CYP2C9新变异体A149V的发现及药物代谢活性研究

目的 研究中国汉族人群中发现的CYP2C9新变异体A149V的药物代谢活性。方法 随机采集2018年北京医院心内科住院患者血样并采用磁珠法抽提基因组DNA,PCR扩增CYP2C9基因启动子区及9个外显子区用于基因分型。体外构建双表达杆状病毒载体pFastBac-OR-CYP2C9,转染DH10Bac大肠杆菌获得杆粒,使用昆虫系统表达CYP2C9及CYPOR,并进行Western blot法验证。采用差速离心法制备CYP2C9微粒体,使用3种探针药物进行体外酶活性研究。结果 513例样本中检测到一种新的CYP2C9突变446C>T,可导致CYP2C9第149位氨基酸由丙氨酸被缬氨酸替换(A149V)。利用昆虫表达系统成功获得了新变异体A149V及典型CYP2C9变异体的微粒体,Western blot法检测结果显示,A149V的氨基酸替换并不会影响CYP2C9酶的表达水平。体外药物代谢活性数据显示,新变异体A149V对3种探针药物甲苯磺丁脲、双氯芬酸和氯沙坦的清除率分别是野生型的17.90%、24.73%和5.54%。结论 中国汉族人群中发现的CYP2C9新变异体A149V为慢代谢...     

创伤性连枷胸 65 例救治体会

目的探讨创伤性连枷胸的诊断和治疗。方法回顾性分析65例创伤性连枷胸患者的诊断和治疗经过。结果65例均痊愈。无死亡病例。结论对创伤性连枷胸可行X线胸部摄片和肋骨3D—CT检查，明确诊断和骨折后改变。严重的连枷胸可选用铜板螺丝钉及抱合器固定，同时应积极处理其他复合伤，可获得理想的疗效。     

禽流感病毒的生物学特性及其实验室检测

禽流感病是由甲型禽流感病毒(AIV)某些亚型的毒株感染人引起的急性呼吸道传染病。1997年4月，香港流浮山3个养鸡场发生H5N1禽流感，1个月后，1例3岁患儿高热并死于不明原因的多功能衰竭，后证实为H5N1禽流感病毒感染所致，这是世界上第一例甲型禽流感病毒使人致病的病例。此次香港地区的禽流感中，有18例染病，其中6例死亡。1999年，在香港又发现2例患儿感染AIVH9N2亚型病毒。     

北京市社区慢病及失能老人家庭护理员多维度现状调查

目的从个人基本情况、工作现状、专业素质、护理过程中遇到的棘手问题和解决措施等多个维度对社区慢病及失能老人家庭护理员的现状进行调查。方法于2022年4—8月采用整群抽样的方式, 对北京市6个社区慢病及失能老人家庭护理员进行问卷调查。根据有无护理人员专业资格证书分组, 从多个维度对社区慢病及失能老人家庭护理员的现状进行调查分析。结果研究共纳入611名护理人员, 年龄(49.99±6.82)岁, 以农村户籍和初中以下文化水平为主要组成, 其中有护理人员专业资格证书的护理人员只占43.04%(236/611)。与无护理人员专业资格证书的人员相比, 有护理人员专业资格证书的人员性别、户籍、文化程度、每天工作时间、照护具体工作内容、月收入、减少养老护理员流动性的解决措施、工作年限、照护慢病老人日常健康的感受、心理状况、工作自我认知、培训提高工作技能、基本医学常识培训、未参加培训原因等方面差异均有统计学意义(P<0.05)。护理人员在工作遇到棘手问题调查中反映了医疗护理知识匮乏, 亟须专业培训和医护人员指导的迫切需求。结论加强和完善慢病和失能老人家庭护理人员岗前和岗中关于护理专业和基本医学常识...     

中华骨髓库造血干细胞捐献志愿者HLA-A、-B、-C、-DRB1、-DQB1高分辨等位基因频率分析

目的分析中华骨髓库造血干细胞捐献者HLA-A、-B、-C、-DRB1、-DQB1 5位点在高分辨基因分型水平上的等位基因频率特征。方法根据718名中华骨髓库捐献者HLA5位点高分辨分型数据,运用直接计数法计算各位点基因频率。结果在718名捐献志愿者中,共检出28个HLA-A等位基因、61个HLA-B等位基因、30个HLA-C等位基因、40个HLA-DRB1等位基因、18个HLA-DQB1等位基因;其中HLA-A位点最常见等位基因为A*1101(21.66%)、A*2402(16.37%)、A*0201(13.79%);HLA-B位点最常见等位基因为B*4001(11.49%)、B*4601(9.54%);HLA-C位点最常见等位基因为Cw*0702(15.74%)、Cw*0102(15.32%)、Cw*0304(11.56%);HLA-DRB1位点最常见等位基因为DRB1*0901(14.69%)、DRB1*1501(12.40%)、DRB1*0701(9.89%);HLA-DQB1位点最常见等位基因为DQB1*0301(20.54%)、DQB1*0303(15.81%)、DQB1*0601(10.79%)。结论本研究在高分辨基因分型水平提供了一套有关中国人群HLA-A,-B,-C,-DRB1和-DQB1 5位点基因频率数据。     

中华骨髓库造血干细胞捐献志愿者HLA-A、-B、-C、-DRB1、-DQB1高分辨单体型频率初步分析

目的分析中华骨髓库造血干细胞捐献者HLA-A、-B、-C、-DRB1、-DQB15位点在高分辨基因分型水平上的单体型频率及连锁不平衡特征。方法根据718名中华骨髓库捐献者HLA5位点高分辨分型数据,运用Arle-quin3.1软件以最大似然法分析单体型频率。结果双座位连锁不平衡分析显示,HLA-C与HLA-B、HLA-DRB1与HLA-DQB1呈现较为显著的连锁不平衡;多位点单体型频率分析结果显示,最常见的2、3、4、5位点单体型分别为:A*0207-B*4601(7.34%)、Cw*0102-B*4601(8.71%)、B*1302-DRB1*0701(6.19%)、DRB1*0901-DQB1*0303(14.27%)、A*3001-B*1302-DRB1*0701(5.36%)、A*0207-B*4601-Cw*0102(7.06%)、A*3001-Cw*0602-B*1302-DRB1*0701(5.36%)、Cw*0602-B*1302-DRB1*0701-DQB1*0202(6.12%)、A*3001-Cw*0602-B*1302-DRB1*0701-DQB1*0202(5.29%)。结论本研究提供了中华骨髓库718名捐献者HLA5位点高分辨单体型频率遗传学数据,将为临床寻找HLA匹配的无关供者、法医学鉴定、HLA与疾病相关研究等提供分子遗传学参考。     

MEF2A第11号外显子CAG三联核苷酸重复序列的改变与其转录激活活性的相关性

目的 探讨MEF2A第11号外显子CAG三联核苷酸重复序列的改变与其转录激活活性的相关性.方法 PCR法扩增富含组氨酸钙结合蛋白(histidine-rich calcium-binding protein,HRC)基因启动子/增强子序列,插入报告载体pGL3-Basic中,生成pGL3-HRC enhancer质粒,该质粒与全长野生型MEF2A cDNA表达质粒pCDNA-MEFcDNA,或含4～15个CAG的变异型MEF2A cDNA表达质粒pCDNA-MEFcDNA-CAGr,以及内参质粒pRL-TK,用脂质体转染法共转染于293T细胞,Westernblot检测MEF2A蛋白的表达,双荧光素酶检测系统测定报告分子的表达.结果 成功构建了MEF2A蛋白体外转录激活活性检测系统;所构建的含4～15个CAG序列的MEF2A变异蛋白,与含11个CAG序列的野生型MEF2A蛋白之间其转录激活活性没有显著性差异.结论 目前已发现的MEF2A第11号外显子CAG重复数目的 改变不会影响MEF2A蛋白的转录激活活性.     

氧化应激与老年性痴呆发病的相关性研究

氧化应激作为老年性痴呆的发病机制之一越来越受到学术界关注。活性氧可氧化DNA、RNA和蛋白质导致基因突变、转录错误、转录效率降低、翻译错误,以及影响蛋白质正常功能的发挥。该文就氧化应激对DNA、RNA和蛋白质的氧化损伤与老年性痴呆发病的相关性进行综述。     

2005年至2008年全国HLA低分辨基因分型检测室间质量评价结果分析

Objective National external quality assessment (EQA) results from 2005 to 2008 for HLA class Ⅰ (A, B) and class Ⅱ (DRB1) low-resolution DNA typing were summarized with the goal of exploring strategies to assure and improve HLA DNA typing performance in clinical testing. Methods HLA allele results from the four consecutive years EQA events were analysed. Different kinds of errors were described and classified, and the possible causes were discussed. Results Participant laboratories were increasing in the four consecutive years with the number of 22, 28, 47 and 61 in 2005, 2006, 2007 and 2008,respectively. 2 844 HLA DNA typings were returned from the participants during the 4 years EQA surveys, and overall 30 errors (1.05%) were identified. These 30 errors were classified into two major types of errors including 25 technical genotyping errors and 5 human errors. The proportion of laboratory participants which made mistakes was 13. 6%, 10. 7%, 10. 6% and 16.4% in 2005, 2006, 2007 and 2008, respectively. Conclusions Above 10% of participant laboratories exhibited errors in the four consecutive years HLA molecular typing EQA surveys. Relevant important attentions should be greatly paid to clinical HLA molecular typing test.     

二氢嘧啶脱氢酶基因多态性研究的现状与进展

药物代谢酶相关基因的研究始于20世纪80年代，因其对患者个体的合理化用药、疗效观察等有重要的指导作用而备受关注，尤其是与肿瘤治疗的药物代谢酶相关基因的研究更成为热点。目前研究已证实，二氢嘧啶脱氢酶基因（dihydropyrimidine dehydrogenase gene，DPYD）是与5-氟尿嘧啶（5-Fu）治疗密切相关的一个药物代谢酶基因，其基因序列上的一些碱基突变或小片段缺失与5-FU治疗时产生的严重毒副作用有密切关系。