利用cDNA微阵列进行宫颈鳞癌的分子筛查

目的使用cDNA微阵列筛选浸润性宫颈鳞癌的淋巴结转移相关基因。方法应用包含18 432个基因的cDNA微阵列测定IB期宫颈鳞癌的全基因序列,包括已知功能的人类转录子和表达序列标签ESTs,分为正常组、淋巴转移组、无淋巴转移三组宫颈组织。为了证实不同的基因表达,选择3个基因进行了冰冻组织的RT-PCR检测和石蜡组织的免疫组化检测。结果经统计学分析,与无淋巴转移浸润性宫颈鳞癌组织比较,有淋巴转移的癌组织有677个基因大于2倍差异,其中上调494个(72.97%),下调183个(27.03%),表达序列标签EST为61个(9.01%),这些基因涉及代谢、发育、信号传导、分化、DNA结合转录和离子通道等。6倍差异基因14个,其中只有nel(chicken)like-2下调,其余为上调基因。RT-PCR和免疫组化的结果与cDNA微阵列结果一致。结论利用cDNA微阵列检测基因的表达状态可以预测宫颈鳞癌淋巴结转移和宫颈癌的预后情况。Cx43的低表达、ETV5和整合素alpha 2的高表达可能会成为评估浸润性宫颈鳞癌恶性程度的重要指标。这些分子有利于预测浸润性宫颈鳞癌的预后及其相应的分子治疗。     

CD44v6 E-cad表达与早期宫颈鳞癌淋巴结转移的关系

目的研究CD44v6与E-钙黏附素(E-cad)在早期宫颈鳞癌中的表达,探讨其在淋巴结转移中的作用及临床意义。方法采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)与免疫组织化学法对21例正常宫颈上皮、63例无淋巴结转移宫颈鳞癌、23例有淋巴结转移宫颈鳞癌标本中CD44v6、E-cad的mRNA和蛋白表达进行检测。结果宫颈鳞癌组织中CD44v6mRNA的表达高,而在正常宫颈几乎不表达;E-cad的mRNA在正常宫颈组织表达高而在宫颈鳞癌表达低,有淋巴结转移和无淋巴结转移的宫颈鳞癌组织差异均有统计学意义(P<0.05)。CD44v6蛋白在宫颈鳞癌表达增高而E-cad蛋白表达降低,且在有转移和无转移的宫颈鳞癌组织中差异有统计学意义(P<0.05),且CD44v6和E-cad的表达与淋巴结转移相关(P<0.05)。结论CD44v6、E-cad通过改变早期宫颈鳞癌细胞的黏附力而分别发挥了促进和抑制宫颈鳞癌淋巴结转移的作用,可作为评估预后的生物学指标。     

Ki-67 Survivin与淋巴结转移及宫颈癌预后相关性分析

宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一,目前全球发病情况趋于年轻化,严重威胁女性健康。随着分子生物学的发展,人们还发现了越来越多的与预后相关的生物学指标[1],如凋亡途径相关基因、细胞增殖相关基因、肿瘤转移相关的基因以及与生存相关的基因等。反映肿瘤细胞增殖活性的指标很     

Ki67、Survivin在早期宫颈癌中的表达与预后相关性分析

目的探讨Ki67、Survivin在早期宫颈癌组织中的表达,且与术后生存期及淋巴结转移的关系;分析Ki67和Survivin的相关性。方法收集110例手术切除或活检标本,包括正常宫颈组织,宫颈癌组织(按5年存活率及有无淋巴结转移分组),进行免疫组织化学法检测Ki67、Survivin蛋白的表达。结果宫颈癌组织中Ki67的表达率为85%,明显高于正常宫颈组织,Ki67阳性表达与术后生存时间呈负相关(x2=5.7624,P0.05),与淋巴结转移呈正相关(x2=11.4820,P0.01);宫颈癌组织中Survivin表达率为80%,高于正常宫颈组织,Survivin阳性表达与术后生存时间呈负相关(x2=5.2410,P0.05),与淋巴结转移呈正相关(x2=10.0624,P0.01)。结论 Ki67、Survivin可作为反映宫颈癌预后生存期及淋巴结转移程度的指标。     

宫颈癌裸鼠模型的建立和应用进展

近年在临床基础上进行回顾性研究探讨宫颈癌相关病因、诊断指标及愈后的同时,日益重视建立动物模型进行前瞻性研究.宫颈癌裸鼠模型的建立为其侵袭转移机制的研究、治疗药物的筛选、治疗方法的选择提供了重要的手段和研究工具,为进一步改善宫颈癌患者的预后直至治愈开辟了广泛的研究途径.通过对模型的种类、制作方法和应用进行综述,提出了一些有待深入研究的问题.     

“宫瘀净”胶囊辅助药物流产的疗效观察

米非司酮 (Ｍｉｆｅｐｒｉｓｔｏｎｅ)配伍米索前列醇 (Ｍｉｓｏｐｒｏｓｔｏｌ)抗早孕是目前药物流产最常见的配伍方法 ,该法避免了人工流产手术给早孕妇女带来的痛苦和心理紧张及术后并发症 ,具有简便、安全、有效、无痛苦等优点[1] 。但存在 7%～ 10 %的不全流产率和失败率 ,以及流产后出血持续天数较长和出血量较多的问题[2 ,3] 。现代医学观察表明 :流产后阴道出血不止 ,主要是绒毛与蜕膜剥离不全、排出缓慢、宫缩无力、蜕膜残留宫内所致。中医认为流产如“生采断其根蒂 ,不可轻忽”。流产后阴道持续出血辨证为气血虚损、瘀血阻滞子宫…     

RNA干扰巨噬细胞移动抑制因子对宫颈癌Caski细胞上皮-间质转化的影响

目的通过RNA干扰技术研究巨噬细胞移动抑制因子(MIF)对宫颈癌Caski细胞上皮-间质转化(EMT)的影响作用。方法通过构建重组真核表达载体p Genesil-1-MIF si RNA,转染宫颈癌Caski细胞(Caski-p Genesil-MIF si RNA组),同时设空载体转染组(Caski-p Genesil-1组)和空白对照组(Caski组),采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测Caski细胞中MIF m RNA相对表达量的变化,并检测转染前后Caski细胞中EMT相关指标E-cadherin和Vimentin的表达变化。结果 p Genesil-1-MIF si RNA转染Caski细胞后MIF m RNA的表达量减少,低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);RNA干扰抑制MIF基因表达后,与对照组相比,p Genesil-1-MIF si RNA组Caski细胞上皮标记物E-cadherin m RNA及蛋白表达水平上调(P<0.05),间叶标记物Vimentin m RNA及蛋白表达水平显著下调(P<0.05)。结论抑制MIF基因表达可抑制宫颈癌Caski细胞发生EMT的能力。     

人宫颈癌发生中p16INK4A表达缺陷与其外显子甲基化的关系

目的 研究抑癌基因p16INK4A在宫颈癌发生中的表达变化，分析这种差异表达与甲基化的关系。方法 逆转录聚合酶链技术（RT．P（1R）检测30例宫颈癌组织标本、48例宫颈上皮内瘤样病变（CIN）组织（CIN Ⅰ12例、CINⅡ16例、CINⅢ20例）中p16INK4A基因的表达。Western Blot分析P16INK4A蛋白水平的表达。甲基化特异性的PCR技术（MSP）对p16INK4A DNA进行甲基化分析。以每例标本相应正常宫颈组织作为对照。结果 70％（21／30）宫颈癌组织中p16INK4A表达下降或缺失，与正常宫颈组织、CIN Ⅰ和CINⅡ中的p16INK4A表达相比，差异具有统计学意义（P〈0．05），与CIN Ⅲ相比差异无统计学意义（P〉0．05）。蛋白的表达检测也得到相似的结果。MsP检测发现宫颈癌组织中有9例p16INK4A外显子甲基化，甲基化率为30％，其中8例年龄小于40岁，提示甲基化易于出现在年轻患者。而CIN组织中仅CIN Ⅲ发现1例甲基化，说明甲基化随着宫颈病变的发展而增多。分析甲基化与p16INK4A表达的关系，发现42．86％（9／21）的宫颈癌组织中p16INK4A表达下降与甲基化有关，甲基化的宫颈癌组织中p16INK4A表达均下降。结论 p16INK4A作为一种抑癌基因，它的表达缺失或下降在宫颈癌的发生中起重要作用，外显子甲基化是导致其表达缺陷的部分原因。     

HE4与妇科肿瘤相关性的研究进展

人附睾蛋白4（HE4）是近年来新兴的肿瘤标记物,许多国内外学者对其进行了相关研究,其最早发现于人附睾上皮远端细胞中,具有抑制蛋白酶的功能,并表达于人体多个组织中。HE4在诊断卵巢癌特别是早期的卵巢癌中具有重要价值,可鉴别诊断卵巢良恶性肿瘤,并在肿瘤复发监测方面具有优越性。同时有研究证明HE4在子宫内膜癌的诊断、分期及预后方面具有指导意义。另外,HE4还可用于子宫内膜异位症、子宫腺肌病等妇科良性疾病的诊断及监测。一直以来我国采用美国推荐的HE4参考值作为诊断标准,缺乏针对我国人群的HE4参考值研究,鉴于此,中国健康人群HE4参考值多中心研究于2012年正式启动,通过对我国人群进行大样本研究,提供HE4参考值范围,这将更好地指导中国医生应用HE4结果进行临床诊疗,有效改善妇科肿瘤的临床管理。     

差异表达基因整合素a2白细胞介素-8Cx43在早期宫颈鳞癌中的表达及意义

目的 研究早期宫颈鳞癌差异表达基因整合素d2、白细胞介素-8（IL-8）和间隙连接蛋白43（Cx43）在宫颈鳞癌中的表达及其与淋巴结转移的关系，探讨其在宫颈鳞癌淋巴结转移中的作用机制。方法 采用反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）、组织芯片进行的免疫组织化学方法检测早期宫颈鳞癌组织中整合素d2、IL-8和Cx43mRNA及蛋白的表达。结果有淋巴结转移的早期宫颈鳞癌组织中整合素d2和IL-8的表达显著高于非转移组织（P〈0．05），CX43的表达则相反（P〈0．01）。且整合素d2和IL-8的表达呈正相关（r=0．241，P〈0．05）。结论整合素d2、IL-8和CX43与早期宫颈鳞癌的淋巴结转移密切相关，在一定程度上发挥了促进和抑制早期宫颈鳞癌淋巴结转移的作用。