HBV相关肝细胞癌患者核因子-κB异常情况及其临床意义

核因子-κB(NF-κB)是与免疫球蛋白κ轻链增强子B区结合,具有和某些基因上启动子区固定核苷酸序列结合而启动该基因转录的蛋白质,激活的NF-κB,在炎症相关性肝癌(HCC)中高表达,在肝细胞慢性炎症和癌变之间起桥梁作用[1].我们用酶联免疫吸附法(ELISA)及实时定量PCR法分析了人肝癌组织及肝病患者外周血中NF-κ B的表达,以探讨其在肝癌诊断、转移预测和鉴别诊断中的临床价值.     

肝癌组织中HIF-1α的表达与HIF-1α mRNA的扩增分析

目的分析肝癌组织中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）及其基因的表达。方法以自身配对法分别收集经手术切除患者的肝癌及癌周组织各35份,以免疫组化法检测肝癌及癌周组织HIF-1α的表达,从癌组织中制备总RNA、逆转录合成cDNA,以巢式PCR扩增HIF-1α基因片段和DNA测序分析,以探讨HIF-1α及其基因表达的病理特征。结果肝癌及癌周组织中HIF-1α阳性表达呈棕黄色颗粒状,主要定位于胞浆中,部分位于胞核;癌周组织表达较强,中央静脉周闹表达明显;癌周组织HIF-1α表达阳性率明显高于肝癌组织（P〈0.01）;癌周组织中总RNA浓度明显高于肝癌组织（P〈0.01）;肝癌和癌周组织HIF-1α基因阳性率分别为54.3％和74.3％（P〉0.05）;癌组织HIF-1α表达率与肿瘤大小相关,与肿瘤数目和HBsAg阳性间未见明显相关。结论肝癌的发生、发展与肝组织HIF-1α过表达密切相关。     

磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3的表达特征及其在肝癌诊断与鉴别诊断中的价值

目的 研究磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC-3)的表达特征及其在肝癌诊断与鉴别诊断中的临床价值.方法 制作鼠肝癌模型,并按病理组织检查结果分为正常组、肝细胞变性组(变性组)、癌前病变组(癌前组)和肝细胞癌组(癌变组).以Western blot和逆转录-聚合酶链反应分别观察GPC-3蛋白质及mRNA的动态表达;以自身配对法收集术后肝癌组织,根据其组织学类型分为肝癌组、癌旁组、远癌组,以免疫组织化学法分析GPC-3表达与病理学特征的关系;以酶联免疫吸附法定量分析肝病患者外周血GPC-3表达水平,并评价其诊断效率.多个样本均数比较用单因素方差分析,组间GPC-3的表达及病理学特征比较用单因素秩和检验,血清GPC-3比较用秩和检验,率的比较采用x2检验或Fisher's exact分析,以受试者工作特征曲线下面积比较GPC-3诊断肝癌的敏感性、特异性及诊断效率.结果 在鼠肝癌形成过程中,正常、变性、癌前和癌变组GPC-3阳性率分别为0(0/6)、83.3%(15/18)、100.0%(9/9)和100.0%(9/9).人肝癌组织GPC-3阳性呈棕黄色颗粒状染色,定位于胞质和细胞膜,肝癌、癌旁和远癌组的阳性率分别为80.6%、41.7%和0,肝癌组明显高于远癌组(x2=48.56,P＜0.01)和癌旁组(x2=11.455,P＜0.01);癌旁组明显高于远癌组(x2=18.94,P＜0.01).GPC-3表达与肿瘤分化程度和数目间未见明显相关,与瘤体大小有关(Z=2.941,P＜0.01).肝病患者血清GPC-3异常主要见于肝癌(52.8%,65/123),且在不同性别、年龄、甲胎蛋白水平、肿瘤数目、Child分级和肝外转移者间未见明显差异;但肝癌＜3.0cm组明显高于≥3.0cm组(x 2=6.318,P＜0.05); HBsAg阳性组明显高于阴性组(x 2=23.362,P＜0.01).GPC-3与甲胎蛋白(＞20 μg/L)联合诊断肝癌的敏感度、特异度、准确度、阳性预测值和阴性预测值分别为87.00%、79.66%、82.17%、69.03%和92.16%.结论 GPC-3表达与肝癌密切相关,其表达的检测有助于肝癌早期诊断和鉴别诊断.

Abstract：

Objective To investigate the expression features of glypican-3 (GPC-3)and its diagnostic and differential values in hepatocellular carcinoma (HCC). Methods Rat hepatoma models were made and the dynamic expression features of GPC-3 protein and its gene were investigated by Western blotting and RT-PCR respectively. Liver specimens from 36 HCC patients were collected by self-control method and the expression and clinicopathological features of GPC-3 were analyzed by immunohistochemistry. Serum GPC-3 levels were quantitatively detected by ELISA and its efficiency for HCC diagnosis was evaluated in patients with liver diseases. Results The incidence of GPC-3 was 0% in control, 83.3% in degeneration, 100% in precanceration and 100% in canceration during dynamic formation of rat hepatoma, respectively. The positive GPC-3 was brown granule-like staining localized in membrane and cytoplasm in human HCC.The GPC-3 positive rates were 80.6% in HCC, 41.7% in surrounding tissues and none in distal tissues (P＜0.01), respectively. No positive relationship presented between GPC-3 and differentiation grade or the number of minor except of rumor size (Z=2.941, P＜0.01). The incidence of serum GPC-3 was 52.8% in HCC patients except of one patient with cirrhosis. No significant differences were found between GPC-3 and sex, age, AFP, mm or number, Child classification or extrahepatic metastasis except of rumor size (x2 = 6.318, P＜0.05) and HBV infection (x2 = 23.362,P＜0.01). Combined detection of GPC-3 and AFP could rise up diagnosis of HCC. Conclusions GPC-3 expression closely associated with HCC and might be useful for early diagnosis of HCC.     

GPC-3异常表达、信号通路及肝癌的靶向治疗

磷脂酰肌醇蛋白多糖-3（glypican-3,GPC-3）在肝癌（HCC）发生中介导多种信号通路,对活化途径进行干预,可抑制HCC发生;它具有癌胚胎性蛋白特性,有望成为肝癌靶向治疗的目标。     

IGF-Ⅱ异常活化及Bcl-2过表达与肝细胞恶性转化关系的研究

目的观察胰岛素样生长因子Ⅱ（IGF-Ⅱ）及B细胞淋巴瘤因子-2（Bcl-2）在肝细胞癌变过程中的动态表达及变化特点。方法以2-乙酰氨基芴（2-FAA）喂饲雄性SD鼠诱发肝癌发生,分析肝细胞病理形态学改变,以免疫组织化学法观察鼠肝细胞IGF-Ⅱ和Bcl-2的表达与定位,并定量分析肝IGF-Ⅱ和Bcl-2蛋白水平变化。结果诱癌过程中肝细胞出现颗粒样变性、不典型增生到HCC的形成过程中IGF-Ⅱ呈梯度表达,表现为癌变组明显高于对照组和变性组（P〈0.01）,癌变过程中IGF-Ⅱ和Bcl-2呈阳性表达和胞内分布,肝IGF-Ⅱ与Bcl-2呈显著正相关,癌变组明显高于变性组和正常对照组（P〈0.01）。结论IGF-Ⅱ异常活化和Bcl-2过表达均参与肝细胞的癌变过程,对它们的分析有助于肝癌的早期诊断和肝癌发展的监测。     

肝细胞癌变过程中血管内皮生长因子的表达变化

目的：观察肝细胞癌变过程中血管内皮生长因子（VEGF）的动态改变及相互关系。方法：以含0.05%2-乙酰氨基芴（2-FAA）颗粒饲料连续喂饲雄性SD大鼠12周诱发肝细胞癌变,在此过程中以免疫组织化学法、Western blot技术及酶联免疫吸附法（ELISA）观察VEGF的表达特征及其相互关系。结果：组织学证实SD大鼠在喂饲2-FAA后,肝细胞出现颗粒样变性、不典型增生及肝细胞癌（HCC）的变化;肝细胞中VEGF呈粽色阳性颗粒,主要存在于细胞浆,偶见于细胞核;癌变过程中VEGF表达率和VEGF/β-actin比率分别为：对照组25%和0.16±0.02、肝细胞变性组88.9%和0.29±0.04、癌前病变组100%和0.52±0.03及癌变组100%和0.84±0.02;VEGF表达在蛋白水平均随着病理组织学的改变呈梯度增加,表现为癌变组明显高于对照组和肝细胞变性组（P〈0.05）;肝癌中VEGF在肝细胞内呈强阳性表达;肝组织与血清VEGF的动态改变呈显著正相关关系（r=0.785,t=8.00,P〈0.01）。结论：VEGF表达异常与肝癌的发生发展有关,其表达增加有助于肝癌早期诊断,也是肝癌治疗的分子靶目标。     

缺氧诱导因子-1基因与肝癌靶向治疗

肝细胞肝癌(HCC)是血供丰富的恶性肿瘤,由病毒、化学致癌物等多种病因作用.经癌或癌相关基因激活、抑癌基因失活或胚胎期某些癌基因重新复活等诸多因素引起肝细胞生长失控而致癌变,经历启动、促进、演变多阶段发病过程,其中基因调控和表达,与肝癌发生、发展及多种细胞因子等密切相关.     

卡培他滨联合顺铂一线治疗HER2阴性的晚期胃癌后卡培他滨维持的疗效及安全性

目的:研究卡培他滨联合顺铂(XP方案)一线治疗HER2阴性的晚期胃癌后给予卡培他滨维持化疗的疗效及安全性.方法:82例初治的HER2阴性的晚期胃癌患者一线方案采用XP方案.每2周期化疗后进行疗效评价.最多6个周期化疗后疗效评价为无疾病进展的患者共59例,随机分为两组(A,B组),A组(n=30)给予卡培他滨单药维持化疗(1000 mg/m2,2次/d,d1～14,3周为1周期),持续至疾病进展或患者出现不能耐受的毒副作用为止.B组(n=29)仅接受定期随访观察.结果:82例患者共接收416周期的初始化疗,经初始化疗后均可评价疗效,总有效率(response rate,RR)为48.78％,疾病控制率(disease control rate,DCR)为71.95％.A组RR和DCR分别为26.67％,76.67％,均高于B组(RR和DCR分别为0.00％,37.93％,P<0.05).维持化疗组中位疾病进展时间(time to progress,TTP)7.9个月较B组5.3个月延长(P<0.05).A组和B组中位总生存期(overall survival,OS)分别为14.8,13.2个月,差异无统计学意义(P>0.05).维持化疗期间主要不良反应有骨髓抑制、恶心呕吐、腹泻、周围神经毒性、黏膜炎、手足综合征等,经对症治疗后均有好转,无治疗相关性死亡.结论:XP方案一线治疗HER2阴性的晚期胃癌后单药卡培他滨维持,可提高有效率、疾病控制率,延长疾病进展时间,且不良反应轻,值得进一步研究和临床推广应用.     

肝癌组织核转录因子-κB表达与HBV复制及其临床病理学特征

目的: 探讨核转录因子(NF)-κB在HBV相关肝癌组织中的表达及其临床病理学关系.方法: 采用免疫组织化学方法, 分别检测35例肝癌灶组及其自身对照的非癌组NF-κB的表达; 以生物素标记的HBV DNA探针检测肝癌组织中HBV DNA, 并分析NF-κB表达与HBV复制及其临床病理学特征之间的关系. 计数资料用Fisher确切概率法处理, 等级资料用秩和检验处理.结果: NF-κ B阳性表达物呈棕黄色颗粒状染色, 癌组织中NF-κB呈点灶状表达, 定位于胞质和细胞核; 而癌周组织NF-κB主要在胞质表达, 细胞核未见阳性表达. 癌组织NF-κB表达强度明显高于癌周组织; 癌组织NF-κ B表达阳性率为100%, 癌周组织为68.6%, 二者差异显著(Fisher's exact = 0.000). 肝癌组织中NF-κB的表达强度与肿瘤分化程度、肿瘤数目、肿瘤直径等临床病理学特征无关. HBV DNA阳性肝癌组织中NF-κB比浓度显著高于HBVDNA阴性组( t = 4.7347, P = 0.0000).结论: 肝癌组织NF-κB过表达与HBV相关肝癌的发生、发展密切相关, 可作为肝癌早期诊断及预后判断的标志.