降低,α-actin与多种MHC亚型mRNA表达水平上调（P＜0.05）;Aggrecan mRNA呈高表达,ADAMTS5 mRNA低表达（P＜0.05）.[结论]金利胶囊能够延缓OA软骨退变,促进骨骼肌收缩蛋白基因表达,改善软骨基质蛋白多糖代谢.     

骨碎补总黄酮与淫羊藿苷对人骨髓基质干细胞增殖及蛋白表达的影响

目的：观察骨碎补总黄酮与淫羊藿苷对人骨髓基质干细胞增殖及蛋白表达的影响。方法：采用人骨髓基质干细胞单独培养,按照干预药物浓度（mmol·L－1）分为：骨碎补总黄酮10－4 mmol·L－1组、10－6 mmol·L－1组、10－8 mmol·L－1组和淫羊藿苷10－4 mmol·L－1组、10－6 mmol·L－1组、10－8 mmol·L－1组。运用噻唑蓝比色法（MTT法）,分别在实验第1天、第3天、第5天、第7天时观察其增殖情况。同时,运用蛋白免疫印迹方法（in-cell western blot）分别测定人骨髓基质干细胞培养时骨源性碱性磷酸酶蛋白的表达情况。采用一般线性模型的重复测量方差分析比较不同状态下细胞增殖能力和蛋白表达的差异性。结果：药物作用第5天,骨碎补总黄酮10－6 mmol·L－1、10－8 mmol·L－1组和淫羊藿苷10－4 mmol·L－1、10－6 mmol·L－1、10－8 mmol·L－1组增殖能力优于对照组,与对照组比较,差异具有统计学意义（P＜0．05）。在药物作用于人骨髓基质干细胞第9天时,骨碎补总黄酮10－6 mmol·L－1组、淫羊藿苷10－6 mmol·L－1组骨源性碱性磷酸酶的表达量是优于对照组的,但差异无统计学意义（P＞0．05）。结论：骨碎补总黄酮、淫羊藿苷可以促进人骨髓基质干细胞的增殖,10－6 mmol·L－1的骨碎补总黄酮、淫羊藿苷对BALP表达无显著影响。