超声微泡造影剂介导EGFP质粒转染大鼠骨骼肌

目的 探讨增强型绿色荧光蛋白质粒(EGFP)在大鼠骨骼肌微血管通透性增加的条件下表达的可行性.方法 20只清洁级Sprague-Dawley(SD)大鼠,随机均分为裸质粒组(P)、质粒 超声组(P U)、质粒 微泡组(P M)和质粒 超声 微泡组(P U M)共4组进行实验.选择增强绿色荧光蛋白质粒与白蛋白微泡相混合,以超声介导白蛋白微泡破裂的方法 对大鼠骨骼肌行基因转染,转染7 d后,荧光显微镜下观察质粒在大鼠脊斜肌组织中的表达情况.结果 P、P M组大鼠脊斜肌组织中均未见增强型绿色荧光蛋白表达;P U组可见少量微弱绿色荧光,荧光强度较P和P M组明显增强(P<0.05),P U M组可见明显特异性增强型绿色荧光蛋白表达,荧光强度约为P、P M组的10倍,P U组的3倍(P<0.05);P U M组转染率为(42.72±10.07)%较之P U组(13.62±6.17)%明显增高(P<0.05).结论 超声介导微泡造影剂破裂造成的脊斜肌组织毛细血管通透性的增加,是血管内基因成功跨越内膜屏障的主要途径之一.     

建立大鼠提睾肌微动脉血栓模型的一种新方法

目的 通过光化学法建立一种新的和临床病理机制相似的大鼠提睾肌微动脉血栓模型.方法 15只SD雄性大鼠,分为5组,以提睾肌微动脉为靶血管,分别通过股静脉注入0.2～0.6mL的异硫氰酸荧光素-右旋糖苷(FITC-dextran),以落射荧光显微镜100W汞灯经蓝光照射靶位置,同时在显微摄像系统观察血栓形成的情况和测量不同时间点血管的狭窄程度.结果 在照射时间为3、6、9min时,0.4～0.6mL组比0.2mL、0.3 mL组的血管狭窄程度更严重(P<0.05);除0.2 mL组外其他组均可形成血管闭塞,0.4～0.6 mL组的血管完全闭塞时间明显少于0.3mL组(P<0.01).结论 静脉注射FITC-dextran经光化学法建立大鼠提睾肌微动脉血栓模型是一种简单、可靠的方法 ,为微循环实验提供了一个新的方法 .     

平行板流动腔法评价生物素化脂质微泡制备效果

目的 制备生物素化脂质微泡,并应用平行板流动腔检测流体切应力对生物素化脂质微泡与链亲和素结合稳定性的影响,为进一步开展超声分子成像研究奠定基础.方法 采用声振法制备出表面携有生物素分子的脂质微泡,与普通脂质微泡对照,应用平行板流动腔模型,设置不同流体剪切应力,观察与链亲和素靶向结合的生物素化微泡的黏附效果.结果 在不同浓度链亲和素包被的平行板流动腔中均见生物素化微泡结合;随着链亲和素包被浓度的提高,靶向结合的生物素化脂质微泡抗流体剪切应力能力明显提高.结论 应用平行板流动腔模型能成功检测生物素化微泡的靶向黏附效果,该模型可推广应用于其他靶向微泡制备成功后靶向黏附能力的体外检测.     

长期应用大剂量多巴胺维持血压1例

患者男,88岁。因"发热1d"于2009年6月14日入院。既往有"帕金森病"20余年,长期口服多巴丝肼(美多芭)治疗;有"肥厚型心肌病慢快综合征及慢性阻塞性肺疾病"病史多年。入院前1天,无明显诱因下出现发热,体温最高37.9℃,伴咳嗽、咳痰,痰为少量黄白色黏痰,无畏寒、气促、头晕、黑蒙、胸闷、胸痛。二便正常。体格检查     

超声微泡造影剂用于基因转染方面的辐照参数优化

随着微泡作为一种新型基因载体可行性[1]研究的逐步深入和超声介导微泡破坏增强基因转染机制认识的不断加深,超声与微泡在基因治疗领域中的应用日益广泛。目前,国内外学者在这方面开展了大量的研究,在其过程中超声辐照参数的选择尤为重要,如何选择最佳的超声辐照条件是许多学者     

超声微泡造影剂携带基因和药物靶向治疗的研究进展

超声微泡造影剂携带基因和药物的靶向治疗是当前医学领域中的研究热点。超声微泡造影剂到达靶组织后,在超声能量作用下,因"空化效应",能有效穿透血管内皮屏障,定向释放内部包裹的基因或药物,使局部浓度大大增高,达到靶向治疗目的。本文就其在抗肿瘤、溶栓和炎症方面的研究进展做一简要综述。     

超声微泡造影剂对大鼠骨骼肌毛细血管通透性的影响

目的 研究治疗剂量超声破坏微泡造影剂对大鼠骨骼肌毛细血管通透性的影响.方法 以伊文思蓝(EB)为指示剂,18只清清级SD大鼠,随机均分为EB组(E)、EB 超声组(E U)和EB 超声 微泡组(E U M)共3组进行实验.给予相同参数条件的超声进行照射,经颈动脉输/不输入微泡造影剂,在体荧光显微镜下观察EB外溢情况并行视觉评分;使用标准曲线和分光光度法测量各组大鼠脊斜肌中EB的含量.结果 E U M组镜下可见微血管周嗣EB外溢,视觉评分等级为2级.显著高于E组(0级)及E U组(0-1级)(P<0.05).E组及E U组两者相比无显著性差异(P>0.05).E U M组脊斜肌中EB含量为(51.57±3.89)μg/g,比E组[(28.99±4.67)vg/g]及E U组[(30.99±4.11)μg/g]明显增加(P<0.05).E组及E U组两者相比无显著性差异(P>0.05).结论 超声介导微泡造影剂破坏可使脊斜肌组织毛细血管通透性增加.可能是超声微泡造影剂增强基因转染的主要机制之一.     

替罗非班对ST段抬高型心肌梗死患者冠状动脉介入治疗后的疗效及对炎症因子及血流动力学的影响

目的分析替罗非班对急性ST段抬高型心肌梗死(ST-segment elevation myocardial infarction,STEMI)患者冠状动脉介入治疗后的疗效及对炎症因子和血流动力学影响。方法回顾性选取2014年12月至2017年1月中山大学附属中山医院收治的STEMI行冠状动脉介入治疗患者95例的临床资料,根据用药方法分为对照组和观察组。对照组患者采用氯吡格雷、阿司匹林和低分子肝素钙进行治疗,观察组在对照组基础上术中联合替罗非班冠状动脉注射治疗。观察两组患者心肌灌注血流分级情况、出血事件发生情况、心功能指标、高敏C反应蛋白(high sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)浓度变化情况。结果两组患者治疗后心肌灌注血流分级情况和出血事件发生情况比较,差异无统计学意义(P0.05)。两组患者治疗后hs-CRP、TNF-α、单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)、骨桥蛋白(osteopon-tin,OPN)和血浆可溶性Fas(sFas)浓度均较治疗前下降,差异有统计学意义(P0.05);观察组患者治疗后hs-CRP、TNF-α、MCP-1、OPN和sFas浓度均低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论 STEMI患者冠状动脉介入治疗中采用替罗非班治疗可改善其心肌组织灌注疗效和心功能,降低炎症反应,且并未增加出血的发生率。     

组织多普勒成像定量评价左室舒张功能

目的 应用组织多普勒成像技术(DTI)与左室舒张末压(LVEDP)对比评价左室舒张功能,探讨DTI评价左室舒张功能的临床价值.方法 选取33名患者,分为左室肥厚组(LVH)与非左室肥厚组(non-LVH),另选取15名健康人作为对照组,分别行超声多普勒及DTI检查,多普勒超声测量二尖瓣口舒张早期充盈速度(E)和舒张晚期充盈速度(A)及E/A,DTI模式测量二尖瓣环舒张早期运动速度(Ve)、舒张晚期运动速度(Va)和Ve/Va,以及用猪尾导管直接测量LVEDP.结果 实验组Ve/Va和E/A均比对照组显著减小(P<0.05),且LVH组Ve/Va比non-LVH组减小更为显著(P<0.05),而LVH组E/A与non-LVH组相比差异无显著性(P>0.05).LVEDP与Ve/Va、E/A呈负相关(r分别为-0.92和-0.79,P<0.05),室间隔厚度(IVSd)与ve/Va、E/A呈负相关(r分别为-0.67和-0.49,P<0.05),Ve/Va与LVEDP的相关性高于E/A与LVEDP的相关性.结论 DTI可作为评价左室舒张功能的可靠方法.     

评价超声联合白蛋白微泡造影剂实现基因转染靶向性的研究

目的 评价超声联合白蛋白微泡造影剂实现基因转染的靶向性.方法 选择增强型绿色荧光蛋白质粒为报告基因,经股静脉输入黏附质粒的白蛋白微泡的同时在大鼠背部脊斜肌区域经皮辅予一定强度的超声照射对大鼠脊斜肌行基因转染,转染7 d后,取脊斜肌、肝、肾、心肌组织快速冷冻切片,荧光显微镜下观察各组织内的荧光表达.结果 脊斜肌组织中可见较多特异性绿色荧光,多位于微血管周围,荧光强度较其余组织明显增强(P<0.05),肝脏、肾脏组织中见少量特异性绿色荧光,肝脏荧光强度约为肾脏的4倍(P<0.05),心肌组织中未见特异性绿色荧光.结论 静脉注射黏附质粒的微泡声学造影剂同时经体表给予一定强度的超声辐照,可以较好地实现基因的靶向转染.