聚合酶链反应检测冠心病患者外周血人巨细胞病毒

目的：探讨人类巨细胞病毒（HCMV）与动脉粥样硬化（AS）的关系及外周血检测的意义。方法：应用聚合酶链反应特异扩增HCMV早期抗原区。结果：冠心病组64例外周血阳性43例（67.2％）；健康对照组30例中阳性3例（10.0％），两组比较，差异有显著意义（P＜0.05）。结论：HCMV可能是AS的一种致病因子，并可从外周血中检出。     

人肝细胞性肝癌组织转移相关分子的比较蛋白质组学研究

目的 应用比较蛋白质组学方法研究肝细胞性肝癌(HCC)转移相关的关键蛋白分子。方法 用双向凝胶电泳(2DE)对有转移的HCC组织和未发生转移的HCC组织总蛋白进行分离，两组间差异蛋白点用质谱和数据库搜索鉴定，并在蛋白质和mRNA水平上进一步检测验证。结果 鉴定出l6个差异表达蛋白，包括S100钙结合蛋白(S100)、热休克蛋白27(HSP27)、细胞角蛋白18(CK18)等。对在转移性HCC组织中表达显著增高的HSP27，应用western blot分析在蛋白水平上验证了2DE结果，RT-PCR检测出两组问mRNA水平也存在差异，但不显著，免疫组织化学检测显示HSP27主要定位于肝细胞胞浆内。结论 HCC转移与多种蛋白表达相关，其中HSP27高表达可能在转移中发挥作用，可能为潜在的判断HCC转移的分子标记或控制转移的治疗靶点。     

肝癌组织及血清中细胞间粘附分子-1表达的研究

目的研究细胞间粘附分子－１（ｉｎｔｅｒｃｅｌｕｌａｒａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ－１，ＩＣＡＭ－１）作为判断肝癌发展程度及转移状态指标的可能性。方法以免疫组化的方法检测ＩＣＡＭ－１在肝癌组织和正常肝组织中的表达，观察了ＩＣＡＭ－１表达在细胞的定位。以点免疫印迹法测定不同患者血清和不同肝组织中ＩＣＡＭ－１的表达。分析ＩＣＡＭ－１表达与肿瘤生长转移状态、肿瘤特性的关系。结果肝癌细胞ＩＣＡＭ－１表达阳性（阳性率为８００％），主要分布在细胞膜，正常肝细胞则为阴性。肝癌患者血清可溶性细胞间粘附分子－１（ｓＩＣＡＭ－１）水平高于正常人（Ｐ＜００１）及肝良性肿瘤患者（Ｐ＜００５），肝癌伴转移者高于无转移者（Ｐ＜００５）。肝癌组织中ＩＣＡＭ－１含量明显高于癌旁组织（Ｐ＜００１）及正常肝组织（Ｐ＜００１），而与肿瘤大小及有无包膜无关（Ｐ＞００５）；转移组肝癌中ＩＣＡＭ－１的表达明显高于非转移组（Ｐ＜００５），两组癌旁组织中ＩＣＡＭ－１表达无差别（Ｐ＞００５）。结论血清及组织中ＩＣＡＭ－１的水平在一定程度上可以反映肝癌发展程度及转移状态，有可能作为预测肝癌转移复发的指标。     

非小细胞肺癌血管内皮Nestin表达与临床病理指标及预后的相关性

目的检测非小细胞肺癌组织血管内皮中Nestin的表达,分析其与非小细胞肺癌患者临床病理指标及预后的相关性。方法采用免疫组织化学方法检测非小细胞肺癌组织血管内皮中Nestin的表达。采用Mann-WhitneyU检验及Kruskal-Wallis法检验Nestin标志微血管密度(MVD)与临床病理指标的关系,采用Kaplan-Meier生存曲线计算无病生存期和生存时间,采用Log-rank检验进行差异检验,采用Cox分析评估各指标与患者生存之间的关系。结果患者组的Nestin-MVD计数水平显著高于对照组(P<0.01)。患者组中,不同病理类型、病理分期、T分期、N分期及血管侵犯情况患者的Nestin-MVD计数的差异均有统计学意义(P值均<0.05)。其中,腺癌患者的Nestin-MVD中位值(26.6)显著高于鳞癌患者(20.8,P=0.008);Ⅱ期和ⅢA期肺癌患者的Nestin-MVD中位值(23.0、25.1)显著高于ⅠB期患者(15.5,P值均=0.000);T1期和T3期患者的Nestin-MVD中位值(28.6、29.6)显著高于T2期患者(21.3,P值均=0.025);术中有淋巴结转移者(N分期为1～2)的Nestin-MVD中位值(23.7、24.8)显著高于未转移者(17.7,P值均=0.002);存在血管侵犯的肺癌患者的Nestin-MVD中位值(26.6)显著高于无血管侵犯者(21.3,P=0.021)。Nestin-MVD中位值>22.0的患者的中位无病生存期(DFS,16.5个月)、中位生存时间(OS,44.3个月)显著短于Nestin-MVD中位值≤22.0的患者(36.0和58.3个月,P值分别为0.002、0.004),其Nestin-MVD计数与DFS、OS呈负相关(Log-rank值分别为9.679和8.525,P值分别为0.002、0.004)。Cox单因素分析结果显示,病理分期(95%CI为1.222～2.175,P=0.001)、N分期(95%CI为1.175～2.062,P=0.002)、T分期(95%CI为1.050～2.705,P=0.031)、Nestin-MVD计数(95%CI为1.205～2.670,P=0.004)及有无血管侵犯(95%CI为1.007～2.282,P=0.046)均影响患者的OS;而年龄、性别、吸烟史、肿瘤大小、病理类型、分化程度及肿瘤组织有无坏死与患者的生存预后不相关(P值均>0.05)。Cox多因素分析结果显示,病理分期(95%CI为0.100～0.945,P=0.039)、N分期(95%CI为1.537～12.167,P=0.006)、T分期(95%CI为1.646～7.147,P=0.001)、Nestin-MVD计数(95%CI为1.139～2.795,P=0.012)为影响OS的独立危险因素。结论非小细胞肺癌血管内皮Nestin表达与肿瘤血管新生、转移及预后密切相关。     

卡维地洛改善SHR左室舒张功能及可能机制

目的:探讨卡维地洛对自发性高血压大鼠心肌细胞肌浆网(SR)膜上钙泵活性的影响及可能机制.方法:将12周龄雄性SHR40只随机分成4组.第1组在未作治疗时即测定各指标,并与同周龄wistar(n=10)比较,作为治疗前对照.另3组经生理盐水、倍他洛克(Bet)、卡维地洛(Car)治疗20周后,观察各项指标之变化.结果:与wistar比,SHR的平均动脉压、左室肥厚指数、左室舒张末压及心肌细胞SR膜上钙泵活性明显降低.经治疗后,Bet与Car有相同的降血压及减慢心率作用,但Car降低左室舒张末压、左室肥厚指数及提高心肌细胞SR膜上钙泵活性作用比Bet强.结论:Car能显著提高心肌细胞SR膜上钙泵活性,降低左室舒张末压.这与其全面阻滞β1β2α1后逆转左室肥厚、减低外周血管阻力后减少了心肌耗氧量有关.     

MUC-1基因在胃癌和外周血中的表达及临床意义

目的：检测胃癌MUC－1的表达情况及其与临床分期和转移的相关性。方法：应用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）和免疫组化方法检测胃癌活检标本和外周血中MUC－1基因和蛋白的表达水平。结果：在56例胃癌病例中MUC－1 mRNA阳性表达率为48．2％，MUC－1蛋白阳性表达率为53．6％，临床分期中I和II期病人阳性表达率MUC－1 RNA为33．3％，MUC－1蛋白为40％，而-Ⅲ期病人则分别高达65．4％和69．2％，二者差异有显著性意义（P＜0．05），在淋巴结转移的患者中外周血的癌细胞MUC－1高表达，阳性率为73％，结论：MUC－1是一种较好反映胃癌恶性程度和转移性的肿瘤标志物。     

自体外周血内皮祖细胞移植治疗大鼠肝硬化的研究

自体干细胞移植用于治疗缺血和需要组织修复及重建的疾病已受到人们的重视。由于肝炎时肝细胞损伤病因的持续存在，肝硬化一直持续发展，难以控制。本研究探讨自体外周血分离的内皮祖细胞对大鼠肝硬化的治疗作用。[第一段]     

转化生长因子β1基因转染对大鼠骨髓树突状细胞免疫功能的影响

目的 研究人转化生长因子β1(TGFβ1)基因修饰对大鼠骨髓树突状细胞(DC)免疫功能的影响。方法 构建TGFβ1-pcDNA3质粒并转染未成熟DC。检测转染后DC的TGFβ1表达及其功能变化，输注1周后柃测TGFβ1-DC在受者脾和淋巴结的分布、T细胞凋亡水平及T细胞端粒酶表达。结果 TGFβ1-pcDNA3质粒转染DC能有效抑制DC的成熟和分化，并下调Dc的多种功能。TGFβ1基因转染不仅能降低DC对LPS的反应，同时抑制DC在MLR中刺激T细胞增殖的能力。TGFβ1-DC输注受者后，1周内可在脾和淋巴结内形成微嵌合，并有效诱导T细胞的凋亡，抑制T细胞端粒酶的活性和表达。结论 TGFβ1基因能有效抑制DC的多种功能，可用于诱导机体免疫耐受。     

人骨髓间充质干细胞的体外培养及诱导分化

目的 建立一株能在体外长期培养并具有多向分化潜能的人骨髓间充质干细胞(HBMSC)。方法 利用差异贴壁法从人肋骨中分离纯化HBMSC,在体外通过地塞米松、胰岛素诱导分化为脂肪细胞,用VitC、β-磷酸甘油、地塞米松诱导下可分化成骨细胞,裸鼠体内分化为软骨样细胞及成骨样组织,采用流式细胞仪检测细胞表面CD31、CD34、CD45、CD9、CD90、CD105和CD106。以2.5×10~7细胞接种于裸鼠皮下进行致瘤实验,用DY-NAL REU-SSO反向杂交法检测HLA。结果 细胞已连续培养超过30代仍能稳定生长,细胞表面特性为CD105、CD106阳性,而CD31、CD34、CD45、CD9、CD90为阴性。在体外能诱导成脂肪细胞、成骨细胞。无致瘤性,在裸鼠体内能形成软骨细胞及骨样组织。结论 培养了一株能在体外长期培养及具有多向分化潜能的人骨髓间充质干细胞。     

尿型纤溶酶原活化素受体在胃癌活检标本中的表达和意义

尿型纤溶酶活化素（Ｕ－ＰＡ）是一种丝氨酸蛋白酶，Ｕ－ＰＡ在体内作用依赖于细胞膜相应受体（Ｕ－ＰＡ－Ｒ）的表达。我们对在内镜下３８例进展期胃癌患者的活检标本检测了Ｕ－ＰＡ－Ｒ和Ｐ５３基因蛋白。其中Ｕ－ＰＡ－Ｒ的阳性率为３４．２％，Ｕ－ＰＡ－Ｒ阳性的胃癌其Ｐ５３基因蛋白均呈阳性表达，另１０例非癌胃粘膜标本作对照，均为阴性。在进展期胃癌中Ｕ－ＰＡ－Ｒ阳性表达胃癌在Ｂｏｒｒｍａｎｎ３，４型者高于Ｂｏｒｒｍａｎｎ１，２型（Ｐ＜０．０５）而与活检标本的病理组织学分型无关。上述结果提示，应用胃镜诊断的进展期胃癌活检标本检测ＵＰＡ－Ｒ可作为胃癌恶性程度及估计预后的一项指标。