耐喹诺酮类铜绿假单胞菌的耐药机制研究

目的 探讨广州地区铜绿假单胞菌对喹诺酮类药物的耐药机制.方法 对喹诺酮耐药株的gyrA和parC基因进行限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP),并对其中的高水平耐药株gyrB和parE基因进行测序;用琼脂稀释法测定加入碳酰氰基-对-氯苯腙(CCCP)前后环丙沙星的最小抑菌浓度(MIC);同时用SDS-PAGE对高水平耐药株的外膜蛋白进行电泳分析.结果 有 72.7%(72/99)的菌株发生gyrA突变,主要为,Thr-83-Ile;25.3%(25/99)的菌株发生parC突变,主要为Ser-87-Leu,且均是gyrA和parC双基因突变;gyrB和parE突变较少见.53.3%(53/99)的菌株的MIC可被CCCP逆转,其MIC能明显降低;7%(7/10)的高水平耐药株的外膜蛋白在43～67kDa间条带增多,其蛋白含量有差异.结论 抗菌药物作用靶位的改变和外排泵机制是本地区铜绿假单胞菌对喹诺酮类耐药的重要机制.     

案例式教学法在临床微生物实习教学中的尝试和思考

本文主要探讨案例式教学法在临床微生物实习教学中对学生学习兴趣、临床思维能力提高的作用,以及总结在教学过程中的一些体会.     

不同耐药鲍曼不动杆菌毒力效应检测与分析

目的 比较不同耐药性鲍曼不动杆菌毒力特点,探讨鲍曼不动杆菌耐药性与其致病力之间的关系.方法 将来自临床的110株鲍曼不动杆菌分成3组:多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB)、泛耐药鲍曼不动杆菌(XDRAB)和相对敏感鲍曼不动杆菌(RDSAB).采用PCR检测试验菌株携带的毒力基因(BasD、BauA、Omp33-36、traT);采用吸光度值法测定试验菌株的体外生长情况;采用蹭行运动实验检测试验菌株运动能力;采用明胶酶活性实验检测试验菌株产侵袭性酶类情况;采用结晶紫染色法测定试验菌株生物被膜形成能力;采用微量法D-甘露糖抵抗红细胞凝集实验检测试验菌株对红细胞的凝集能力;采用小鼠感染试验对比不同耐药菌的致病能力差异.结果 110株鲍曼不动杆菌中,除了2株RDSAB蹭行运动阳性外,其余菌株均为阴性,MDRAB和XDRAB均未观察到蹭行运动;110株鲍曼不动杆菌全部菌株明胶酶活性均为阴性;25株RDSAB的生物被膜形成能力比42株MDRAB或43株XDRAB的生物被膜形成能力强,差异有统计学意义(P<0.05),其中25株RDSAB生物被膜形成能力以强阳性为主,而42株MDRAB和43株XDRAB以阳性为主;只有1株RDSAB在有或者无D-甘露糖存在的条件下,均能与AB型和O型红细胞发生凝集;毒力基因BasD具有较高的检出率,为59.1％(65/110),毒力基因BauA和Omp33-36检出率较低,分别为6.4％(7/110)和3.6％(4/110),未检出毒力基因traT;MDRAB的BasD毒力基因检出率比RDSAB高,差异有统计学意义(P<0.05),RDSAB的毒力基因Omp33-36检出率比MDRAB和XDRAB高,差异有统计学意义(P<0.05),MDRAB的BasD和BauA毒力基因检出率比XDRAB高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 鲍曼不动杆菌在获得耐药性的同时其毒力并没有相应增加,RDSAB的环境生存和定植能力比MDRAB和XDRAB更强.     

临床微生物检验实验教学立体化教学资源建设

临床微生物学是一门实践性极强的形态学学科,而立体化的实验教学资源是学生掌握临床微生物基本理论、基本知识、基本技能的重要途径和平台。临床微生物检验实验教学立体化教学资源建设主要包含三个部分:纸质的实验教材编写与使用、多种类实验视频教学资料的制备以及多媒体实验教学网络课件、常见微生物图片库的建设。     

广州市四家医院铜绿假单胞菌的血清学分型的调查

目的了解广州市四家医院铜绿假单胞菌（PA）各血清型分布情况。方法按常规方法对各院各种临床标本进行细菌的培养、分离，用VITEK2全自动微生物鉴定仪对750株PA进行鉴定，采用日本生研株氏会社分型血清用玻片凝集法对PA进行血清分型。结果750株PA分型率为93．7％（703／750）；以G、B、L、F型为主，其中G型197株占26．3％、B型90株占12．0％，L型78株占10．4％，F型77株占10．2％。结论广州市四家医院的PA血清型以G、B、L、F为主，未发现有A血清型。     

呼吸衰竭患者血乳酸水平与急性肾损伤之间关系的研究

目的探讨呼吸衰竭患者血乳酸水平与急性肾损伤之间的关系,为肾损伤提供新的参考指标。方法收集在广州医学院第一附属医院住院治疗的呼吸衰竭病人动脉血,测定乳酸值。根据血肌酐变化,以AKI的RIFLE诊断标准分为3期,分析血乳酸与肾损伤之间的关系。结果肾损伤1期与2期或3期间血乳酸差异显著(P0.05),但2期与3期之间的差异无统计学意义(P=0.49);血乳酸水平与肾功能分期相关(r=0.347,P0.05),乳酸水平随肾损伤加重而上升,而氧张力PX水平在各期间差异无统计学意义。结论动脉血乳酸水平比PX更利于早期提示呼吸衰竭患者肾脏缺氧造成的急性功能损伤。     

人诺如病毒体外培养体系研究进展

目的 系统全面的阐述人诺如病毒(human noroviruses, HuNoVs)体外培养研究的历史、发展及现有体系各自的优缺点和发展方向。方法 以“human noroviruses”、“in vitro、“culture”、“cofactor”作为PubMed和Web of science数据库的检索词,提取实验性体外培养研究论文中的结果和数据,共参考文献33篇。结果 人诺如病毒可在具有B细胞特征的淋巴瘤细胞系和单层人肠上皮细胞系中实现有限的增殖。结论 需进一步改进现有培养体系,突破因不能体外培养导致的诺如病毒基础研究瓶颈。同时,探索诺如病毒复制所需的辅助因子,并研究两者的共作用机制或许是诺如病毒体外培养新的发展方向。     

流感病毒H1N1感染后宿主细胞MTH1基因表达的研究

目的 观察H1N1型流感病毒诱导的MDCK细胞抗氧化相关修复基因MTH1表达量的变化.方法 MDCK细胞培养后,H1N1型流感病毒感染0、1、3、6、12、24、48 h,在各时间点经RT-PCR反应检测细胞内MTH1基因的相对表达量.结果 甲型H1N1流感病毒感染后0、6、12 h,MTH1基因的表达量与正常对照组差异无统计学意义;感染后1、3 h MTH1基因的表达量显著高于正常对照组;感染后24、48 h表达量显著低于正常对照组.结论 H1N1流感病毒感染细胞的MTH1基因表达的增加,可能增加细胞对DNA氧化损伤的修复能力,在流感发生和防御机制中起到作用.     

铜绿假单胞菌耐药性及产金属酶菌株基因检测

目的 了解临床分离的铜绿假单胞菌耐药性及产金属β-内酰胺酶菌株的基因分布状况。方法 临床分离的152株铜绿假单胞菌用法国梅里埃公司的VITEK-2全自动微生物分析系统鉴定，纸片扩散法进行抗生素敏感试验，采用纸片协同法检测金属酶表型，PCR法扩增金属酶基因，并对PCR产物进行电泳，确定基因型。结果 铜绿假单胞菌对头孢他啶、亚胺培南、庆大霉素、哌拉西林、阿米卡星、氨曲南、头孢哌酮、头孢吡肟、环丙沙星、左氧氟沙星、妥布霉素的耐药率分别为15．1％、32．2％、50％、25．7％、44．8％、10、5％、24、3％、11．8％、10．5％、19．1％、54．5％。其中59株耐亚胺培南（头孢他啶）菌株中产金属酶的有6株，占3．9％（6／152），该6株菌中有1株扩增出金属酶SPM基因型，有2株扩增出IMP基因型。结论 铜绿假单胞菌对临床常用的抗生素均有一定的耐药性，临床应根据药敏试验结果合理使用抗生素。金属酶表型阳性菌株检出的基因型为IMP和SPN型。本地产金属酶的铜绿假单胞菌基因型开始出现多型化的特征，临床应注意对这类菌株的监测。     

30例重症传染性非典型肺炎实验室特征探讨

目的:探讨严重急性呼吸综合征(SARS)的实验室特征。方法:对30例SARS病人的血液、尿液、呼吸道分泌物等标本分别进行血常规、尿常规、微生物学以及生化、免疫等各项指标检测,分析其变化特征,并与正常对照组20例比较。结果:SARS组多项指标与对照组有差别,其中血清酶AST、CK、CK-MB、LDH、LDH同工酶(LD1)高于对照组,有非常显著性差异(P<0.01),且急性期高于恢复期(P<0.05),血常规WBC、LY％、GR％、RBC、Hb、Plt在两组间有显著性差别(P<0.01)。常见微生物学检查结果显示血液及体液培养标本中条件致病菌检出率较高,铜绿假单胞菌(2/30)、嗜麦芽假单胞菌(2/30)、表皮葡萄球菌(MRSE)(1/30)、赛氏葡萄球菌(MRSCN)(1/30)。药敏结果显示头孢哌酮-舒巴坦、万古霉素对上述相应菌敏感率最高。结论:SARS的实验室特征显示出该病对心、肺、肾等多器官功能有损害,对进一步研究及诊治该病有一定的,临床参考价值。