不同流式细胞分析系统对外周血淋巴细胞亚群分析结果的影响

目的 探讨部分临床实验室FCM淋巴细胞亚群分析参考范围应用的合理性及不同生产厂家的流式细胞仪和试剂组合对淋巴细胞亚群分析结果的影响.方法 根据国内临床实验室常用的3个流式细胞仪型号(Beckman Coulter Epics XL、Beckman Coulter Cytomics FC500、BD FACS Calibur),分别选取3家北京地区临床流式细胞室(A、B、c室),按照各室的实际检测方案分别测定50份健康人静脉血标本,以验证各室淋巴细胞亚群分析参考范围是否合理.调查3家实验室室内全血质控品使用情况,并将商品化全血质控品分发各室,按照各自的实际实验方案在20个工作日内与常规标本平行处理、检测和分析.针对不同生产厂家的试剂,在同一流式细胞仪(型号为Beckman Coulter Epics XL)上用a、b、c、d 4种不同的试剂组合对20份患者标本进行检测,其中试剂组合a为美国Beckman Coulter公司同厂配套试剂和仪器,试剂组合b、c、d的检测结果分别与试剂组合a比较,计算b、c、d试剂组合偏倚>10%的概率.采用相同试剂和溶血素(美国Beckman Coulter公司)对24份患者标本进行前处理,分别在2台不同厂家和型号的流式细胞仪(型号为Beckman Coulter Epics XL和BD FACS Calibur)上检测,比较相同试剂处理标本后不同仪器对淋巴细胞亚群分析结果的影响.采用同厂配套试剂和仪器,比较Beckman Coulter Epics XL和BD FACS Calibur两个流式细胞检测系统对20份患者标本检测结果的影响.结果 A室的自然杀伤(NK)细胞及CD+4 T淋巴细胞/CD+8 T淋巴细胞(T4/T8),B、c两室的T4均有大于10%的结果落在相应的参考范围之外,超出相应参考范围的概率分别为16%(9/50)、24%(12/50)、22%(11/50)、12%(6/50).3家实验室20个工作日内的室内质控均在参考范围内.与试剂组合a比较,试剂组合b、c的所有项目偏倚均较大,其中偏倚>10%的概率最低为试剂组合b的T8,为70%(14/20);最高为试剂组合b、c的T淋巴细胞(T3)、T4,均达到100%(20/20).试剂组合d的T3、T8和B淋巴细胞(B)偏倚较大,偏倚>10%的概率分别为35%(7/20)、85%(17/20)、75%(15/20).不同生产厂家的试剂、仪器处理和分析标本的结果,与采用同一生产厂家的试剂、仪器处理和分析的结果相比,T3、T4、T8、B、NK均存在较大偏倚,偏倚>10%的概率分别为71%(17/24)、80%(19/24)、38%(9/24)、33%(8/24)、92%(22/24).Beckman Coulter Epics XL和BD FACS Calibur两个流式细胞检测系统相比较,T8、NK和B的偏倚均较大,偏倚>10%的概率分别为55%(11/20)、70%(14/20)、55%(11/20).结论 流式细胞实验室需要建立自己的参考范围并定期验证,以便合理进行调整.建议定期采用全血质控品,并累计质控数据.各实验室应选择同厂配套试剂处理标本.

Abstract：

Objective To investigate the appropriate setting up of normal reference ranges of lymphocyte subsets in some flow cytometry laboratories and to study the effects of different flow cytometers and various reagents by different manufacturers on the analysis of peripheral blood lymphocyte subsets. Methods Three FCM labs (named A, B and C) in Beijing region were selected representing 3 commonly used flow cytometers (Beckman Coulter Epics XL, Beckman Coulter Cytomics FC500, BD FACS Calibur). 50 samples from healthy donors were distributed to 3 labs and tested according to individual lab's standard operating procedure to verify whether the normal reference ranges of peripheral blood lymphocyte subsets established were appropriate. The application of internal quality control was also investigated. Commercial blood quality control reagents were given to the 3 FCM labs and tested within 20 working days paralleled with routine samples. In addition, 20 patients' samples were prepared using 4 different combinations of reagents ( a , b , c and d). The results from combination a, which used the Beckman Coulter reagents and instrument, were compared to the results from combination b, c and d, which used reagents from different manufacturers. Then the prepared samples were tested on Beckman Coulter Epics XL to evaluate the effects of different combinations of reagents on the results of peripheral blood lymphocyte subsets analyzed by the same instrument. Furthermore, 24 patients' samples prepared by same reagents from Beckman Coulter company were tested on both Beckman Coulter Epics XL and BD FACS Calibur respectively to assess the effects of different instruments on peripheral blood lymphocyte subsets. 20 patients' samples prepared by same reagents and instruments were analyzed by Beckman Coulter Epics XL analytic system and BD FACS Calibur analytic system respectively to assess the effects of the two analytic systems on the lymphocyte subsets. Results Over 10% of the results for NK and T4/T8 in lab A as well as T4 in labs B and C fell outside of their normal reference ranges. The probabilities exceeding corresponding normal reference ranges were 16% ( 9/50 ), 24% ( 12/50 ), 22% (11/50) and 12% ( 6/50 ), respectively. The results using internal blood quality control in 3 FCM labs within 20 working days were all within the reference ranges of the quality control provided by the kit. The biases from b and c reagent combinations were substantial compared with that of reagent a combination. Among the biases from b and c reagent combinations, the lowest probability of bias exceeding 10% was T8 of combination b, which had probability of 70% (14/20). The highest probabilities of hias exceeding 10% were T3 and T4 of b and c reagent combinations, which reached 100% (20/20) . Furthermore, the biases of T3, T8 and B of d reagent combination compared with that of reagent a combination were also substantial. The probabilities of bias exceeding 10% were 35% (7/20) ,85% (17/20) and 75% (15/20), respectively. Comparing the results of samples prepared and analyzed by reagents and instruments from different manufacturers to that of samples prepared and analyzed by the same company's reagents and instruments showed that there were great discrepancies in T3, T4 , T8 , B and NK. The probabilities of bias exceeding 10% were 71% ( 17/24), 80% (19/24) ,38% (9/24), 33% (8/24) and 92% (22/24), respectively. The biases of T8, NK and B were substantial when compared the results from Beckman Coulter Epics XL analytic systems and BD FACS Calibur analytic systems. The probabilities of bias exceeding 10% were 55% (11/20 ), 70% ( 14/20 ) and 55% (11/20), respectively. Conclusions FCM labs should set up their own normal reference range for peripheral blood lymphocyte subsets. The normal reference range should be verified periodically. It is important to apply internal blood quality control regularly and accumulate the quality control results. The reagents and instrument for preparing peripheral blood samples should be from the same manufacturers.     

帕金森病伴认知障碍患者血尿酸的变化及相关因素分析

目的：探讨帕金森病伴认知障碍与患者血尿酸变化的关系,分析影响帕金森病伴认知障碍的相关因素。方法：选择2014年1月至2016年12月诊治的60例帕金森病患者,使用蒙特利尔认知评估量表（MoCA）评估患者的认知障碍程度,并进行Hoehn&Yahr帕金森病严重度分级（H-Y）。对患者年龄、性别、病程、受教育程度等资料进行逐步多因素回归分析,探讨患者发生认知障碍的相关因素;检测患者的血尿酸、尿微量白蛋白等水平,并与健康人（60例）对比,分析帕金森病伴认知障碍与血尿酸变化的关系。结果：帕金森病组血尿酸平均水平为（258.0±55.6） μmol/L,低于健康组［（328.6±50.8） μmol/L］,差异有统计学意义（P<0.05）。帕金森病组与健康组及帕金森病不同分期患者的尿微量白蛋白水平差异无统计学意义。早期帕金森病患者血尿酸水平与中晚期帕金森病患者差异无统计学意义。合并认知障碍的帕金森病患者血尿酸平均水平为（235.6±65.3） μmol/L,明显低于未合并认知障碍者［（272.3±60.3） μmol/L］,差异有统计学意义（P＜0.05）。帕金森病患者MoCA评分与其血尿酸水平、受教育年限正相关,与患者的病程、H-Y分级负相关。结论：血尿酸可能参与帕金森病患者认知障碍的发生,对血尿酸水平进行干预有助于延缓患者的病程。     

有机磷农药中霉患者肺换气功能改变临床观察

为探讨有机磷农药中毒时是否存在肺换气功能障碍，我们对25例病人作临床观察。报道如下。对象和方法对象：1995年6月～1996年6月，轻、中度神志清楚的中毒病人25例，年龄20～57岁，平均34．6岁。女性21例，男性4例。对照组健康人20例，年龄20～50岁，平均年龄28．6岁。方法：测定人院后卧床10分钟呼吸空气，然后面罩吸氧15分钟经肝素抗凝抽股动脉血，用美国1312型血气分析仪测定结果，并按中国医学科学院阜外医院介绍的方法分别计算换气功能指标”‘。换气功能指标和计算方法如下。1．P。一a以）。评价氧合状态指标，采用吸空气测定值。2．…     

急性脑梗死患者肺部感染相关因素分析

目的探讨急性脑梗死患者肺部感染发生的相关因素。方法对我院357例急性脑梗死患者的临床资料进行同顾性分析。结果急性脑梗死患者发生医院肺部感染率为12.0%,肺部感染主要因素与年龄、意识障碍程度、血糖、慢性肺病等有关;感染主要病原菌以革兰阴性菌为主。结论急性脑梗死患者肺部感染是多种因素相互作用的结果,严格掌握使用抗菌药物的原则和注意无菌操作可降低感染率。     

肺心病吸氧时呼吸衰竭诊断的回顾性研究

呼吸衰竭的诊断以呼吸空气时动脉血气测定PaO_2<8kPa、PaCO_2>6.65kPa 二个客观指标。但是,     

992株临床分离病原菌分布及耐药性分析

目的 了解该院近3年临床分离病原菌的分布及耐药情况.方法 回顾性分析该院2011年11月至2014年12月临床分离的992株病原菌及药敏结果.结果 该院992株病原菌中革兰阴性杆菌487株(49.1％),大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs检出率分别为47.5％、16.7％,两者对亚胺培南和美洛培南的敏感率分别为100％ 、98.5％;铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌对多种抗菌药物高度敏感;嗜麦芽窄食假单胞菌对多种抗菌药物均有不同程度的耐药,但对复方黄胺甲噁唑100％敏感.革兰阳性球菌245株(24.7％),耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的检出率分别为45.5％、91.6％,未检出耐万古霉素葡萄球菌和耐万古霉素肠球菌.真菌260株(26.2％),白假丝酵母菌对抗真菌药高度敏感,热带假丝酵母菌的耐药率较高.结论 定期回顾分析临床分离病原菌的分布及其耐药性,有利于及时掌握其耐药性的变迁,从而指导临床合理应用抗菌药物.     

2013年重庆医科大学附属某医院临床分离病原菌的分布及耐药性分析

目的 探讨临床标本分离病原菌的分布及耐药性特征,为临床合理使用抗菌药物提供依据.方法 对该院2013年临床送检的细菌检验标本1 936份进行细菌培养、鉴定和药敏试验,药敏试验结果判定依据临床和实验室标准协会(CLSI)颁布标准,采用实验室信息系统(LIS)进行数据分析.结果 1936份临床标本共检出病原菌461株,其中革兰阴性杆菌234株(50.76％),革兰阳性球菌123株(26.68％),真菌104株(22.56％).常见病原菌为大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、粪肠球菌、鲍曼不动杆菌.对于肠杆菌科细菌,亚胺培南美、洛培南和阿米卡星的抗菌活性最强;万古霉素和替考拉宁是葡萄球菌属敏感性最高的药物;对于非发酵菌,敏感的药物有亚胺培南和美洛培南等.大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中超广谱β-内酰胺酶的检出率为10.42％和5.00％,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌为26.32％,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌为70.00％.结论 临床分离的细菌耐药状况比较严重,临床医生应重视病原菌的药物监测,了解细菌耐药性的变迁,合理选择和使用抗菌药物.     

系统性红斑狼疮患者转化生长因子β1及其Ⅱ型受体的表达及意义

系统性红斑狼疮（SLE）是一种累及全身的自身免疫性疾病（AID），以B淋巴细胞功能亢进，产生大量自身抗体为特征，目前SLE的启动及疾病维持机制尚不十分清楚。转化生长因子β1（TGF-β1）是人体多种组织细胞的生长调控因子，对细胞外间质基因表达、基质降解、细胞增殖分化和细胞凋亡功能等具有明确作用。转化生长因子BU型受体（TβRⅡ）基因的缺失及变异可使TGF-β1的信号转导通路受阻，使细胞增殖失去控制，导致细胞异常增殖或免疫失调。本研究测定TGF—β1与TpRⅡ在SLE不同疾病组中的变化，以评价其与SLE活动性之间的关系以及在SLE发病中作用，并为SLE诊断提供有价值的指标。     

酒依赖患者的反应抑制和工作记忆研究

目的 了解酒依赖患者是否存在反应抑制和工作记忆损害.方法 选取48例酒依赖患者为病例组,另外选取50例在年龄、性别、平均智商、平均受教育年限与病例组相匹配的正常人为对照组.运用神经心理学测试的方法比较两组之间反应抑制、工作记忆任务的差异.结果 病例组在执行抑制任务时误按数显著高于对照组[（7.02±3.48）次vs （3.45±1.52）次],反应时显著长于对照组[（605.45±142.56）ms vs （435.72±51.18）ms],差异有统计学意义（t=6.534,P=0.000;t=7.781,P=0.000）.酒依赖患者在完成空间工作记忆任务时误按数显著提高[（4.58±3.45）次vs （0.43±0.88）次],反应时[（10 566.16±2 455.61） ms vs（9 185.44±2 677.52） ms]明显增加（t=8.085,P=0.000;t=2.657,P=0.009）.结论 酒依赖患者存在抑制功能及工作记忆缺陷.     

JNK抑制剂SP 600125对癫痫持续状态大鼠海马神经元的保护作用

目的：探讨c-Jun氨基末端激酶（JNK）特异性抑制剂SP600125对大鼠癫痫持续状态海马神经元的保护作用及其作用机制。方法 Wistar大鼠按随机数字表随机分为对照组（Control组）、癫痫持续状态组（ SE组）和JNK抑制剂SP600125组（ SP组）。应用HE染色和荧光TUNEL法观察各组大鼠海马病理变化和神经元凋亡;采用Western blot方法检测各组大鼠海马组织JNK及其下游效应分子c-JUN磷酸化表达变化。结果与对照组相比,SE组大鼠海马CA3区神经元细胞缺失、凋亡明显[（ TUNEL阳性细胞百分率（26．34±3．04）％, P＜0．05];SP组较SE组大鼠死亡率明显下降（分别为6．25％、37．5％,P＜0．05）,细胞缺失和凋亡明显减少[TUNEL阳性细胞百分率分别为（7．48±1．37）％、（26．34±3．04）％, P＜0．05];同时,SE组大鼠海马磷酸化JNK（p-JNK）和磷酸化c-JUN（p-c-JUN）显著增加（OD相对值分别为0．447±0．025、0．552±0．035,与对照组相比, P＜0．05）,应用SP600125的SP组JNK和c-JUN的磷酸化水平明显下降（OD相对值分别为0．211±0．016、0．237±0．028,与SE组相比, P＜0．05）。结论 JNK抑制剂SP600125通过抑制JNK及c-JUN磷酸化水平对癫痫持续状态后大鼠海马神经元起到保护作用。