大黄酸通过抑制CDK9/STAT3途径防治低氧性肺动脉高压

目的：探究中药单体大黄酸对低氧性肺动脉高压（HPH）的影响及其作用机制。方法：以SPF级SD大鼠为研究对象,设置常氧组（N）、低氧组（H）、低氧+大黄酸组（HR）。Western blot法检测每组大鼠体内提取的肺组织匀浆中p-CDK9、CDK9、p-STAT3/STAT3、PCNA、Bcl-2、Bax、Caspase-3、Cleaved-Caspase-3（CC-3）蛋白表达差异。以右心导管法插管检测平均肺动脉压（mPAP）评估大鼠的血流动力学情况,称重法检测右心肥厚程度,HE染色后观察血管形态以评估大鼠的肺血管重塑情况。结果：与N组比,H组肺匀浆中p-CDK9、CDK9、p-STAT3/STAT3、PCNA、Bcl-2 蛋白表达均上调,而Bax、Caspase-3、CC-3 蛋白表达下调（均P ＜0.05）,H组大鼠的mPAP及右心肥厚指数显著上升（均P ＜0.05）,管壁面积（WA）/管总面积（TA）明显增加（P ＜0.05）,提示大鼠的肺血管重塑程度明显加重;与H组比,HR组肺匀浆中p-CDK9、CDK9、p-STAT3/STAT3、PCNA、Bcl-2蛋白表达均下调,而Bax、Caspase-3、CC-3 蛋白表达上调（均P ＜0.05）,mPAP及右心肥厚指数显著降低（均P ＜0.05）,WA/TA明显降低（P ＜0.05）,提示肺血管重塑改善。结论：大黄酸可能通过抑制CDK9的表达及磷酸化,抑制STAT3的磷酸化,缓解低氧诱导的大鼠肺动脉高压,改善肺血管重塑和右心肥厚。     

两性霉素B治疗侵袭性支气管肺曲菌病失败一例

患者,男,62岁,从事电镀工工作2年余,经常接触硫酸、硝酸等强酸挥发气体.此次因“发热伴咳嗽10余天,胸闷1周”入院.患者10余天前受凉后出现发热,伴咳嗽,以干咳为主,偶咳黄白色黏痰,不易咳出,就诊当地医院,测体温38.5℃,予头孢类抗生素输注后咳嗽咳痰症状缓解,但体温未降,持续波动于38.0～38.7℃之间.     

趋化因子CX3CL1在野百合碱诱导大鼠肺动脉高压过程中的表达变化

肺动脉高压是以肺动脉血管阻力进行性升高为主要特征的一组疾病,发生机制复杂,肺源性心脏病是其终末阶段.趋化因子CX3CL1(fractalkine,FKN)是趋化因子CX3C亚族的惟一成员,具有可溶形式及膜结合形式,既有趋化性蛋白的功能也有细胞黏附分子的功能,还具有促进平滑肌细胞增殖的生长因子作用[1].本研究通过野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠模型观察肺动脉高压发展过程中FKN的表达变化,探讨FKN在肺动脉高压形成过程中的作用和可能的机制.     

血管紧张素转换酶基因多态性与慢性肺源性心脏病的关系

肾素 血管紧张素 醛固酮 (RAA)系统是体内分布范围最广的调节血管功能和水盐代谢的系统。血管紧张素转换酶 (ACE)基因的 16位内含子中存在着缺失型 (D)和插入型(I)片段多态性表达。不同的基因型影响患者血清中ACE浓度 ,从而影响血管紧张素Ⅱ和醛固酮浓度。血管紧张素Ⅱ通过直接收缩血管及醛固酮的水钠潴留等作用 ,可使肺动脉压力升高 ,有可能是慢性肺源性心脏病发生的一个机制。现就来看看ACE基因多态性与慢性肺源性心脏病的关系。一、对象和方法1 对象 :慢性阻塞性肺疾病 (COPD)患者 110例 ,均符合 1997年中华医学会呼吸病学分会…     

引起儿童腹泻的沙门菌属临床分离株的耐药特点及分子流行病学研究

目的 研究儿童腹泻患者粪便分离的沙门菌属临床分离株的耐药特点及分子流行病学特征.方法 从儿童腹泻患者粪便中分离沙门菌72株,采用血清学凝集试验确定沙门菌血清型;采用K-B纸片扩散法检测抗菌药物的敏感性;采用琼脂稀释法测定头孢噻肟(CTX)和头孢他啶(CAZ)的MIC值;ESBL、ISEcpI和AmpC基因采用PCR法和DNA测序法;采用接合试验测定耐药基因的转移性;PFGE法测定鼠伤寒沙门菌的同源性.结果 从感染性腹泻患儿粪便中共分离出72株沙门菌,其中鼠伤寒沙门菌为主要血清型,占86%(62/72).鼠伤寒沙门菌和汤普森沙门菌通常对临床常用抗菌药物耐药.其中鼠伤寒沙门菌对氨苄西林的耐药率最高(90%,56/62),其次是四环素(81%,50/62),甲氧苄啶/磺胺甲基异(噁)唑(74%,46/62)和氯霉素(66%,41/62).17株(27%,17/62)鼠伤寒沙门菌和2株汤普森沙门菌对CTX耐药.对氨苄西林耐药的49株鼠伤寒沙门菌和2株汤普森沙门菌经PCR扩增后并测序为blaTEM-1b,62株鼠伤寒沙门菌中ESBL基因阳性的有13株(21%,13/62),且主要是blaCTX-M型,其中8株为blaCTX-M-14,3株为blaCTX-M-15,1株为blaCTX-M-55,另外1株为同时blaCTX-M-14和blaCTX-M-55阳性.所有blaCTX-M阳性的菌株均检测出存在上游的插入序列ISEcpl.在1株对头孢西丁耐药的汤普森沙门菌检测出blaDHA-1型AmpC.62株鼠伤寒沙门菌经PFGE分型,发现A型和D型是最主要两个克隆,分别占19%(12/62)和50%(31/62).7株产blaCTX-M型ESBL基因的菌株属于D型.结论 鼠伤寒沙门菌和汤普森沙门菌耐药性严重且blaCTX-M型ESBL基因检出率高;在沙门菌属中发现blaCTX-M-55,在汤普森沙门菌中发现blaDHA-1°克隆性传播是造成鼠伤寒沙门菌流行的主要原因.

Abstract：

Objective To investigate molecular epidemiology and antimicrobial susceptibility of Salmonella spp. isolates recovered from the stool samples of children with diarrhea. Methods Seventy-two isolates of Salmonella spp. were collected from children with diarrhea. The serum type of Salmonella spp.was determined by serology agglutinating method. Antimicrobial susceptibility was determined by K-B disk diffusion method and MICs of cefotaxime and ceftazidime were measured by agar dilution method for Salmonella spp. isolates. PCR and DNA sequencing were used for detecting ESBL, ISEcpl and AmpC genes; The transfer of cefotaxime resistance was determined by conjugation experiments. PFGE was performed for determining the homogeneity of the S. typhimurium isolates. Results A total of 72 isolates of Salmonella spp. were collected, among which S. typhimurium accounted for 86 % (62/72) and was the main serum type. S. typhimurium isolates and S. thompson isolates were often resistant to most of clinically used antimicrobial agents. Resistance of S. thompson isolates to ampicillin was the highest (90%, 56/62),followed by tetracycline (81%, 50/62), trimethoprim/sulfamethoxazole (74%, 46/62) and chloramphenicol (66%, 41/62). Seventeen S. typhimurium isolates (27%, 17/62) and two S. thompson isolates were resistant to cefotaxime. Forty-nine S. typhimurium isolates and two S. thompson isolates were positive for blaTEB-1b and resistant to ampicillin. Thirteen ESBL-producing S. typhimurium isolates (21%, 13/62) were positive for blaCTX-M (eight for blaCTX-M-14, three for blaCTX-M-15, one for blaCTX-M-55, one for both blaCTX-M-14 and blaCTX-M-55). All isolates harboring blaCTX-M genes were positive for upstream insert sequence ISEcpl. blaDHA-1was detected in a cefoxitin-resistant S. thompson isolate. Two main clones (PFGE type A and D) accounting for 19% (12/62) and 50% (31/62) respectively were found among 62 S. typhimurium isolates. Seven CTXM-producing isolates belonged to PFGE type D. Conclusions The multi-resistance to antimicrobial agents and high prevalence of blaCTX-M genes are found among S. typhimurium and S. thompson clinical isolates. blaCTX-M-55 is first found in S. typhimurium isolates and blaDHA-1 is found in S. thompson isolates. Clonal spread is responsible for the dissemination of S. typhimurium isolates.     

CX3CL1/fractalkine在肺动脉高压过程中的表达变化及葛根素的干预作用

目的: 观察趋化因子CX₃CL1/fractalkine(FKN)在野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠模型中的变化并探讨葛根素的干预效应。方法: 复制大鼠肺动脉高压模型,随机分为溶剂对照组(C组)、野百合碱造模组(M组)和葛根素干预组(M+P组)。测量并比较各组肺动脉平均压(mPAP)、右心室平均压(mRVP)、颈动脉平均压(mCAP)、右心室游离壁(RV)和左心室加室间隔(LV＋S)重量比。观察肺细小动脉显微结构变化,测定肺细小动脉管壁面积/管总面积(WA/TA)、肺细小动脉中膜厚度(PAMT),测定血浆可溶性fractalkine(sFKN)浓度,肺细小动脉FKN蛋白,肺组织FKN mRNA的表达。结果: M组mPAP、mRVP、RV/(LV+S)、WA/TA和PAMT显著高于C组(P<0.01),M+P组RV/(LV+S)、WA/TA和PAMT较M组显著降低(P<0.01),M组血浆sFKN、肺组织FKN mRNA和肺动脉壁FKN含量显著大于C组(P<0.01),M+P组显著降低(P<0.05),sFKN与PAMT呈正相关(r＝0.719,P<0.01),与RV/(LV+S)呈正相关(r＝0.685,P<0.01)。结论: 葛根素具有抑制FKN表达、肺动脉高压发展和肺血管结构重建的作用。     

改良右心导管法测量大鼠肺动脉压力的实验方法研究*

 目的： 研究快速、经济、准确、易普及的测定肺动脉压力的实验方法。方法: 通过自制聚乙烯（polyethylene, PE）导管,连接PowerLab多通道生物信号记录系统,肝素化后经颈外静脉插管,经上腔静脉、右心室进入肺动脉,记录实时波形及压力。通过解剖明确出现不同波形时的导管位置及朝向,从而指导导管推送过程。结果: 通过自制PE导管。采用改良右心导管法对120只Sprague-Dawley（SD）大鼠进行肺动脉插管。采用该法从插管开始至到达肺动脉平均耗时2 min,成功率95%。结论: 使用自制的PE导管经改良右心导管法测定肺动脉压力具有成功率高、数据准确、操作省时、方法易掌握的优点,是一种较好的测定大鼠肺动脉压力的实验方法。     

SB203580对急性肺栓塞后肺动脉高压及MCP-1表达的影响

 目的：观察单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1)与急性肺栓塞（pulmonary thromboembolism, PTE）后肺动脉高压形成的关系;探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase, MAPK）特异性抑制剂SB203580对急性PTE后肺动脉高压及MCP-1表达的影响。方法：采用自体血栓回输法复制Sprague-Dawley大鼠急性PTE模型;将大鼠随机分成5组,每组观察1 h、4 h和8 h 3个时点;急性PTE模型复制前1 h,分别对MCP-1中和抗体C1142组及SB203580组进行药物预处理;在1 h、4 h和8 h检测各组肺动脉平均压力（mean pulmonary artery pressure, MPAP）和MCP-1 mRNA及蛋白表达。结果：（1）在相同时点,急性PTE组MPAP和MCP-1 mRNA及蛋白表达均较溶剂对照组显著升高（P<005）;（2）在相同时点,C1142组及SB203580组MPAP和MCP-1 mRNA及蛋白表达均较急性PTE组显著降低（P<005）。结论：（1）急性PTE后MCP-1的大量表达参与急性PTE性肺动脉高压的形成;（2）SB203580可能通过p38 MAPK信号转导通路,下调MCP-1表达,降低急性PTE肺动脉压力。     

MAL基因在胃癌组织中的甲基化及其mRNA的表达

目的:研究MAL基因在胃癌和癌旁组织中的甲基化状态及其mRNA表达.方法:应用甲基化特异性PCR(MSP)和实时荧光定量RT-PCR法检测37例人胃癌组织及对应癌旁5 cm组织中MAL基因的甲基化状态和mRNA表达,并分别将其与各临床病理指标进行统计学分析.结果:37例胃癌组织中MAL基因甲基化率为78.4%.对应37例癌旁组织中MAL基因甲基化率为5.4%.癌组织与癌旁组织的甲基化率差异有统计学意义(P<0.01).胃癌组织中MAL基因甲基化状态与患者年龄、性别、肿瘤大小、有无淋巴结转移、胃癌分化程度、临床分期无统计学意义(P>0.05).在胃癌组织与对应癌旁组织中MAL基因mRNA定量表达差异有统计学意义(P<0.05),胃癌组织中MAL基因mRNA定量表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、胃癌分化程度、有无淋巴结转移、有无神经束浸润及肿瘤TNM分期无相关(P>0.05).结论:胃癌组织中MAL基因表达缺失或低下,并且存在高甲基化率,MAL基因发生甲基化可能与胃癌发生有关.     

质粒介导16S rRNA甲基化酶在奇异变形杆菌临床分离株的流行情况研究

到目前为止,在革兰阴性杆菌中已发现AnnA、RmtA、RmtB、RmtC、RmtD和NpmA 6种16S rRNA甲基化酶,且编码这些酶的基因通常和超广谱β-内酰胺酶(ESBL)基因共处一个质粒上,通过质粒在不同的菌株之间播散~[1-4].RmtC型16S rRNA甲基化酶首次在奇异变形杆菌中被发现~[4],但16S rRNA甲基化酶在奇异变形杆菌中的流行情况还不清楚.本研究的目的是对从我院2004年5月至2007年9月临床标本中分离的198株奇异变形杆菌进行16SrRNA甲基化酶筛查,并对其转移机制进行研究,现将结果报道如下.