褪黑素通过上调泛醌―细胞色素C还原酶核心蛋白1抑制MPP+诱导的MN9D细胞凋亡和线粒体损伤

目的 探讨褪黑素（melatonin,MT）在1-甲基-4-苯基-吡啶离子（1-methyl-4-phenylpyridinium ion,MPP⁺）诱导的帕金森病体外模型中的作用及分子机制。方法 将MN9D细胞分为对照组、MPP⁺组、MT组、治疗组。采用细胞计数试剂盒8检测MT和MPP⁺对细胞活力的影响;采用线粒体膜电位检测试剂盒（JC-1）评价线粒体功能;Hoechst/PI双染法检测细胞凋亡;通过免疫荧光蛋白质印迹法（Western blotting）检测凋亡相关蛋白［Cleaved-Caspase 3和细胞色素C（cytochrome C,CytC）］以及泛醌―细胞色素C还原酶核心蛋白1（ubiquinol-cytochrome C reductase core protein 1,UQCRC1）蛋白的表达;采用干扰RNA技术沉默MN9D细胞中UQCRC1的表达,然后采用Western blotting检测凋亡相关蛋白表达。结果 MT可以减轻MPP⁺诱导的细胞活力下降（P<0.05）;恢复MPP⁺造成的线粒体膜电位下降（P<0.05）;减少MPP⁺诱导的凋亡细胞数量（P<0.05）;抑制凋亡蛋白（CytC和Cleaved-Caspase3）的表达（P<0.05）;上调UQCRC1的表达（P<0.05）。沉默UQCRC1后,MT组和治疗组的UQCRC1表达均下降（P<0.05）;MT对MPP⁺诱导细胞凋亡的保护作用下降（P<0.05）;凋亡蛋白（CytC和Cleaved-Caspase3）的表达增加（P<0.05）。结论 MT对 MPP⁺诱导的多巴胺能神经元损伤具有保护作用,其机制可能是通过上调UQCRC1抑制神经元凋亡。 [国际神经病学神经外科学杂志, 2023, 50(3): 26-31]