结核分枝杆菌embB基因306位点突变与耐药的相关性研究

embB基因突变，特别是其306位点（embB306）的点突变一直被认为是结核分枝杆菌耐乙胺丁醇的重要原因。但是，Hazbon等对来自世界各地的1020株菌株进行分析后认为，embB306突变不直接引起结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药性，而是容易产生对任何药物的耐药性。Plinke等报道，embB306位点突变只发生在乙胺丁醇耐药菌株中，从而说明该位点突变与乙胺丁醇耐药有关。可见embB306位点突变与乙胺丁醇耐药的关系还存在着较大的分歧。     

利用结核分枝杆菌基因型分型技术研究外源性再感染在结核病复发中的作用

目的 研究外源性再感染在结核病复发中的作用。方法以上海地区1999年1月至2004年3月复发肺结核患者为对象，通过比较复发肺结核患者前后两次发病时结核分枝杆菌散在分布重复单位（mycobacterial interspersed repetitive units，MIRU）基因型的差异，判断结核病复发的原因。结果在37例符合要求的结核病复发患者中，25例患者两次发病时MIRU基因型发生了变化，提示68％的结核病患者复发是由于外源性再感染而引起的。随着年龄的增加，结核病复发患者中由外源性再感染所致的可能性逐步降低，≤30岁、31～60岁、≥61岁患者中外源性再感染的比例分别为3／3、73％（11／15）、58％（11／19）。随着复发间隔时间的延长，结核病复发患者中由外源性再感染所致的可能性逐步增加，6个月内复发的患者中58％（7／12）是由外源性再感染引起的，而1年以后这个比例达到79％（11／14）。结论外源性再感染是上海地区结核病复发的重要原因；MIRU分型方法是研究结核病复发原因的可行方法。     

上海市2000-2002年91株结核分枝杆菌分子流行病学分析

目的探讨上海地区结核病分子流行病学特点。方法对从上海市疾病预防控制中心菌株库中随机抽取的2000—2002年各50株耐药和敏感菌株进行间隔区寡核苷酸分型（Spoligotyping）和分枝杆菌散在分布重复单位（MIRU）基因型分型，并结合流行病学资料进行分析。结果抽样菌株中，具有特异Spoligotyping指纹图谱的北京基因型菌株在上海地区分布达89％（81／91）。未接种过卡介苗（BCG）的患者中北京基因型菌株占88．5％（54／61），接种过BCG的患者中北京基因型菌株占90％（27／30），差异无统计学意义。北京基因型菌株耐药率为45．7％（37181），低于非北京基因型菌株的耐药率60．0％（6／10），差异无统计学意义。MIRU成簇菌株占所有菌株的62．6％（57／91）。结论北京基因型菌株在上海地区有广泛分布，北京基因型菌株与BCG接种和耐药无关，结核病患者中有部分是由于近期传播而引起的。     

2005年Keystone结核病国际研讨会简介

Keystone symposia（www．keystonesymposia.org）作为独立的非盈利机构以主办高水平的生物医学专题研讨会而闻名。其主办的研讨会一般规模都不大，主题明确，为科学家对共同感兴趣的研究前沿问题进行面对面的相互交流和探讨提供了很好的机会。关于结核病基础研究的研讨会每两年举行1次，2005年的会议于4月2日至7日在加拿大Whistler召开。参加本次会议的有来自世界各地的500多名代表，     

错配PCR技术在快速检测耐药结核分枝杆菌中的应用

耐药结核病的早期快速诊断是结核病控制中亟待解决的关键问题之一。利用基因型检测耐药性包括PCR产物直接测序法，错配PCR法等。错配PCR技术最早由Newton等于1989年建立并用于人抗胰岛素基因缺陷的检查，目前已广泛应用于基因点突变的检测。根据PCR引物设计的不同，可将其分为间接错配PCR，即引物与野生型完全互补，以突变株为模板不能扩增得到PCR产物，和直接错配PCR，即引物与特定的点突变完全互补，以野生株为模板不能扩增得到PCR产物。已有用间接错配PCR方法检测结核分枝杆菌利福平耐药的报道。本研究以检测耐利福平的结核分枝杆菌rpoB基因531位点的点突变为对象，建立了直接错配PCR法，并与间接错配PCR法进行了比较。     

结核病血清学诊断研究进展

结核病是由结核分枝杆菌感染引起的传染性疾病,在历史上曾经夺去过数以万计的生命.伴随着减毒牛分枝杆菌疫苗的诞生,以及一系列抗生素和抗结核药物的发现与应用,科学家曾乐观地认为结核病会被人类消灭.然而,2008年全球仍有940万例新增结核患者,全世界每年有170万人死于结核病,其中90%以上的患者分布在发展中国家.同时,结核病也是引起HIV感染患者死亡的重要原因之一,估计2008年全世界200万HIV阳性死亡患者中,有50万患者同时患有结核病.     

原发性耐药是耐药结核病产生的重要原因

目的 研究原发性耐药在产生耐药结核病中的作用。方法对上海市疾病预防控制中心收集保存的1996年至2004年结核分枝杆菌临床菌株进行分析统计，计算原发性耐药和获得性耐药的比例；并对16例复发耐药患者前后发病菌株进行结核分枝杆菌散在分布重复单位（mycobacterial interspersed repetitive units，MIRU）基因型比较分析。结果在保存的初治患者的8120株结核分枝杆菌中，耐药菌株707株，耐药率为8．7％；复治患者的菌株610株，耐药菌株150株，耐药率为24．6％。初治和复治患者中耐药率均有上升趋势。以初治患者耐药代表原发性耐药，复治患者耐药代表获得性耐药，其原发性耐药占总耐药菌株的82．5％。在16例复发耐药患者中，13例患者在两次发病时分离的菌株基因型不一致，可能是由于重新感染了耐药菌株所致，属于原发性耐药。结论原发性耐药是目前耐药结核病产生的重要原因，该结果提示有效控制结核病的传染源是减少耐药结核病产生的关键。     

结核分枝杆菌散在分布重复单位基因型分型法的应用研究

目的 建立结核分枝杆菌散在分布重复单位(mycobacterial interspersed repetitive units，MIRU)基因型分型法，评估该方法在我国应用的可行性。方法 采用简单数字表法随机抽取上海地区2000年至2002年保存的菌株，对其进行MIRU分型，并与间隔区寡核苷酸分型法(Spoligotyping)的结果进行比较。结果 用Spoligotyping方法对随机抽样的91株临床菌株进行基因型分型，得到20种基因型，其中81株(89％)属于北京基因型菌株，而用MIRU分型方法可将这些菌株分为46种基因型。81株北京基因型菌株可以分为39种不同的MIRU基因型。12个MIRU位点的多态性分析表明各位点有较大的区别，其中位点26显示了较高的多态性，位点16、31、40显示了中等程度的多态性。结论 MIRU分型方法简单快速，其数字化结果清晰可靠，是一种有效的结核分枝杆菌基因型分型方法。     

上海地区有治疗史患者中结核分枝杆菌耐药菌株的传播

根据耐药产生的原因，理论上可将耐药结核病分为直接感染耐药结核分枝杆菌引起的原发性耐药和结核分枝杆菌菌株的基因组发生突变而产生的获得性耐药，由于结核病的发病特点及结核分枝杆菌菌株的特性，传统方法无法鉴别耐药是否由同一菌株引起，因此目前简单地将原发性耐药定义为未经治疗的患者对某种抗结核药物的耐药，而获得性耐药是既往有结核病治疗史（超过1个月）的耐药结核病。实际上此种获得性耐药包括以下3种情况：