二价双启动子防龋DNA疫苗的构建及鉴定

目的：构建并鉴定具有在真、原核细胞中均可表达目的抗原并具备强免疫原性、针对致龋菌变形链球菌2种主要毒力因子的DNA疫苗.方法：利用PCR技术从载有变形链球菌gtfB基因的质粒中扩增葡聚糖结合区段（GBR）基因片断;将合成的组织纤溶酶原信号肽序列（tPA-SP）连接到GBR基因的上游;再将此基因（sGBR）定向克隆到载有sSBR基因的双启动子真核表达载体pCN-SSIE上,构建出pCN-SSISG;对重组质粒pCN-SSISG进行酶切图谱分析和DNA序列测定.结果：酶切图谱分析显示,PCR扩增的及插入到pCN-SSIE中的目的基因sGBR片断大小与预期相符;DNA序列测定结果确定：重组质粒pCN-SSISG开放性阅读框架和插入的信号肽序列均正确.结论：成功构建了具有在真核、原核宿主细胞均可表达的具有双启动子的质粒pCN-SSISG.     

肝包囊虫病1例

1临床资料患者,男,42岁。因发现左上腹包块10余天入院。检:左上腹近剑突下有一4cm×6cm左右,表面光滑无结节,活动可,质软偏中的肿块,无压痛;B超示:左肝见一液性无回声区,大小约9cm×7cm左右,未见血流;血常规示:白细胞总数4.2×109/L,中性细胞59.4%,淋巴细胞38%,嗜酸性细胞2.6%。结合患者有15年新疆地区生活史,考虑左肝囊肿,包囊虫病首先考虑;术前诊断:左肝囊肿,包囊虫病。行剖腹探查术,术中见左肝近镰状韧带处有一10cm×8cm左右囊性肿块,表面光滑,无结节。抽出囊内液呈透明蒸馏水样300ml左右,于囊内注入10%福尔马林液50ml,10min后切开囊肿,…     

家兔脑干机械性损伤后S100β表达与损伤时间的关系

目的：研究家兔脑干机械性损伤后S100β含量随时间变化规律。方法健康家兔24只,经自制打击装置打击脑干部位,分别于损伤后0、2、4、8、16、24、48、72h解剖取脑干,甲醛固定,免疫组织化学和图像分析技术检测。结果损伤后0h家兔脑干中可见S100β阳性染色均匀分布在星形胶质细胞胞体及突起中。脑干机械性损伤后2h ,星形胶质细胞结构破坏,大量的S100β从中漏出,突起消失;之后随着时间的延长S100β逐步升高,24h达到高峰,之后下降,但仍高于0h （LSD检验,P＜0．05）。结论 S100β主要存在于神经胶质细胞,是中枢神经损伤的敏感生化指标,根据S100β的含量变化可作检测脑早期缺血缺氧性损伤和预后的黄金指标;同时可以应用于法医学中枢神经系统损伤时间的推断,为法医学鉴定提供一定的实验依据。     

乌头碱中毒救治1例

患者,男,35岁,自学中药者,有自杀倾向,于中医门诊取川乌、草乌各约5 g,水煎服1 h后出现口舌麻木、四肢发麻、胸闷、心悸、头晕等症状。WBC 11.44×109/L、NE 78.01×109/L,ALT 45 IU/L,AST 47 IU/L,CK 205 IU/L,CK-MB 34IU/L,LDH 250 IU/L,HBDH 201 IU/L,GLU 8.9 mmol/L;心     

驱虫斑鸠菊对大鼠实验性矽肺纤维化干预作用

目的观察雾化吸入新疆维吾尔药驱虫斑鸠菊(VAW)对矽肺纤维化大鼠肺表面活性蛋白D(SP-D)、Ⅰ型胶原蛋白和Smad3蛋白表达的影响。方法无特定病原体级健康雄性Wistar大鼠随机分成对照组、二氧化硅(Si O2)模型组和VAW干预组,每组20只。采用一次性非暴露式气管滴注法,Si O2模型组和VAW干预组大鼠均予质量浓度为50.0 g/L Si O2混悬液1.0 m L染尘,对照组大鼠予生理氯化钠溶液1.0 m L。染尘后1 d,VAW干预组予雾化吸入质量分数为20%的VAW注射液,Si O2模型组和对照组均予雾化吸入生理氯化钠溶液,1.0 m L/次,2次/d,直至处死。各组大鼠均分别在雾化吸入干预后1、3、7和14 d各处死5只,观察肺组织病理学改变情况,采用酶联免疫吸附法检测血清中SP-D表达水平,采用免疫组织化学法检测肺组织中Ⅰ型胶原蛋白和Smad3蛋白的阳性表达。结果肺组织病理学观察显示:对照组大鼠肺组织结构正常;Si O2模型组大鼠出现肺泡炎和肺纤维化;VAW干预组大鼠肺泡炎和肺纤维化程度明显轻于Si O2模型组。Si O2模型组大鼠SP-D表达水平高于对照组[(40.48±3.58)vs(38.20±2.21)μg/L,P<0.05];VAW干预组大鼠SP-D表达水平分别与对照组和Si O2模型组比较,差异均无统计学意义[(39.38±2.25)vs(38.20±2.21)μg/L,(39.38±2.25)vs(40.48±3.58)μg/L,P>0.05];SP-D表达水平在处理方案与处理时间的交互效应上无统计学意义(P>0.05)。Si O2模型组和VAW干预组Ⅰ型胶原蛋白和Smad3蛋白的阳性表达均高于对照组(P<0.01),VAW干预组Ⅰ型胶原蛋白和Smad3蛋白的阳性表达低于Si O2模型组(P<0.017)。结论 VAW能改善Si O2所致肺泡炎及肺纤维化程度,其机制可能与抑制SP-D、Ⅰ型胶原蛋白和Smad3蛋白的表达有关。     

老年人骨质疏松影响因素的病例对照研究

①目的探讨老年人骨质疏松的影响因素。②方法某医院老年门诊就诊的60岁及以上老年人703例,按照非匹配病例对照研究形式,将确诊为骨质疏松的303例作为病例组,未发生骨质疏松的400例作为对照组,进行骨密度测定、一般人口学及影响因素调查。③结果单因素分析显示,性别、年龄、婚姻、学历、既往病史、现病史、钙剂使用情况、运动情况、吸烟、饮酒、膳食结构等与老年人骨质疏松相关,差异具有统计学意义（ P ＜0．05）;多因素分析显示,年龄、学历、婚姻状况、钙剂使用情况、骨折史、牙齿脱落情况、吸烟情况是老年人骨质疏松的主要影响因素（ P ＜0．05）;年龄＞65岁、低学历、丧偶或离异、未服用钙剂、有骨折史、牙齿脱落、吸烟的老年人骨质疏松的发生率高。④结论年龄大、丧偶或离异、有骨折史、有牙齿松动脱落、吸烟是老年骨质疏松的危险因素,而高学历、服用钙剂则是其保护因素。     

老年慢性阻塞性肺疾病急性加重患者有创机械通气撤机失败危险因素分析

目的探讨进行有创机械通气的老年慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)急性加重患者撤机失败的危险因素。方法采用回顾性研究,选取2012年7月至2014年6月行有创机械通气治疗并符合撤机条件的76例65岁及以上慢阻肺急性加重患者。患者进行自主呼吸试验(SBT),通过后观察48 h,无需重新行机械通气者纳入撤机成功组,不能通过SBT或通过SBT后48 h内需重新行机械通气者纳入撤机失败组,分析撤机失败的危险因素。结果 53例患者纳入撤机成功组,23例纳入撤机失败组。撤机失败组脓毒症、多器官功能障碍综合征(MODS)、真菌感染、低蛋白血症、机械通气时间14 d、气胸、心力衰竭、糖尿病、冠心病和肝功能不全发生率高于撤机成功组(P0.05)。Logistic回归分析结果显示MODS(OR=8.070)、机械通气时间14 d(OR=17.760)、心力衰竭(OR=4.597)、糖尿病(OR=13.937)是撤机失败的危险因素(P0.05)。结论 MODS、机械通气时间14 d、心力衰竭、糖尿病是老年慢阻肺急性加重患者有创机械通气撤机失败的危险因素。     

可视化教学技术在培养麻醉学住院医师临床实际操作能力中的探索

教学可视化是指运用一系列可视化手段将教学的关键环节呈现出来,使其清晰可见的过程,是一种直接和更为有效的教学策略[1-2].近年来一系列可视化手段包括可视喉镜、超声引导血管穿刺、超声引导神经阻滞及VISIBLE BODY可视化软件等,为麻醉学的教学带来了便利,也为麻醉学住院医师的培养提供了先进的手段和全新的平台.本文对可视化手段对麻醉学的教学进行了总结和评价,报告如下.     

杜仲颗粒与鲑降钙素注射液联合常规疗法治疗原发性骨质疏松症临床观察

目的:观察在常规西医疗法基础上予杜仲颗粒联合鲑降钙素注射液治疗原发性骨质疏松症(POP)肝肾不足证的疗效。方法:选取116例POP肝肾不足证患者,随机分为对照组和治疗组各58例。2组均予调整生活方式、适量运动等常规干预,对照组口服碳酸钙D3片与阿仑膦酸钠片,治疗组在对照组基础上予杜仲颗粒联合鲑降钙素注射液治疗。2组疗程均为6月。比较2组患者治疗前后的肝肾不足证症状评分、骨密度(BMD)、血清中骨硬化蛋白(SOST)和Dickkopf-1(DKK-1)水平,评价治疗后的临床疗效。结果:治疗组总有效率为96.55%,高于对照组(82.76%),差异有统计学意义(P0.05)。2组腰脊疼痛、步履艰难、目眩、酸软少力评分均较治疗前下降(P0.01),治疗组各项评分均低于对照组(P0.01)。2组腰椎正位(L2~4)和右股骨颈的BMD均较治疗前升高(P0.01),治疗组2项BMD值均高于对照组(P0.01)。2组血清中SOST和DKK-1水平均较治疗前下降(P0.01),治疗组2项指标水平均低于对照组(P0.01)。结论:在常规西医疗法基础上予杜仲颗粒联合鲑降钙素注射液治疗POP肝肾不足证疗效确切,可有效改善患者的临床症状、促进骨形成,降低患者血清中的SOST和DKK-1水平可能是其疗效途径之一,值得进一步探讨。     

克拉屈滨对人脐静脉内皮细胞的毒性作用及机制

目的研究克拉屈滨(2-CdA)对内皮细胞活力、迁移、周期和分泌活性的影响,以评估2-CdA在临床应用中对心血管的影响。方法 CCK-8法检测不同浓度2-CdA对内皮细胞生长的影响;划痕实验检测细胞迁移;流式细胞术检测细胞周期;吖啶橙/溴化乙啶法检测细胞凋亡;Gries法测定一氧化氮(NO)含量;ELISA法检测血管内皮生长因子(VEGF)水平。结果在0.4~40μmol/L浓度范围,2-CdA对内皮细胞有明显抑制作用,IC50为4.126μmol/L。随药物浓度升高和作用时间的延长,2-CdA的抑制作用增强;2-CdA高浓度长时间作用可导致内皮细胞凋亡。5μmol/L 2-CdA作用内皮细胞后,细胞迁移能力受抑制,细胞周期明显阻滞在S期。吖啶橙/溴化乙啶细胞染色结果显示,高浓度2-CdA可诱导内皮细胞的凋亡。5μmol/L 2-CdA作用内皮细胞后导致NO和VEGF含量减少。结论 2-CdA具有内皮细胞毒性作用,引起细胞周期阻滞,并导致细胞凋亡。