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1.
目的:研究瘦素(Leptin)固相放射免疫分析法的建立。方法:将提取的兔抗人Leptin特异性抗体IgG,包被在活化的塑料试管内壁,建立了简便、快速、高灵敏、特异的固相竞争RIA,测定人血清Leptin。结果:标准曲线范围为(0.5~24)ng/ml;测定69例健康人血清正常值为(3.68±1.46)ng/ml;最小检出值为0.38ng/ml,批内CV%为5.6%,批间CV%为8.8%;回收率为92%。本文所建方法与液相RIA标准曲线具有良好的平行性;使用两种方法平行测定88份血清Leptin浓度(1.00~7.68)ng/ml,经统计学处理两者之间具有良好的直线相关(r=0.987,P〈0.001,Y=0.977X)。结论:所建立的Leptin固相放射免疫分析法为科研及临床病人血清Leptin浓度的测定提供了一种新的检测方法。  相似文献   
2.
目的:研究高葡萄糖(HG)、脂多糖(LPS)及双氧水(H2O2)应激对HELA细胞上清中白细胞介素-6(IL-6)及leptin含量的影响。方法:分别给予以上三种炎症因子,建立HELA细胞炎症反应模型,采用放射免疫分析测定不同时间点细胞上清中IL-6及leptin含量的变化。结果:与空白对照组相比,三种刺激物作用6h与24h后,IL-6的含量显著升高,而leptin含量明显下降;且随着作用时间延长变化愈加明显,统计学上差异有显著性(P〈0.05)。结论:leptin可能作为一种炎性细胞因子在炎症反应中发挥一定的作用。  相似文献   
3.
目的:研究肝缺血/再灌注(H-I/R)对食欲素-A(Orexin-A)表达水平的影响,探讨Orexin-A在创伤应激反应中的作用。方法:建立大鼠70%H-I/R模型,设立假手术和不同再灌注时间的损伤组,每组9只。采用自制Orexin-ARIA检测损伤后血浆、下丘脑Orexin-A的蛋白水平,并采用RT-PCR观察损伤后下丘脑Orexin-AmRNA表达的变化。结果:所用Orexin-ARIA的标准曲线形态和测量结果均良好。与损伤后假手术组血浆、下丘脑Orexin-A的蛋白水平相比,四个再灌注组与之均无显著差异,而缺血60min/再灌注60min(I60’R60’)组血浆Orexin-A水平显著高于I60’R360’组。损伤后I60’R240’、I60’R360’组下丘脑Orexin-AmRNA表达均显著高于假手术组和I60’R60’组。结论:H-I/R引起Orexin-A表达水平一定程度的变化,Orexin-A可能作为一种迟发的应答因子参与创伤应激后代谢紊乱的调控。  相似文献   
4.
不同方法制备脂质体125I-IL-8包封率的比较   总被引:3,自引:0,他引:3  
本文用四种不同的方法制备脂质体,同时包裹^125I-IL-8。对不同方法制备的脂质体包裹^125I-IL-8的包封率进行对比。结果表明:机械分散法、钙融合法、反相蒸发法制备的脂质体对^125I-IL-8的包封率依次增大。而用反相蒸发法和钙融合法联合制备的脂质体对^125I-IL-8的包封率为最大。  相似文献   
5.
目的研究肺癌、结肠癌和直肠癌患者血清瘦素(Leptin)的表达变化,探讨其与患者预后的关系。方法采集肺癌、结肠癌、直肠癌患者及正常对照者的血清样品,采用相应试剂盒检测血清Leptin、癌胚抗原的水平,采用全自动生化分析仪检测反映脏器功能、代谢功能的相关生化指标变化。结果与正常对照者相比,三种肿瘤患者血清Leptin显著升高,癌胚抗原、脏器功能指标和代谢指标均有不同程度变化。结论Leptin可能作为评价恶性肿瘤患者状况的新指标。  相似文献   
6.
本方法将兔抗人白介素8(IL-8)特异性抗体IgG包被塑料试管内壁,建立了一种快速、简便、高灵敏、特异的固相竞争放射免疫分析法(RIA)测定人血清中的IL-8.标准曲线范围为0.2~9.6ng/mL,最小检出值和正常值分别为0.16 ng/mL和0.30±0.05ng/mL.批内CV%为6.8%,批间CV%为9.6%.本文所建的固相RIA法与液相RIA法平行测定58份样品的IL-8浓度(0.26~3.56 ng/mL),经统计学处理,两者之间具有良好的直线相关(r=0.954,P<0.001,Y=0.994X).表明本文建立的固相RIA法可以代替液相RIA法测定血清IL-8浓度,并适用于大批样品和自动化检测.  相似文献   
7.
瘦素在肝缺血/再灌注致肾损伤中作用的研究   总被引:1,自引:1,他引:0  
目的:研究瘦素(Leptin)在肝缺血/再灌注(I/R)后肾组织中的表达变化,探讨其与肝I/R介导的肾损伤的关系。方法:建立大鼠70%肝I/R模型,设立假手术和缺血60min后再灌注60、150、240、360min组,观察肾脏的病理学变化,检测各组血清尿酸、总抗氧化能力,肾Leptin蛋白及其mRNA表达的变化。结果:与假手术组比较,缺血60min/再灌注150min及再灌注240min组血清尿酸显著升高,以再灌注240min升高最为显著;再灌注240min和360min组血清总抗氧化能力显著升高,以再灌注240min升高最为显著;再灌注150、240和360min组肾Leptin蛋白表达显著升高,再灌注60、240、360min组肾LeptinmRNA表达显著升高,而再灌注150min组LeptinmRNA显著降低。病理学观察提示肝I/R早期的肾损伤较重而后期显著减轻。结论:Leptin在肝I/R后肾组织内的表达变化与肾损伤密切相关,提示它可能作为一种保护因子对抗肝I/R介导的肾损伤。  相似文献   
8.
白介素8放射免疫分析的建立及初步应用   总被引:7,自引:0,他引:7  
目的:建立高灵敏和高特异性的IL-8放射免疫分析方法。方法:用人工重组的白细胞介素8(IL-8)多次免疫和习,获取商效价的IL-8抗体。用氯氨T法制备^1234I标记IL-8,经Sephadex G-25纯化,抗原抗全反应采用平衡一步法,4℃培养24h后经PR试剂分离结合和游离的标记抗原。结果:该法测定范围0.2~9.6ng/ml,最低检出量迷0.1ng/ml,批内和批间误差分别小于5%和10%。  相似文献   
9.
目的:观察淀粉样β蛋白对小胶质细胞活性、形态学以及分泌炎性细胞因子的作用,为阿尔茨海默病的炎性反应机制及抗炎治疗提供体外依据。方法:实验于2003-03/2004-03在解放军总医院老年医学研究所进行。应用BV-2细胞作为体外小胶质细胞模型,加入不同浓度淀粉样β蛋白25~35或1~42(5,10,20,40,60μmol/L)及20μmol/L不同孵育状态(37℃孵育3,6,12,24h、3,5和7d)的淀粉样β蛋白25~35或1~42分别培养2~24h。四唑盐法检测淀粉样β蛋白对细胞活性的影响,倒置相差显微镜下观察细胞形态学改变,并应用放射免疫法测定加入淀粉样β蛋白后BV-2细胞上清白细胞介素1β及白细胞介素6水平。结果:①细胞活性:淀粉样β蛋白对BV-2细胞的生存活性没有影响(P均>0.05)。②细胞形态学改变:在较低浓度时(5~10μmol/L)淀粉样β蛋白1~42就可以使BV-2细胞出现明显的形态学改变(多数细胞聚集成团,有的胞体变得肥大,胞核大而圆,核仁明显;有的胞体变为梭形,由胞体伸出一个或多个较长的枝状突起),与淀粉样β蛋白1~42孵育状态有关(37℃孵育5~7d时最为明显),而淀粉样β蛋白25~35无此作用。③白细胞介素1β水平:淀粉样β蛋白1~42与25~35均可以刺激BV-2细胞分泌,二者作用类似。20μmol/L淀粉样β蛋白作用6h后其水平升高,至12h达到高峰,约为对照组的3倍,此后逐渐下降(P<0.01)。当不同浓度淀粉样β蛋白作用12h时,淀粉样β蛋白为20μmol/L时在上清中可以检测到白细胞介素1β明显增加,此后随着浓度的增加其分泌也逐渐增加,至60μmol/L时为对照组的5倍(P<0.01)。④白细胞介素6水平:各淀粉样β蛋白处理组细胞上清液均不能检测到其水平有明显变化。结论:淀粉样β蛋白对BV-2细胞的生存活性没有影响,淀粉样β蛋白可以激活BV-2细胞发生形态学改变并释放炎性细胞因子,但二者的作用途径不同,形态学改变与淀粉样β蛋白片段及聚集状态均有关;而分泌白细胞介素1β与淀粉样β蛋白片段及聚集状态均无关,并且这种刺激作用具有时间以及浓度依赖性。  相似文献   
10.
急性心肌梗死患者血清Leptin增高与其他相关因素的分析   总被引:6,自引:3,他引:3  
目的探讨急性心肌梗死(AMI)和冠状动脉硬化(CS)患者血清瘦素(Leptin)的变化及与C反应蛋白(CRP)、肌钙蛋白T(TnT)、内皮素(ET)的相关性。方法收集临床确诊的AMI和Cs患者血清,采用高灵敏的Leptin及ET放射免疫分析法、TnT的自动生化分析法及高灵敏的CRP酶联免疫吸附法(ELISA)测定相应指标的血清水平。结果AMI组患者血清Leptin、TnT、CRP和ET水平均较正常对照组显著增高(P均〈0.01);而CS组患者除TnT外,其他3种因子血清水平也明显高于正常对照组(P均〈0.01);相关分析显示,上述增高因素互不相关,均为独立的影响因素之一,AMI组和CS组间仅TnT显示出差异有显著性(P〈0.01)。结论AMI和CS组患者血清Leptin水平均明显上升,但两组间差异无显著性;两组患者血清Leptin水平与CRP、TnT以及ET水平不存在相关性。  相似文献   
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