雄激素替代治疗后去势成年雄性大鼠基底前脑一氧化氮合酶及巢蛋白阳性神经元的变化

背景：基底前脑的内侧隔核、斜角带核垂直支及水平支的神经元音有丰富的雌激索受体和雄激素受体，故雌、雄激素可通过相应受体作用于神经元，进而影响学习记忆过程。 目的：定性和定量分析雄激素替代治疗对成年去势雄性大鼠内侧隔核、斜角带核垂直支及水平支的一氧化氮合酶、巢蛋白阳性神经元的影响。 设计：随机对照动物实验。 单位：中山大学中山医学院人体解剖学教研室和脑研究室。 材料：实验于2001-06／2002-06在中山大学中山医学院人体解剖学教研室和脑研究室完成。选取成年健康雄性SD大鼠28只，随机分为4组（n=7）：去势24h后雄激素替代治疗4周组（ART1）；去势2周后雄激素替代治疗2周组（ART2）；去势24h后载体替代治疗4周组（VRT）；假手术组。 干预：①ART1组：切除双侧睾丸去势后24h开始皮下注射丙酸睾丸酮（25mg／kg，溶于100μL无菌芝麻油），隔日1次，注射时间固定于上午10：30-11：00，注射14次（4周）。②ART2组：去势后2周开始皮注射丙酸睾丸酮，剂量和方法同ART1组，注射7次（2周）。③VRT组：去势后24h开始皮下注射无菌芝麻油1000μL，注射时间和次数同ART1组。④假手术组：假手术组处理，不伤及睾丸，电不进行任何替代治疗，存活4周。 主要观察指标：各组大鼠于相应时间点处死，免疫组织化学法观察内侧隔核、斜角带核垂直支及水平支中的一氧化氮合酶和巢蛋白阳性神经元的形态和数量变化。 结果：28只大鼠全部进入结果分析。①各组大鼠各部位的一氧化氮合酶和巢蛋白阳性神经元的形态特征均无明显改变。②一氧化氨合酶和巢蛋白阳性神经元数：在内侧隔核和斜角带核垂直支VRT组大鼠明显高于假手术组（P〈0．05或0．01），VRT1和VRT2组明最低于VRT组（P〈0．05或0．01）。并接近假手术组水平（P〉0．05）。 结论：雄激素替代治疗对去势成年雄性大鼠基底前脑一氧化氮合酶和巢蛋白阳性神经元的形态无明显影响；但能选择性地使基底前脑不同亚区的阳性神经元数明显降低，这可能与雄性激素通过其受体介导的机制低调其表达密切相关，并有可能通过此机制影响学习记忆过程。     

运动训练对小鼠脑局灶缺血后脑源性神经营养因子mRNA表达水平的影响

脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factbr，BDNF）在脑内分布广泛，大脑皮层、海马及基底前脑是其主要分布区，在基底前脑的胆碱能神经元及其末梢发现了BDNF的受体”。运动促进脑损伤后胆碱能神经元轴突的出芽再生，可能与BDNF的增多有重要关系。本研究旨在探讨运动训练是否可使小鼠大脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion，MCAO）后BDNF mRNA表达水平发生改变。     

基因芯片联合焦磷酸测序技术应用于新生儿遗传性聋基因突变位点筛查

目的 联合基因芯片和焦磷酸测序筛查新生儿遗传性聋基因突变,为早期诊断和预防遗传性聋提供理论依据.方法 采集2000例新生儿抗凝脐带血,提取基因组DNA,采用微阵列芯片检测4个聋病基因共9个突变位点,对基因芯片检测的阳性结果 进行焦磷酸测序验证.结果检出GJB2基因突变中有1例35delG突变类型,3例176 del16突变类型,57例235del C突变类型,9例299 del AT突变类型;6例GJB3基因538C>T突变类型;线粒体12S rRNA中有5例1555A>G突变类型,1例1494C>T突变类型;SLC26A4中有6例2168A>G突变类型,23例IVS7-2A>G突变类型.2000例新生儿中共103例携带突变基因,基因突变率5.15%.结论 本地区非遗传性聋家族史新生儿中GJB2基因突变多见.新生儿中开展遗传性聋基因筛查对早期遗传性聋诊断和预防有非常重要的指导意义,尤其对线粒体12S rRNA基因突变诊断,能够预防用药控制聋病发生,保障该基因突变携带者健康具有十分重要意义.     

短期和长期训练对小鼠脑局灶缺血后大脑皮质胆碱能纤维密度的影响

目的:观察小鼠脑局灶缺血后短期和长期运动训练对大脑皮质胆碱能纤维密度的影响。方法:取30只雄性C57BL/6J鼠用Bederson等的方法,建立大脑中动脉闭塞模型,造模后随机分为运动组和对照组各15只。运动组:将小鼠放进直径为17cm的带轴承转笼,让其主动跑笼,第1天跑10min,以后每天增加10min,直至1h/d,共训练90d,每周一到六训练,周日休息;对照组:跑笼固定不转。两组分别在造模后15,90d随机取5只处死,观察两组小鼠大脑皮质Ⅲ,Ⅴ层胆碱能阳性纤维密度(以0.01mm2内阳性纤维与测试线的交点数表示)改变。结果:①造模后15d,两组小鼠缺血侧和正常侧脑皮质Ⅲ层胆碱能阳性纤维密度差异不显著(P>0.05);运动组小鼠脑皮质Ⅴ层缺血侧和正常侧胆碱能阳性纤维密度均高于对照组犤(176.6±15.3),(123.8±15.4)个;(189.8±17.9),(118.6±13.4)个,P<0.05犦。②造模后90d,无论在正常侧还是在缺血侧,无论在脑皮质Ⅲ层还是Ⅴ层,运动组小鼠胆碱能阳性纤维密度均高于对照组(P<0.05)。③脑皮质Ⅲ层、Ⅴ层运动组缺血侧运动90d后比运动15d后小鼠胆碱能阳性纤维密度高(P<0.05),而在对照组两者差异不显著(P>0.05)。脑皮质Ⅲ层、Ⅴ层运动组正常侧运动90d后比运动15d后小鼠胆碱能阳性纤维密度高(P<0.05),而在对照组两者差异不显著(P>0.05)。结论:长期运动训练比短期训练能提高小鼠大脑中动脉闭塞后胆碱能纤维的密度,对大脑两侧均有一定影响。     

己酮可可碱在阿霉素心肌病大鼠中的抗炎症作用

【目的】探讨己酮可可碱在阿霉素心肌病大鼠模型中的作用及机制研究。【方法】6周龄雄性SD大鼠30只,随机分为3组:1生理盐水组;2阿霉素(ADR)组;3阿霉素(ADR)+己酮可可碱(PTX)组。动物药物处理3周后,取大鼠的心脏组织作病理学分析并提取RNA检测炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-10的表达情况;同时研磨心肌组织,提取蛋白,ELISA检测TNF-α、IL-1β、IL-10的表达情况。并且采用高频多普勒超声检测评价实验中各组心脏收缩功能。【结果】组织病理学表明PTX能缓解ADR引起的大鼠心肌损伤,ADR+PTX组的心肌炎症细胞浸润程度明显比ADR组减轻。RT-PCR、心肌ELISA检测显示与生理盐水组相比较,ADR组TNF-α、IL-1β表达量增加,而PTX处理组显著降低其炎症因子的表达;与ADR组相比,ADR+PTX组中IL-10表达量呈上升趋势。同样与ADR组相比较,ADR+PTX组的左心射血分数升高、左心室长轴缩短率增加。【结论】PTX对阿霉素引起的心肌纤维化的保护作用可能是通过对IL-10表达调控来实现的。PTX可能成为临床治疗阿霉素心肌病的有效的选择药物。     

18 基底前脑一氧化氮合酶阳性神经元对衰老变化的耐受性

<正>衰老时基底前脑大细胞复合体的胆碱能神经元明显丢失,并与学习记忆功能的衰退密切相关.最近有人报道,基底前脑胆碱能神经元存在一氧化氮合酶(NOS)阳性的亚群.纹状体的研究也表明,缺血、缺氧、注射     

青、老年大鼠在Morris水迷宫中的学习记忆行为

本实验观察了22～24月龄老年大鼠和5～6月龄青年大鼠在Morris水迷宫中的学习记忆行为,并用定量分析方法比较两组动物在定位航行及空间搜索试验中的学习记忆,结果表明老年大鼠的寻找平台潜伏期明显延长,而其跨平台次数及在平台象限的游泳路线长度并未减少.提示24月龄老年大鼠获取学习记忆的能力受损伤而保持记忆的能力维持正常,这可能与二种功能衰老的不同速度及不同神经基础有关.     

突触素在大鼠嗅球的分布

用免疫组织化学方法观察突触素在大鼠嗅球各层的分布。结果显示:小球层染色最深,其次为分子层、再其次是颗粒层。僧帽细胞胞体周围未见有明显阳性颗粒,纤维层和髓层不着色。     

衰老晚期大鼠脑组织丙二醛及非水溶性蛋白的变化

选用SD大白鼠青年组(3个月)、衰老晚期组(34～36个月)各10只,测定各组大鼠海马、前额皮质、小脑皮质丙二醛(MDA)和蛋白质含量的变化.结果如下:与青年组比较,衰老晚期鼠海马、前额皮质、小脑皮质MDA和非水溶性蛋白、组织总蛋白含量均明显增多,海马的非水溶性蛋白在2个年龄组均高于其余2个脑区.衰老晚期前额皮质非水溶性蛋白含量明显高于小脑皮质.本文对MDA和非水溶性蛋白在衰老晚期的改变的意义进行了讨论.     

淀粉样β蛋白42及其亚单位疫苗预防接种对APPSWE转基因小鼠学习记忆能力的保护作用

背景：研究表明，淀粉样β蛋白42疫苗接种可以诱导阿尔茨海默病转基因小鼠产生特异性抗淀粉样β蛋白42抗体，清除其脑内的淀粉样β蛋白沉积，改善其学习记忆能力，在对阿尔茨海默病的防治中具有良好的应用前景。目的：研究淀粉样β蛋白42及其亚单位肽疫苗预防接种对APPSWE转基因小鼠学习记忆能力的影响。设计：以动物为研究对象，完全随机分组实验。单位：一所大学医学院人体解剖学教研室脑研究室。材料：实验于2003—04／2004—02在中山大学实验动物中心和人体解剖学教研室脑研究室进行。5月龄APPSWE转基因小鼠32只，购自美国Taconic company，在本室繁育成功。实验随机分成对照组、淀粉样β蛋白42组、淀粉样β蛋白1-15组和淀粉样β蛋白36-42组，每组8只。干预：淀粉样β蛋白42及其亚单位疫苗配伍MF59佐剂，基础接种采用皮下注射，加强接种采用鼻黏膜免疫，共接种8个月。疫苗接种前用Y迷宫作行为学测试，接种后用Morris水迷宫作行为学测试。主要观察指标：空间学习记忆能力，平均逃避潜伏期，穿过平台次数，第一象限游泳距离百分率，20％边缘区游泳距离百分率。结果：疫苗接种前对照组、淀粉样β蛋白42组、淀粉样β蛋白1．15组和淀粉样β蛋白36-42组APPSWE转基因小鼠Y迷宫作行为学测试10次中正确反应的次数分别为7．50&;#177;0．81．7．06&;#177;0．71．7．19&;#177;0．91．7．50&;#177;0．86，各组小鼠间的空间学习记忆能力差异无显著性意义(P&;gt;0．05)；疫苗接种8个月后，对照组、淀粉样β蛋白42组、淀粉样β蛋白1．15组和淀粉样β蛋白36．42组小鼠定位航行试验8个单元训练的平均逃避潜伏期分别为(67．3&;#177;2．8)s，(23．6&;#177;1．6)s，(26．4&;#177;2．0)s和(36．5&;#177;2．2)s，淀粉样β蛋白42组、淀粉样β蛋白1．15组和淀粉样β蛋白36-42组较对照组明显缩短，淀粉样β蛋白42组，淀粉样β蛋白1．15组和淀粉样β蛋白36-42组之间差异无显著性意义(P&;gt;0．05)；对照组、淀粉样β蛋白42组、淀粉样β蛋白45组和淀粉样β蛋白36—42组小鼠空间探索试验穿过平台次数分别为0．71&;#177;0．29，8．14&;#177;1．37，7．28&;#177;1．34和3．29&;#177;0．67，第一象限游泳距离百分率分别为[24．3&;#177;2．9)％，[50．6&;#177;11．6)％，[49．9&;#177;9．3)％和(35．4&;#177;7．0)％，20％边缘区游泳距离百分率分别为(46．4&;#177;7．3)％，(11．6&;#177;3．9)％．(14．4&;#177;2．6)％和(25．8&;#177;3．3)％，淀粉样β蛋白42组、淀粉样β蛋白45组，淀粉样β蛋白36．42组较对照组穿过平台次数显著增多、第一象限游泳距离百分率升高和20％边缘区游泳距离百分率降低，其中淀粉样β蛋白42组、淀粉样β蛋白45组，淀粉样β蛋白36—42组比较差异无显著性意义(P&;lt;0．05)。结论：淀粉样β蛋白42及其亚单位疫苗预防接种可有效减轻APPSWE转基因小鼠学习记忆能力的损害。