ARHI基因抑制U937白血病细胞株生长并诱导其G_2/M期阻滞及凋亡

目的:探讨抑癌基因ARHI在急性髓细胞白血病中的表达情况,同时探索其对U937细胞生长的影响。方法:RT-PCR方法检测急性髓细胞白血病细胞株、人胚肾细胞293FT、白血病原代细胞以及健康志愿者血细胞中ARHI mRNA的表达情况。构建高表达ARHI的MSCV-IRES-GFP-ARHI质粒转染U937细胞,MTT法连续8 d检测细胞活性绘制生长曲线。新鲜培养基重悬U937细胞24 h后,采用流式细胞术检测细胞周期以及细胞凋亡。结果:293FT细胞、健康志愿者血细胞中均检测到ARHI mRNA表达,而白血病细胞株以及白血病患者原代细胞中未检测到该基因的表达。生长曲线显示高表达ARHI基因的U937(U937-ARHI)细胞在第6~8天细胞活力低于对照(U937-GFP)组。高表达ARHI的U937细胞G2/M期细胞比例及细胞凋亡率均高于对照组(P0.05)。结论:ARHI在急性髓系白血病细胞中的表达减低;高表达ARHI基因能抑制U937细胞生长、阻滞其细胞周期在G2/M期并促进细胞凋亡。     

非清髓异基因造血干细胞移植治疗低增生性MDS1例并文献复习

目的探讨非清髓性异基因外周血造血干细胞移植治疗低增生性骨髓增生异常综合征(MDS)的疗效,观察其植入及并发症的发生情况。方法我院诊断为低增生性MDS患者1例,采用氟达拉滨+阿糖胞苷+环磷酰胺的非清髓预处理方案,环孢素A+甲氨蝶呤+骁悉预防移植物抗宿主病。结果 STR-PCR证实移植后30d及3个月骨髓植入为完全供者型,移植后3个月发生多发性脑梗塞,6个月出现面部皮疹及口腔溃疡,通过调整免疫抑制剂及输注间充质干细胞(5×107/次,2次)后症状明显好转。结论非清髓性异基因外周血造血干细胞移植治疗低增生性MDS获得较好的疗效。     

酸洗脱血小板HLA-Ⅰ类抗原的研究

目的: 建立一种有效酸洗脱血小板表面HLA-Ⅰ类抗原的方法,评估最适的酸洗脱条件以及这一技术临床应用的可行性。方法: 血小板用不同pH值(pH=2、3、5、7)的柠檬酸缓冲液在0 ℃进行酸洗脱,多色流式细胞技术检测血小板表面HLA-Ⅰ类抗原及P-选择素(CD62P)的表达,Annexin V染色检测血小板的早期凋亡,电阻法检测血小板的最大聚集率。结果: 随着柠檬酸缓冲液pH值的降低(从pH=7到pH=2),血小板表面HLA-Ⅰ类抗原的表达显著减少,但同时血小板的活化率(CD62P表达)和早期凋亡率(Annexin V表达)均显著增加。相对PBS处理,利用pH=3的柠檬酸缓冲液处理血小板可显著减少血小板表面HLA-Ⅰ类抗原的表达(P<0.05),尽管血小板活化率和早期凋亡率均显著增加(均P<0.05),但其聚集功能未受显著影响(P>0.05)。结论: 利用pH=3的柠檬酸缓冲液0 ℃洗脱血小板HLA-I类抗原可作为预防血小板输注无效的方法进行尝试。这项酸处理技术在临床应用前尚需进一步改进和标准化。     

索拉非尼诱导K562细胞凋亡机制的研究

目的：观察索拉非尼对BCR-ABL阳性细胞株K562的增殖、凋亡作用,探索多靶点抗肿瘤药物索拉非尼诱导K562细胞凋亡可能机制。方法： CCK-8法观察索拉非尼作用48小时后K562细胞增殖活力变化;AnnexinV/PI双染法索拉非尼对K562细胞株的早期凋亡诱导作用;PI单染法观察索拉非尼对K562细胞株晚期凋亡诱导作用。Hochest33342染色法观察索拉非尼所致K562细胞凋亡形态学变化。免疫印迹法（Western blotting）检测凋亡相关蛋白PARP变化。结果：索拉非尼以浓度依赖的方式抑制K562细胞株增殖、诱导细胞凋亡,凋亡相关蛋白PARP剪切。结论：PARP剪切为执行凋亡功能的casepase途径活化的一个标记,提示索拉非尼诱导K562细胞凋亡的机制同caspase级联反应活化有关,多靶点抗肿瘤药物索拉非尼用于治疗CML及伊马替尼耐药的CML具有潜在的应用前景。     

RNA干扰在白血病基因治疗中的应用前景

RNA干扰(RNAi)作为一种进化保守的转录后基因沉默机制,是指双链RNA分子(dsRNA)被切割成21～23个核苷酸的小干扰RNA(siRNA),最终使其同源的mRNA特异性降解.RNAi现广泛用于多个生物体的功能基因组学研究,以及在基因表达异常导致的多种疾病的临床前模型中进行干预治疗.大约50%的白血病伴有异常基因的表达,利用RNAi肿瘤特异性基因靶向治疗为治疗白血病提供了一条新途径.随着siRNA在活体中的稳定性和转染效率的提高、非特异性作用的减少,正迅速应用于临床中.     

Castleman病8例临床分析

目的探讨Castleman病的临床特征、实验室检查特点及治疗方案。方法回顾性分析8例Castleman病的临床表现、实验室检查、治疗及疗效评价。结果 8例患者中4例首发症状有乏力,3例有低蛋白血症,3例有蛋白尿或者肾损害,2例有感染,1例有肌损害。3例确诊为透明血管型,3例为浆细胞型,2例为混合细胞型。病理学提示淋巴结结构保持完整,滤泡增生明显,血管增生。结论 Castleman病临床表现无特异性,其诊断和分型主要依靠组织病理学,手术、化疗、放疗及生物治疗等多种方法可应用于该病的治疗。     

环孢菌素对再生障碍性贫血、先天性和获得性纯红细胞再生障碍性贫血的治疗

环孢菌素是真菌的代谢产物,是一种环状十一肽结构物,对 T 细胞的增殖及功能有特异性作用。其主要作用是抑制 T_1 淋巴细胞产生白细胞介素2(IL-2)和γ-干扰素,并能阻止 IL-2对 T 杀伤细胞的活化,但不影响 T 细胞产生粒-巨噬集落刺激因子。如果 T 细胞在再生障碍性贫血(再障)发病机理中发挥重要作用。那么环孢菌素对 T 细胞增殖及淋巴因子产生的影响有利于部份骨髓衰竭病人的临床改善。27例重型再障、9例先天性纯红再障和3例获得     

Castleman病8例临床分析

目的探讨Castleman病的临床特征、实验室检查特点及治疗方案。方法回顾性分析8例Castleman病的临床表现、实验室检查、治疗及疗效评价。结果 8例患者中4例首发症状有乏力,3例有低蛋白血症,3例有蛋白尿或者肾损害,2例有感染,1例有肌损害。3例确诊为透明血管型,3例为浆细胞型,2例为混合细胞型。病理学提示淋巴结结构保持完整,滤泡增生明显,血管增生。结论 Castleman病临床表现无特异性,其诊断和分型主要依靠组织病理学,手术、化疗、放疗及生物治疗等多种方法可应用于该病的治疗。     

自体血液回收技术在肝移植术中的应用研究

目的了解自体血液回收技术在肝移植术中的应用价值.方法随机选取术中采用自体血液回收技术的的肝移植患者20例,观察术中出血量和经血液回收机处理后的浓缩红细胞量,以及自体血回输前后患者的血红蛋白量(HB)、红细胞计数(RBC)、血小板计数(PLT)、红细胞压积(Hct)、凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT)、血浆纤维蛋白原(Fib)、血小板计数(Plt)、有无输血反应等.结果20例患者共回收血22952ml,平均每例1148ml.采用自体血回输后,HB、HCT、RBC均明显回升; PT、APTT、Fib、Plt等凝血指标均异常且无明显变化.所有患者无输血反应.结论自体血液回收技术能有效减少术中血液丢失,血液回输后效果良好,无输血不良反应.它能缓解血源不足,避免输异体血带来的危害,值得临床推广和应用.     

MA方案治疗难治性复发性急性非淋巴细胞白血病临床观察

目的探讨难治性复发性急性非淋巴细胞白血病的治疗.方法应用MA(米托蒽醌+阿糖胞苷)方案治疗12例难治性复发性急性非淋巴细胞白血病.结果临床和血液学完全缓解(CR)5例(42%),部分缓解(PR)3例(25%),总有效率67%.结论 MA方案治疗难治性复发性急性非淋巴细胞白血病疗效确切.