P物质体外对骨髓CFU-GM和CFU-C21的影响

目的:探讨P物质(SP)与造血的关系.方法:采用甲基纤维素半固体造血祖细胞培养法检测正常血浓度的SP以及不同浓度的SP 对骨髓CFU-GM和CFU-C21的作用.结果:10-10 mol*L-1和10-11 mol.L-1 SP组CFU-GM的产率分别为193±19和206±40,与对照(136±17)相比具有显著差异(P<0.05); 10-10mol.L-1和10-11mol.L-1 SP对CFU-C21也有明显刺激作用,前者CFU-C21为143±16,后者为153±15,与对照(80.3±31)相比具有显著性差异 (P<0.05);高于或低于上述浓度时,SP对CFU-GM和CFU-C21的刺激作用均减弱,与对照相比无显著性差异(P＞0.05).结论:适当浓度的SP对体外CFU-GM和CFU-C21具有明显的刺激效应.SP对正常骨髓造血具有重要的意义.     

脐带血造血干细胞的采集、浓缩与低温冷冻保存

目的 :探讨脐带血造血干细胞库建立中的脐带血采集、分离、低温冻存的方法。方法 :自 1997年 7月至2 0 0 0年 7月已冻存经过HLA配型的脐带血 (cordblood ,CB) 3 74 4份。CB采自经检查符合要求的足月顺产或剖宫产新生儿 ,经 (citratephosphateadeninedextnse ,CPD A)抗凝 ,用密闭式血袋采集法采集。采集后置于室温保存 ,18h内处理。用羟乙基淀粉 (hydroxythylstarch ,HES)沉降后一次分离方法去除绝大多数红细胞及大部分血浆。采用以二甲亚砜 (dimethylsulfoxide ,DMSO)为主的冷冻保剂 ,冷冻保存CB。DMSO的终质量分数为 10 %。经序控降温后 ,置于 - 196℃液氮中保存。结果 :分析了 3 74 4份冻存CB ,平均采集量为 (93± 2 2 )ml(45～ 198ml)。浓缩后平均体积为 (3 8± 8)ml(3 0～ 60ml) ;浓缩前后有核细胞数 .浓缩前平均有核细胞数为 11.2× 10 8± 5 .3× 10 8(4.5× 10 8～ 4 5 .1× 10 8) ;采用HES沉降一次离心浓缩去除红细胞后的平均有核细胞数为 9.7× 10 8± 4 .6× 10 8(3 .1× 10 8～ 3 0 .5× 10 8) ;平均有核细胞回收率为 79%。质控检测 4 0份标本细胞活率为 88.2 % ,CFU GM回收率和CD3 4 +细胞计数分别为 97.6%和 86.4 %。结论 :本研究采用的CB采集、冻存及造血干细胞和病原生物检测的方法是安     

人类白细胞抗原/昆合淋巴细胞培养不合的骨髓移植新途径

本文报告了13例HLA/MLC配型不合的骨髓移植。所有病例至少有HLA一个位点不同,或MLC的相对反应值反复地明显地高于正常,或二者皆有。13例中有4例采用常规预防急性移植物抗宿主病(GVHD)方法,结果皆发生重度GVHD。有9例同时输注了配型不同的,胎龄4～5个月的胎肝与胸腺,其平均细胞数为9.3×10~4/kg。此9例中有8例无或仅有轻微急性GVHD(0～1度),有1例发生中度(Ⅱ度)急性GVHD。统计学方法说明所采用的新途径对预防GVHD有明显优越性。     

二甲基亚砜联合羟乙基淀粉的非程控降温法冻存脐血造血干细胞研究

为了探索有效低温保存脐血造血干／祖细胞的冷冻保护剂和技术，进行了二种方法试验。第一种方法联合使用二甲基亚砜(DMSO)和羟乙基淀粉(HES)(分子量120000)作为冷冻保护剂并用非程控降温冷冻技术；第二种方法只使用DMSO作为冷冻保护剂并用程控降温仪冷冻技术保存脐血。对二种方法的效果进行比较。结果表明：15份脐血冻存后细胞存活率、CFU—GM回收率，无论在使用非程控降温的第一种方法和使用程控降温仪的第二种方法均无显著性差异。183份脐血质量检测结果及21例临床移植结果也显示两种方法无显著性差异。结论：联合使用DMSO和HES作为冷冻保护剂并用非程控降温冷冻的方法对脐血造血干细胞有良好的保护作用，是一种简单易行、省时省力、适合于脐血造血干细胞库大批量冻存脐血的方法。     

GM—CSF诱导外周血单核细胞的分化及其对混合淋巴细胞反应的 …

作者对ＧＭ－ＣＳＦ作用下的外周血血单菜态特征及免疫表型进行了测定,并观察了其对混合淋巴细胞反应的影响。结果显示,ＧＭ－ＣＳＦ可使外周血单核细胞分化为ＣＤ１４＾＋、ＣＤ１ａ或低表达、ＣＤ８０、ＣＤ８６低表达、ＨＬＡ－ＤＲ＾＋、ＣＤ１１,和非特异性酯酶呈强阳性反应的细胞,符合巨噬细胞的形态及表型特征。     

GM-CSF诱导外周血单核细胞的分化及其对混合淋巴细胞反应的影响

作者对 Ｇ Ｍ Ｃ Ｓ Ｆ 作用下的外周血单核细胞（ Ｐ Ｍ Ｃ） 的形态特征及免疫表型进行了测定, 并观察了其对混合淋巴细胞反应（ Ｍ Ｌ Ｒ） 的影响。结果显示, Ｇ Ｍ Ｃ Ｓ Ｆ 可使外周血单核细胞分化为 Ｃ Ｄ１４ ＋ 、 Ｃ Ｄ１ａ 或低表达、 Ｃ Ｄ８０ 、 Ｃ Ｄ８６ 低表达、 Ｈ Ｌ Ａ Ｄ Ｒ＋ 、 Ｃ Ｄ１１ａ ＋ 、 Ｃ Ｄ４５ Ｒ Ａ＋ , 和非特异性酯酶呈强阳性反应的细胞, 符合巨噬细胞的形态及表型特征。在 Ｍ Ｌ Ｒ 体系中加入上述细胞, 发现其 Ｍ Ｌ Ｒ 的结果因巨噬细胞含量的不同而异, 巨噬细胞与反应细胞比例为１∶２ 时抑制 Ｍ Ｌ Ｒ（ Ｐ＜ ００５ ） , １∶４或１∶８ 时刺激 Ｍ Ｌ Ｒ（ Ｐ＜ ００５ ） ; Ｐ Ｈ Ａ 和 Ｉ Ｌ ２ 能够逆转大剂量巨噬细胞对 Ｍ Ｌ Ｒ 的抑制作用, 抗 Ｃ Ｄ３ 单抗可增强其对 Ｍ Ｌ Ｒ 的抑制作用, 消炎痛不影响巨噬细胞对 Ｍ Ｌ Ｒ 的作用。     

经动脉途径输注造血细胞提高同基因骨髓移植种植效率的实验研究

为了探讨提高骨髓移植种植效率的新方法,借助大鼠同基因骨髓移植模型,从动、静脉不同途径输注PKH-26荧光染料标记的供鼠骨髓细胞至受鼠体内,输注量为有核细胞数2×107/鼠.于骨髓移植后定时活杀受鼠,用流式细胞术检测归巢受鼠骨髓样本中PKH-26标记细胞.结果表明,于骨髓移植后30小时动脉输注组和静脉输注组骨髓的造血细胞归巢指数分别为14.52±1.07和10.49±0.72.本研究证明,经动脉途径输注供鼠骨髓细胞比静脉途径输注将有更多的造血细胞在受鼠造血器官寄居.     

脐血血浆支持造血祖细胞体外集落培养的研究

10份去血小板的脐血血浆混合后用于研究其对造血细胞培养的支持作用。发现按10％的终浓度加入粒-巨噬细胞集落(CFU-GM)琼脂培养体系时,集落产率稍高于用GM-CSF作刺激因子组。当按30％终浓度加入含EPO的甲基纤维素培养体系时,可支持CFU-GM、爆式红系集落(BFU-E)、巨核细胞集落(CFU-Meg),粗-巨噬细胞与红系细胞混合的集落(CFU-GEM),粒-巨噬细胞与红细胞、巨核细胞混合的集落(CFU-GEMM)生长,而混合成人血浆则无此作用。植物血凝素刺激的单个核细胞条件液(PHA-MNCCM)对大部分集落有促进作用,但均无统计学意义。国产IL-3可提高CFU-GEM产率,但似乎不利于含巨核细胞的集落生长。研究结果提示,脐血血浆含有丰富的造血刺激活性,利用脐血血浆进行造血祖细胞体外集落培养可能为简化并推广体外造血细胞培养提供新的途径。