紫杉醇对大鼠肺血管平滑肌细胞表型和细胞骨架的影响

目的 探讨不同浓度的紫杉醇对大鼠肺血管平滑肌细胞增殖的抑制作用及其对细胞骨架和表型转化的影响.方法 采用MTT、[3H]-胸腺嘧啶掺入法检测不同药物浓度紫杉醇对血小板源性生长因子BB( PDGF-BB)诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响;采用蛋白质免疫印迹法(Westernblot)对平滑肌α肌动蛋白及平滑肌22α蛋白(SM22α)表达活性进行检测;利用激光共聚焦显微镜观察F-肌动蛋白的改变.结果 与PDGF组比较,紫杉醇药物干预组细胞增殖受到明显抑制,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测抑制率分别为40.0％,30.0％,18.0％ (P＜0.01),[3H]-胸腺嘧啶掺入法测得的细胞增殖抑制率分别为45.4％,35.4％,21.6％ (P ＜0.01),平滑肌α肌动蛋白和SM22α表达均升高,细胞骨架F-肌动蛋白的荧光强度明显下降.结论 在PDGF-BB存在的情况下,紫杉醇可剂量依赖性抑制血管平滑肌细胞的增殖,通过作用于微丝细胞骨架促进血管平滑肌细胞由合成型向收缩型转化,进而影响血管平滑肌细胞的增殖.     

临床医生对病人安全的认知现状调查与分析

目的调查临床医生对病人安全的认识现状及重视度，分析存在的问题，推测可能的原因，为开展病人安全教育提供可靠依据。方法随机抽取以四川大学华西医院为主的四川省三甲医院的临床医生进行问卷调查。以匿名问卷，采取调查员指导下，被调查者自填调查表的方式收集资料。结果发放调查问卷300份，收回有效问卷258份，回收率86％。调查结果显示，临床医生对病人安全知识的理解度较低，但门诊部医生理解度优于住院部医生。95．00％以上的医生愿意主动学习病人安全知识。结论针对临床医生对病人安全认知度偏低但愿意主动学习相关知识的趋向，有必要对临床医生和医学生开展病人安全知识教育。     

兔支气管败血波氏杆菌单克隆抗体的制备及鉴定

目的建立能稳定分泌抗兔支气管败血波氏杆菌（Bb）的单克隆抗体杂交瘤细胞株,为今后进一步建立该菌的免疫检测技术奠定基础。方法以Bb分离株BLJ05的灭活菌液为免疫原,腹腔免疫BALB/c小鼠,采用常规杂交瘤技术制备Bb单克隆抗体（McAb）,用间接ELISA、Western-blot等方法对McAb特性进行鉴定。结果获得两株能稳定分泌抗Bb单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为A7D5和D6B2,其小鼠腹水抗体效价分别为1∶409600和1∶102400;且不与兔大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、产气荚膜梭菌等兔的常见病原菌反应,特异性强。两株单抗亲和力实验表明A7D5亲和力略高于D6B2。ELISA相加试验表明它们针对相同的抗原表位。结论成功建立了两株能稳定分泌抗兔支气管败血波氏杆菌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,效价高、特异性强,为今后建立该菌的免疫检测技术建立奠定了基础。     

内镜下尼龙绳套扎联合高频电频电凝切治疗胃肠道隆起性病临床观察

2006年7月至2008年7月我院对部分经超声内镜检查明确位于黏膜层或黏膜下层的胃肠道隆起性病变患者行内镜下尼龙强套扎联合高频电凝切治疗,取得了较好的疗效,现报告如下.     

雷帕霉素逆转大鼠肺动脉高压的作用机制研究

目的 探讨雷帕霉素(RAP)对大鼠肺动脉高压的作用,为临床药物治疗肺动脉高压的选择提供新思路。方法 将健康雄性Sprague-Dawley 大鼠50 只随机分为空白对照组、模型组、溶剂对照组、RAP 干预1 组(术后5 d 开始干预)和RAP 干预2 组(术后35 d 开始干预)。左肺切除(PE)联合野百合碱(MCT)诱导肺动脉高压大鼠模型;造模后5 d 分别给予溶剂对照组溶媒和RAP 干预1 组RAP 肌肉注射;造模后35 d 给予RAP 干预2 组RAP 肌肉注射。测定各组平均肺动脉压(mPAP)和RV/(LV+S)比值。苏木精-伊红染色观察各组右肺组织病理学改变。Real-time PCR 测定各组平滑肌α 肌动蛋白(α-SMA)及平滑肌22α 蛋白(SM22α)mRNA 的相对表达量。结果 模型组及溶剂对照组大鼠术后35 d mPAP 明显高于空白对照组,RAP 干预1 组及RAP 干预2 组大鼠的mPAP 明显低于溶剂对照组(P<0.05);模型组及溶剂对照组大鼠RV/(LV+S)明显高于空白对照组,RAP 干预1 组大鼠RV/(LV+S)低于溶剂对照组(P<0.05),而RAP 干预2 组大鼠RV/(LV+S)与溶剂对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);右肺病理组织学HE 染色可见模型组及溶剂对照组的肺动脉壁较空白对照组明显增厚,管腔狭窄,RAP 干预后可见增厚肺动脉壁有不同程度逆转;Real-time PCR 结果显示,模型组及溶剂对照组SM22α 及α-SMA 基因相对表达量明显低于空白对照组,RAP 干预1 组及RAP 干预2 组的SM22α 及α-SMA 相对表达量高于溶剂对照组(P<0.05)。结论 RAP 可逆转肺动脉压力的升高及右心室肥厚程度,其作用机制可能为通过调节血管平滑肌细胞表型转换而实现。     

病人参与临床决策现状调查与分析

目的探讨影响医患共享临床决策的因素,为医患共享临床决策提供思路与对策。方法随意抽取四川省某三甲医院的患者,以匿名问卷,采取调查员指导下被调查者自填调查表的方式对患者进行问卷调查。用Excel建立数据库,采用SPSS13．0进行统计分析。结果共发放调查问卷600份,实际收回有效问卷565份,有效回收率94％。调查结果显示：68％的患者对所患疾病的相关信息有一定了解;93％的患者愿意积极参与临床决策;患者在就医过程中最担心的问题依次为治疗措施的疗效、费用和医生技术;患者就医的最大困难为门诊等待时间长和与医生交流时间短。结论针对患者有参与临床决策的积极愿望但又存在知识局限性的现状,加之医疗服务的多维性和医学科学的不确定性等医疗或非医疗因素,临床医生有必要为患者提供多种选择,帮助患者寻找足够的相关信息,共同分析,提高患者的满意度。     

兔支气管败血波氏杆菌PCR检测方法的建立及应用

目的建立一种简便、快速、敏感、特异的适用于支气管败血波氏杆菌的PCR检测方法。方法根据兔支气管败血波氏杆菌（Bordetella bronchiseptica）的fim2基因序列设计了一对特异性引物，进行PCR扩增、特异性和敏感性试验，并将其应用于临床样品的检测。结果利用该PCR方法扩增出425bp的目的基因片段，该产物序列与GeneBank上公布的基因序列同源性为100％。特异性试验表明，该方法对大肠埃希氏菌、多杀性巴氏杆菌、魏氏梭菌和金黄色葡萄球菌均无交叉性反应；并且最小可检出菌液浓度为3．6CPU。用该PCR方法检测了从江苏、山东等地采集的146份兔鼻拭子，结果检出支气管败血波氏杆菌阳性92例，阳性率为63．01％。结论建立了快速检测支气管败血波氏杆菌的PCR方法。     

Hes-1与哮喘大鼠气道炎症和气道重塑的关系研究

目的 观察Sprague-Dawley（SD）大鼠哮喘模型中Notch 信号通路靶基因Hes-1 的表达变化及与气道炎症和气道重塑的关系,初步探讨其在支气管哮喘发病中的作用。方法 将48 只SD 大鼠随机分成对照组和哮喘组,采用卵白蛋白致敏及激发建立哮喘模型,对照组以生理盐水替代致敏液,两组依据激发后不同处理时间点各分为4 周、8 周、12 周3 个亚组,每组8 只大鼠。光镜观察肺组织病理变化并检测支气管平滑肌厚度（Wam）;ELISA 法检测大鼠血清和支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-4 和INF-γ 水平;分别采用免疫组织化学和实时荧光定量PCR 检测Hes-1 蛋白及mRNA 的表达水平。结果 随着激发后时间的延长,哮喘组大鼠Wam 逐渐增加,血清和BALF 中INF-γ 水平逐渐降低、IL-4 水平逐渐增加,且与同时间点对照组相比差异均有统计学意义（均PPP结论 Hes-1 蛋白及其mRNA 的表达增加与哮喘大鼠气道炎症因子水平和气道平滑肌重塑密切相关,并可能参与了哮喘的发生。     

岭南杜鹃的化学成分研究北大核心

目的:对岭南杜鹃Rhododendron mariae Hance的化学成分进行研究。方法:采用硅胶柱、ODS柱、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱等色谱方法对岭南杜鹃的化学成分进行分离纯化,通过多种波谱技术(NMR、MS)鉴定化合物结构。结果:从岭南杜鹃的醇提物中分离鉴定了13个化合物,分别为:7S,8R-二氢去氢双松柏醇(1)、5-羟基-3′,4′,7-三甲氧基黄酮(2)、β-细辛脑(3)、α-细辛脑(4)、异莨菪亭(5)、丁香醛(6)、香草酸(7)、2,3,4′-三羟基-3′,5′-二甲氧基苯丙酮(8)、光叶菝葜苷(9)、槲皮素(10)、槲皮苷(11)、杜鹃素(12)、金丝桃苷(13)。结论:其中,化合物2~4、6、8、9为首次从杜鹃花属植物中分离得到,化合物5、7为首次从该植物中分离得到。