新风胶囊通过miR-23a-3p/PTEN/PI3K/AKT/mTOR抑制骨关节炎CD4+T与软骨细胞共培养的免疫炎症

目的 观察新风胶囊（XFC）含药血清通过调控miR-23a-3p /PTEN/PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制骨关节炎（OA）CD4+T与软骨细胞共培养中免疫炎症反应的作用机制。方法 选取30例OA患者（OA组）及30例正常人（NC组）检测miR-23a-3p、10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因（PTEN）、磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B（AKT）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）的表达,观察临床指标：红细胞沉降率（ESR）、超敏C反应蛋白（hs-CRP）、IgA、IgG、IgM、补体 C3、补体C4的表达,并观察通路与临床指标的相关性。观察 30 例 OA 患者经 XFC 治疗后通路及临床指标的变化。分离及提取 OA-CD4 +T 细胞,transwell小室培养OA-CD4+T细胞与OA-CH,SD大鼠给药灌胃制备XFC含药血清;采用CCK8法检测OA-软骨细胞的细胞增殖;双荧光素酶报告实验分析miR-23a-3p和PTEN的靶向关系;RT-PCR技术检测共培养细胞中miR-23a-3p、PTENmRNA、PI3KmRNA、AKTmRNA、mTORmRNA 的表达;采用 ELISA 法检测 IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α的水平;Western blotting 检测PTEN、PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR蛋白表达。结果 与NC组相比,OA组miR-23a-3p、PTEN、PI3K、AKT、IL-1β、IL-6、TNF-α表达显著上调,而PTEN、IL-10表达显著下调（P<0.01）;相关性分析表明：miR-23a-3p与IL-6呈正相关（P<0.01）,PI3K与IL-10呈正相关,mTOR与IL-6、IL-10、补体C3、补体C4呈正相关（P<0.01或P<0.05）;加入XFC含药血清,miR-23a-3p及PI3K/AKT/mTOR通路被抑制,L-1β、IL-6、TNF-α表达水平下降、IL-10表达水平升高（P<0.01）;Model组miR-23a-3p、PI3K、AKT、mTOR、IL-1β、IL-6和TNF-α表达水平升高,PTEN、IL-10表达水平降低（P<0.01）;miR-23a-3p经过表达后,miR-23a-3p、PI3K、AKT、mTOR、IL-1β、IL-6和TNF-α表达水平显著升高,PTEN、IL-10表达水平显著降低（P<0.01或P<0.05）;XFC组IL-1β、IL-6、TNF-α表达降低,IL-10表达升高,miR-23a-3p、PI3K、AKT、mTOR表达下调,PTEN表达上调（P<0.01或P<0.05）。结论 XFC可通过下调miR-23a-3p的表达,抑制PTEN/PI3K/AKT/mTOR通路的活化,改善IL-1β、IL-6,IL-10和TNF-α的表达,降低OA患者炎症反应。     

急性痛风性关节炎患者感受的变化与免疫、炎症、代谢指标相关性研究

目的:探讨急性痛风性关节炎患者感受的变化与免疫、炎症、代谢指标相关性。方法:将57例急性痛风性关节炎患者采用调查问卷的方式,获得生活质量量表SF-36、Bath功能指数(BASFI)、Bath整体指数(BAS-G)、焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)各项积分,统计患者生活质量各维度积分,同时分析患者的生活质量各维度积分[生理机能(PF)、生理职能(RP)、躯体疼痛(BP)、一般健康状况(GH)、活力(VT)、社会功能(SF)、情感职能(RE),以及精神健康(MH)]与SF-36、视觉模拟评分法(VAS)评分、SAS积分、SDS积分和实验室指标[免疫球蛋白(IgA、IgM、IgG)、红细胞沉降率(ESR)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、尿酸(UA)、低密度脂蛋白(LDL)、同型半胱氨酸(Hcy)等]的相关性。结果:①PF与hs-CRP呈负相关(P<0.01),与TG、UA、Hcy、SDS呈正相关(P<0.05);BP与TG、UA、Hcy、SDS呈正相关(P<0.05),与hs-CRP呈负相关(P<0.05);GH与TG呈正相关(P<0.05);VT与TG呈正相关(P<0.05);SF与TG呈正相关(P<0.01);RE与TG呈正相关(P<0.05);生活质量各维度与其他指标无相关性(P ﹥ 0.05)。②SAS升高与hs-CRP、ESR、LDL升高有明显关联性;SDS升高与TC、ESR、UA升高有明显关联性。结论:患者生活质量显著下降与疾病的活动、躯体的疼痛、生理功能的受限、焦虑抑郁的情绪、免疫、炎性反应、代谢关系密切,其中与代谢尤为密切,对提高患者生活质量提供了数据上的支持。     

基于关联规则研究五味温通除痹胶囊对类风湿关节炎寒湿证患者的影响

目的:研究五味温通除痹胶囊对类风湿关节炎寒湿证患者免疫炎症指标的影响。方法:整理2018年12月至2019年6月安徽中医药大学第一附属医院类风湿关节炎寒湿证住院患者的病例资料。根据是否使用五味温通除痹胶囊将患者分为治疗组(五味温通除痹胶囊+中药)73例,对照组(单纯中药)317例。分析患者的免疫及炎症指标。结果:①2组患者在性别、年龄方面比较,差异无统计学意义(P>0.05)。②治疗后,2组超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、类风湿因子(RF)等指标均降低(P<0.05);而治疗组在改善hs-CRP、抗环瓜氨酸肽抗体、免疫球蛋白M方面优于对照组(P<0.05)。③关联规则分析显示,hs-CRP、RF、补体C3等指标的改善均与五味温通除痹胶囊有较强关联,且联合丹参、桂枝等中药指标的改善明显优于单纯中成药。结论:五味温通除痹胶囊能有效改善类风湿关节炎寒湿证患者免疫炎症指标,且联合中药内服与指标的改善存在明显关联关系。     

青藤碱治疗气阴两虚型类风湿关节炎的效果及对MyD88依赖性信号通路的影响

目的探讨青藤碱治疗气阴两虚型类风湿关节炎的效果,以及对髓样分化因子88(MyD88)依赖性信号通路的影响。方法选取2019年4—12月收治的88例气阴两虚型类风湿关节炎为研究对象,根据治疗方法不同分为观察组和对照组,每组44例。对照组雷公藤多苷和甲氨蝶呤治疗,观察组在对照组基础上联合青藤碱,均治疗3个月。比较两组临床疗效,治疗前后欧洲抗风湿联盟干燥综合征患者报告指数(ESSPRI)、欧洲抗风湿病联盟干燥综合征疾病活动指数(ESSDAI)、视觉模拟量表(VAS)评分、临床症状改善情况、IgG、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-17(IL-17)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α),以及外周血细胞MyD88依赖性信号通路相关蛋白mRNA表达。结果治疗后,两组ESSPRI、ESSDAI、肿胀关节数、压痛关节数、压痛评分、肿胀评分、IgG、CRP、IL-17、IL-6、TNF-α,以及MyD88依赖性信号通路相关蛋白mRNA表达均较治疗前降低,且观察组低于对照组(P<0.05)。治疗1、2、3个月后,两组VAS评分较治疗前降低,且观察组低于对照组(P<0.05)。两组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论青藤碱治疗气阴两虚型类风湿关节炎的临床效果显著,可抑制MyD88依赖性信号通路,减轻炎症反应,从而改善症状,且安全性良好。     

基于“腰为肾之府”理论运用按穴擦腰法治疗腰椎间盘突出症的临床观察

目的：观察基于“腰为肾之府”理论运用按穴擦腰法治疗腰椎间盘突出症（Lumbar disc herniation，LDH）的临床疗效，阐述肾虚与腰腿痛之间的病机内涵，倡导通过温补肾气治疗腰椎间盘突出症的推拿手法。方法：将腰椎间盘突出症患者随机分为对照组和治疗组。对照组采用俯卧位腰椎拔伸法治疗，治疗组采用按穴擦腰法治疗。结果：治疗组总体临床疗效、腰部JOA评分和VAS评分均优于对照组（P < 0.05）。结论：以按穴擦腰手法治疗腰突症是“腰为肾之府”理论指导临床治疗的具体体现，其疗效较腰椎拔伸法更为显著，同时也更为舒适安全，其作用机制可能通过调节机体免疫系统而达到“补肾止痛”的效果，值得临床推广运用和深入研究。     

程氏蠲痹汤通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号轴促进类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的自噬

目的 研究程氏蠲痹汤（JBT）通过PI3K/Akt/mTOR信号轴调控类风湿关节炎滑膜成纤维细胞（RA-FLS）自噬的影响及相关机制。方法 实验分为4组：FLS组、FLS+JBT组、FLS+RAPA组、FLS+RAPA+JBT组。CCK8检测程氏蠲痹汤抑制RA-FLS的最佳浓度和时间,透射电镜观察细胞自噬小体的变化,自噬双标腺病毒实验观察细胞内自噬体、自噬溶酶体数量,RT-qPCR和Western blot检测相关指标表达水平。结果 CCK8实验筛选结果表明JBT冻干粉浓度在0.5 mg/mL,培养12 h效果最佳。电镜结果与自噬双标腺病毒实验结果趋势相同,FLS组中自噬体少量存在,JBT加入能显著增加自噬体,自噬溶酶体较少。RT-qPCR结果显示,FLS+RAPA+JBT组较FLS组、FLS+JBT组、FLS+RAPA组相比,PI3K、Akt和mTOR的mRNA水平降低更明显（P<0.01）。WB分析显示,FLS+RAPA+JBT组较FLS组、FLS+JBT组、FLS+RAPA组相比,PI3K、Akt、mTOR蛋白的水平无明显差异（P>0.05）,p-PI3K、p-Akt、p-mTOR、P62受到了明显抑制（P<0.05）。FLS+RAPA+JBT组较FLS组、FLS+JBT组、FLS+RAPA组相比,Beclin-1、LC3B蛋白表达量明显上升（P<0.05）。结论 程氏蠲痹汤可抑制RA-FLS的存活率,并可提高细胞自噬水平,其机制可能与下调PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。     

基于数据挖掘分析中医健脾单元疗法对痛风患者代谢指标的影响及其干预研究

目的运用随机行走模型评价中医健脾单元疗法对痛风(Gout)患者代谢指标的影响。方法利用安徽中医药大学第一附属医院住院病历数据处理系统采集患者信息,研究其代谢指标:同型半胱氨酸(Hcy)与尿酸(UA)。收集并整理该院风湿免疫科2012年6月至2018年12月Gout住院患者。依据是否使用黄芩清热除痹胶囊分为单元疗法组和单纯中药组,利用随机行走模型和关联规则评价中医健脾单元疗法对Gout患者Hcy和UA影响。结果①共纳入274例Gout患者符合研究要求,单纯中药组为106例(38. 69%),单元疗法组168例(61. 31%)。基于四性和五味的中医理论,其中寒性草药(出现110次,37. 7%),温性(出现89次,30. 5%)和凉性的(出现18次,6. 2%)是使用频率排名前三的草药。②经关联规则分析:在同样使用黄芩清热除痹胶囊情况下,Hcy降低与蒲公英、泽兰、泽泻、黄柏、威灵仙、车前草升高呈关联,UA降低与山慈菇、川牛膝、泽泻、黄柏、车前草、桃仁、红花、丹参升高呈关联。③随机行走模型显示:单元疗法组UA临床意义在于UA每改善一步,需要行走7. 53步;而单纯中药组UA临床意义在于UA每改善一步,需要行走2. 06步。单元疗法组临床意义在于Hcy每改善一步,需要行走3. 39步。④聚类分析共聚为3类,聚1类有桃仁、红花、丹参、茯苓、陈皮、甘草、蒲公英;聚2类山药、白术、薏苡仁、垂盆草、泽兰、山慈菇、黄柏、车前草、泽泻、土茯苓、川牛膝、威灵仙;聚3类郁金。结论中医健脾单元疗法对患者炎性指标的改善效果优于单纯中药内服。中医健脾单元疗法治疗痛风有良好的效果。