尼美舒利人体血药浓度的RP-HPLC测定

报道了尼美舒利人体血药浓度的ＲＰ－ＨＰＬＣ测定法。采用Ｈｙｐｅｒｓｉｌ ＢＤＳ Ｃ１８不锈钢色谱柱，血浆样品经乙酸乙酯抽提处理后测定。方法线性范围０．２０～２５ｍｇ／Ｌ（ｒ＝０．９９９９），平均回收率为９２．３％～９９．４％，最低检测浓度为６０ｕｇ／Ｌ。     

硫嘌呤甲基转移酶分子机制研究进展

硫嘌呤甲基转移酶（TPMT）在硫嘌呤类药物的体内代谢中起着关键作用，其活性水平与药物效应及毒副作用密切相关。TPMT活性具有遗传多态性和种族差异。TPMT酶活性降低或缺乏与其基因突变密切相关。对TPMT遗传多态性分子基础的研究具有重要意义。本文综述有关TPMT基因表达调控和TPMT基因突变的分子机制的研究进展。     

高效液相色谱法测定人红细胞中巯基嘌呤甲基转移酶的活性

目的:建立一种改良的高效液相色谱法测定人红细胞中巯基嘌呤甲基转移酶(thiopurinemethyltransferase,TPMT)的活性。方法:采用反相高效液相色谱法直接测定酶促反应的产物6-甲基巯基嘌呤的浓度,从而计算红细胞中TPMT的活性。以6-巯基嘌呤为底物,S-腺苷-L-甲硫氨酸作为甲基供体,红细胞裂解液在一定的条件下进行孵化,然后经乙酸乙酯萃取处理后,用HPLC分析。色谱柱为hypersilBDSC18,流动相为水-甲醇-三乙胺(磷酸调至pH3.5)(76.8∶23∶0.2),紫外检测波长为290nm。结果:6-甲基巯基嘌呤在10～200μg/L范围内呈良好的线性关系,相关系数r=0.9994,最低检测限为3μg/L(S/N=3),平均回收率为86%～94%。我们运用该法测定了273例健康中国成年人红细胞中TPMT的活性,其平均活性为(11.96±3.27)nmol/h·mlPackedRBC,男性和女性的平均TPMT活性分别为(12.08±3.38)nmol/h·mlPackedRBC和(11.73±3.07)nmol/h·mlPackedRBC,两者无显著性差异。结论:本分析方法具有灵敏准确,重复性好,安全可靠,易于推广等特点,能满足巯基嘌呤类药物药代动力学研究和临床用药监测的要求。     

双氯芬酸钾的人体药代动力学特点研究

采用反相高效液相色谱法测定双氯芬酸钾盐的血浆药物浓度,通过与双氯芬酸钠比较,研究双氯芬酸钾粉剂在人体内药动学过程的特点。结果表明,双氯芬酸钾与双氯芬酸钠在吸收速度及程度方面相比,双氯芬酸钾有较稳定的吸收过程,Tmax及AUC值的个体差异较双氯芬酸钠小(变异系数小)。受试者口服双氯芬酸钠无明显双峰曲线现象。提示双氯芬酸钾的体内吸收过程较双氯芬酸钠有一定的优点。     

复方小柴胡汤调控microRNA抑制鼻咽癌细胞增殖

目的观察复方小柴胡汤（FFXCHT）对高分化鼻咽癌细胞CNE-1和低分化鼻咽癌细胞CNE-2增殖的抑制作用,探讨其调控CNE-2细胞microRNA的差异表达。方法通过磺基罗丹明B（SRB）法检测FFXCHT对CNE-1和CNE-2细胞增殖的影响;采用μParaflo^TM MicroRNA芯片检测,激光扫描器收集杂交的图像,经LOWESS滤器规范信号后比较数据,分析FFXCHT处理前后CNE-2细胞microRNA表达的差异。结果FFXCHT可抑制CNE-1和CNE-2细胞增殖,且呈剂量依赖性;FFXCHT处理CNE-1细胞24h、48h、72h,其IC50分别为12．23mg／mL,4．63mg／mL和4．97mg／mL;其对CNE-2细胞IC50分别为9．67mg／mL,4．33mg／mL,3．09mg／mL。microRNA芯片检测结果显示FFXCHT处理CNE-2细胞后,在检测的326个microRNA中,有10个microRNA上调,1个microRNA下调,其中检测量绝对值在1000以上且两者相差log2（Sample B signal／Sample A signal）〉1的microRNA有hsamiR-513、hsa-miR-498、hsa-miR-210和hsa—miR-602。结论该FFXCHT可抑制高低分化鼻咽癌细胞的增殖,其抑瘤作用可能与microRNA的差异表达有关。     

盐酸氟桂利唪胶囊的人体生物利用度研究

采用反相高效液相色谱法测定了12例健康志愿者自身交叉随机口服单剂量盐酸氟桂利嗪胶囊30mg和西比灵胶囊30mg后的血浆药物浓度。通过两者的比较,研究盐酸氟桂利嗪胶囊的人体相对生物利用度。结果表明,两胶囊的t_(max),C_(max)经方差分析检验均无显著性差异(P>0.05)。盐酸氟桂利嗪胶囊相对于西比灵胶囊的相对生物利用度为88.5％±15.5％,两胶囊的AUC及C_(max)用双向单侧t检验比较具有生物等效性。     

新型黑麦酮酸D衍生物D69抗乳腺癌活性研究

目的研究一种来源于海洋微生物次级代谢产物的新型黑麦酮酸D衍生物D69对人乳腺癌的体内外抑制活性,并初步探讨其分子机理。方法通过镜下观察以及MTT比色法检测D69的细胞毒作用,构建人乳腺癌裸鼠移植瘤模型研究D69体内抗肿瘤活性。结果 D69对人乳腺癌细胞系MDA-MB-435和ZR-75-30的生长具有显著的抑制作用,且呈剂量依赖性增强。其对MDA-MB-435和ZR-75-30细胞半数抑制浓度（IC50）分别为0.031μmol/L和0.036μmol/L,而对人永生化乳腺上皮细胞HMEC的抑制作用较低,IC50为0.686μmol/L。人乳腺癌裸鼠移植瘤模型验证D69能显著抑制在体肿瘤的生长。结论 D69可能是一种潜在的乳腺癌化疗药物的先导化合物。     

广东连南汉族和瑶族儿童硫嘌呤甲基转移酶研究

目的本文对硫嘌呤甲基转移酶(Thiopurine S-methyltransferase,TPMT)在广东连南地区健康汉族儿童(n=87)和瑶族儿童(n=1 26)中的活性分布和4种常见TPMT基因突变的等位基因频率进行研究.方法采用高效液相色谱法测定红细胞的TPMT活性;采用等位基因特异性的PCR(allelespecific PCR,ASPCR)方法和限制性片断长度多态性(PCR-restrictionfragmentlength polymorphism,RFLP)的方法检测TPMT*2(G238C)、TPMT*3A(A719G/G460A)、TPMT*3B(G460A)和TPMT*3C(A719G)的等位基因频率.结果健康汉族儿童和瑶族儿童的TPMT活性都呈正态分布,活性的平均值分别为13.01±2.80U.ml-1pRBC和13.54±3.89U.ml-1 pRBC,两者的差异无显著性.在健康汉族儿童中只找到1例TPMT*3C杂合子(该汉族儿童的TPMT活性为12.36U.ml-1 pRBC),没有找到TPMT*2、TPMT*3A和TPMT*3B,汉族儿童总的TPMT基因突变频率是0.6%.在健康瑶族儿童中没有找到这几种突变.结论广东连南地区汉族和瑶族儿童TPMT的活性分布和总的TPMT基因突变频率没有显著性差异.     

小鼠双光子激光扫描显微镜活体成像窗口构建技术

双光子显微成像技术以其组织器官穿透性深、光漂白及光毒性低等独特优势,成为小动物活体光学高分辨显微成像的重要工具;但是活体状态下,由于动物的呼吸、心跳以及一些组织非自主的蠕动等使观察视野无法固定,导致图像失焦,降低实验的可重复性。成像视窗以其支持原位、实时观察及长期成像等优势,已成为双光子活体成像的重要辅助手段之一。本文主要介绍了小鼠不同脏器活体成像固定装置的设计、成像视窗的构建方法以及成像窗口在实际应用中需注意的问题等,旨在为使用者提供更多的方法参考,解决活体成像图像稳定度低、清晰度差等问题,拓宽实验种类,提高观察深度和精度。     

反相高效液相色谱法测定人体血浆中表阿霉素的含量

采用反相高效液相色谱法(以柔红霉素为内标)测定血浆中表阿霉素的含量,流动相为5mmol/LH3PO4-甲醇-异丙醇-乙晴(6∶9∶7∶2,pH2.9),YWGC18不锈钢色谱柱,荧光检测波长λex=450nm,λem=530nm.血浆中样品经氯仿-甲醇-异丙醇=5∶2∶3抽提液抽提处理后进样测定.血浆中表阿霉素的浓度在0.03～2.4mg/L范围内峰面积与柔红霉素的峰面积之比呈线性关系(r=0.9998),方法对表阿霉素的平均回收率为89%～90.7%.最低检测浓度为0.01mg/L.本法灵敏度高,线性范围大,符合临床用药的血药浓度监测和药代动力学研究的分析方法要求,并用于40例已服用表阿霉素的癌症病人的血浆药物含量的测定.