重症急性胰腺炎大鼠脑损伤的实验研究

目的 探讨肿瘤坏死因子α（TNF-α），白介素6（IL-6）对重症急性胰腺炎（SAP）大鼠脑损伤的作用。方法 以5％牛磺胆酸钠胰胆管注射（1ml／kg）制成大鼠急性胰腺炎模型，分析大鼠脑脊液内TNF-α和IL-6含量、脑组织含水量、脑电图及脑组织病理改变。结果 SAP大鼠脑脊液内TNF-α、IL-6显著升高，脑组织含水量显著升高（P〈0．05），脑电图呈尖慢波和三相波改变，神经细胞出现水肿和核固缩。结论 TNF-α、IL-6参与了SAP大鼠脑损伤的病理过程。     

ITISC法获取基因修饰原代肝细胞的研究

目的以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因为标记基因,探索一种高效获取基因修饰原代工程肝细胞(GMPEH)的新方法。方法W istar大鼠70%切肝建立肝再生模型,术后24 h肝隔离门静脉注射脂质体-质粒DNA复合物(lipofectam ine-pEGFP-N1 DNA comp lexes,lipop lexes)转绿色荧光蛋白(GFP)基因至肝细胞,对照组注射生理盐水(NS)。转染后15 d(分2组,每组5只:切肝并于门静脉注射lipop lexes组,L;切肝并于门静脉注射NS组,N)均以胶原酶消化、Percoll液梯离心法获取纯化肝细胞悬液;以NS组为对照并以GFP为荧光标记物,用流式细胞仪(FCM)分析实验组肝细胞的转染率。结果FCM分析L组的平均转染率(%)为(3.40±2.09)%。结论肝再生模型L ipop lex门静脉途径灌注转染,可获得稳定的EGFP表达率。ITISC法获取GMPEH是一种高效,可行的新方法。     

术后肝再生进程中肝细胞脂肪聚积相关性基因的筛查分析

目的观察肝部分切除术(PH)后肝再生过程中肝细胞一过性脂肪聚积相关性基因的表达谱。方法小鼠随机分为70%PH组(按术后时间分为0-72 h时相小组,每小组5只)和假手术组(分组同前)。不同时相点获取的肝组织分别实施油红O染色的肝细胞脂聚积分析和RNA制备。用cDNA微阵列法筛查并用实时RT-PCR确认PH组和假手术组各时相点(0～24 h)生脂基因的诱导表达情况。结果与假手术组和手术组0 h等时相点比较,PH后的12 h和24h时相点的油红O染色明显增强。经cDNA微阵列筛查并经实时RT-PCR独立确认的、仅在PH后6 h和或12 h时相点诱导表达的生脂基因有:Adipsin、AP2、S3-12和FSP27。结论术后肝再生过程中,肝细胞在聚积大量脂肪之前启动了一个与脂肪聚积相关的生脂基因表达程序。     

巨大肝癌的外科治疗分析(附72例报告)

目的探讨外科治疗巨大肝癌的可行性及其方法。方法回顾性分析72例巨大肝癌的临床资料,并对外科治疗中遇到的主要困难和相应的对策进行分析总结。结果72例肝癌中合并门静脉、肝静脉、IVC及胆管癌栓分别为11例、1例、1例和4例。合并乙肝肝硬化68例,丙肝肝硬化和无肝硬化各2例。72例中行Ⅰ期和Ⅱ期肝切除术分别为48例和24例;其中规则性右半肝和左半肝切除术分别为10例和15例、联合肝段切除术47例。术前PVE 6例;全肝、患侧半肝血流阻断切肝术分别为5例和8例。术中行门静脉、肝静脉、IVC及胆管癌栓取出术分别为11例、1例、1例和4例。72例中治愈69例(占95.8%);围手术期死亡3例(占4.2%)。术后1年生存率达76.4%(55/72)。结论巨大肝癌的手术治疗是安全可行的。充分评估和正确应对外科治疗过程中的主要困难是取得成功的关键。     

肝部分切除术对大鼠门静脉途径肝细胞转基因效率的影响

目的 :探讨肝部分切除术对大鼠肝细胞门静脉途径转基因效率的影响。方法 :Wistar大鼠分 4组 ,每组 5只 :A1组 :30 %切肝并于门静脉注射脂质体—质粒 DNA混合物 (lipofectamine- p EGFP- N1DNA complexes,lipoplexes) ;A2组 :30 %切肝并于门静脉注射生理盐水 (NS) ;B1组 :70 %切肝并于门静脉注射 lipoplexes;B2组 :70 %切肝并于门静脉注射 NS。转染后 15 d均以胶原酶消化、Percoll液梯度离心法获取纯化肝细胞悬液 ;以 NS组为对照并以 GFP为荧光标记物 ,用流式细胞仪 (flow cytometry,FCM)分析各实验组肝细胞的转染率。结果 :A1组和 B1组的平均转染率分别为 :(1.12± 0 .5 0 ) %、(3.91± 1.6 8) % ;B1组明显高于 A1组 (P<0 .0 5 )。结论 :与 30 %肝部分切除术相比 ,70%切肝可显著提高大鼠肝细胞门静脉途径转基因的效率     

胆管内梗阻型原发性肝细胞癌36例临床分析

目的　探讨胆管内梗阻型原发性肝细胞癌 (简称梗阻型肝癌 )的诊治方法。方法　回顾性分析 36例病人的临床资料并将其分成两组 :胆管探查“T”管引流组 (简称引流组 ) 18例 ;一期或分期肝切除组 (简称肝切除组 ) 18例。计算两组术后平均生存时间并进行统计学分析。结果　 36例胆管内均发现栓子 ,病理学检查报告均为肝细胞癌栓。引流组、肝切除组的术后平均生存时间 (月 )分别为 (6± 5 )个月、(15± 13)个月 (P <0 0 5 )。结论　黄疸不一定是梗阻型肝癌的晚期表现 ,也不一定是手术禁忌证 ,一期或分期肝切除术常可获得较长术后生存时间。胆管内栓子的病理学检查是确诊的关键。     

AFP增强子驱动的HSV-TK/GCV自杀基因系统对肝癌细胞杀伤的实验研究

目的 探讨人AFP增强子驱动的单纯疱疹病毒胸苷激酶/丙氧鸟苷(HSV-TK/GCV)自杀基因系统体外靶向杀伤肝癌细胞效应.方法 构建人AFP增强子驱动的pAFP-CDNA3.1-TK自杀基因真核表达质粒,脂质体转染肝癌细胞,检测TK mRNA和蛋白表达.MTT法检测GCV对肝癌细胞的杀伤作用.结果 成功构建pAFP-CDNA3.1-TK自杀基因真核表达质粒,在AFP阳性HepG2细胞中检测到TK mRNA和蛋白表达,添加GCV 可特异性地杀伤HepG2细胞,而AFP阴性的SMMC7721细胞生长不受影响.结论 AFP增强子驱动的TK/GCV自杀基因系统可以靶向杀伤AFP阳性肝癌细胞.     

改良背驮式肝移植的术式选择

目的 探讨背驮式肝移植手术的术式改良.方法 结合文献介绍之术式,对几种改良术式进行评价.结果 改良背驮式肝移植术式在病肝切除时间、肝流出道重建时间、无肝期及术中出血量等指标上,优于传统背驮式肝移植术;4种改良背驮式肝移植术式中,3种不保留肝静脉干的吻合术式优于保留肝静脉干的吻合术式.结论 供受体下腔静脉吻合的改良背驮式肝移植应为背驮式肝移植的首选术式.     

急性胆囊炎腹腔镜切除术中腹腔引流的指征及其评价

目的 探讨急性胆囊炎腹腔镜切除术(LC)中腹腔引流的放置指征及其作用。方法 回顾性分析426例急性胆囊炎LC的病历资料及腹腔引流的应用情况。结果 426例LC中，148例放置腹腔引流(引流组)，278例未放置腹腔引流(非引流组)。引流组有12例术后并发胆漏，其中1例于术后早期经再手术证实为胆囊管钛夹脱落所致，其余11例均经充分引流而治愈。非引流组术后有3例并发腹腔积液，1例并发腹腔脓肿，均在LC1周后经再手术引流治愈。结论 腹腔引流可及早发现甚至治愈急性胆囊炎LC的并发症；适当放宽其指征是必要的。     

RNA干扰对肝癌细胞乙酰肝素酶表达的影响

目的 观察RNA干扰(RNAi)对肝癌细胞株Hepal-6中乙酰肝素酶(HPSE)表达的抑制作用.方法 设计针对小鼠肝癌细胞Hepal-6 HPSE mRNA的小干扰RNA(siRNA),以阳离子脂质体LipofectamineTM 2000包埋后转染该细胞株,转染48 h后,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测Hepal-6细胞HPSE mRNA及蛋白质表达的变化.结果 siRNA各组与正常对照组和阴性对照组比较,HPSE mRNA和蛋白质的表达均受明显抑制(P<0.01),并且呈剂量依赖性.结论 HPSE siRNA可显著抑制小鼠肝癌细胞Hepal-6中HPSE mRNA和蛋白质的表达.