高压氧治疗促进HIBD新生大鼠内源性神经干细胞的迁移与分化

目的：该研究探讨了高压氧（HBO）对缺氧缺血性脑损伤（HIBD） 新生大鼠内源性神经干细胞（NSCs）的迁移与分化的影响。方法：7 日龄 Sprague-Dawley 新生大鼠随机分为对照组，模型组及HBO组。采用 Rice-Vannucci 方法制成 HIBD 模型。造模后 3 h 内行HBO 治疗。分别于 HBO治疗后 7 d、14 d、 28 d，采用 BrdU/DCX，BrdU/β-tubulin，BrdU/GFAP和BrdU/O4免疫荧光双标法，用共聚焦显微镜动态检测侧脑室室管膜下区（subventricular zone, SVZ）与大脑皮层内源性 NSCs的迁移与分化。结果：治疗后7 d，HBO 组损伤侧SVZ 区 BrdU+DCX+细胞数（84±21 个/mm2）增加，多于对照组（39±14 个/mm2）与模型组（68±17 个/mm2）（P<0.05）；治疗后14 d，SVZ区BrdU+DCX+ 细胞数减少，而皮层区BrdU+DCX+ 细胞数增加，HBO组明显多于对照组(P<0.01）；治疗后28 d，各组大脑皮层BrdU+DCX+ 细胞数减少，大脑皮层出现BrdU+β-tubulin+，BrdU+GFAP+，BrdU+O4+细胞。HBO组BrdU+β-tubulin+与BrdU+O4+细胞数显著高于对照组与模型组（P<0.05）。结论：高压氧可促进 HIBD 新生大鼠内源性NSCs迁移到大脑皮层并分化为成熟的神经细胞。［中国当代儿科杂志，2009，11（9）：749-752］     

骨髓基质细胞促进神经干细胞增殖分化

目的：探讨骨髓基质细胞（BMSCs）对神经干细胞（NSCs）增殖分化的影响。 方法:在体外比较NSCs在单独培养和在BMSCs条件培养液中培养下的分化和增殖情况。 结果:应用BMSCs条件培养液培养NSCs，分化的神经元比例较显著高于NSCs单独培养（41.1%±3.2% vs 23.3%±16.5%，P<0.05），而分化的星形胶质细胞所占比例显著降低（33.8%±4.9% vs 65.0%±10.4%，P<0.01），同时增殖细胞所占比例也显著增高（74.7％±4.7％ vs 51.4％±12.3％，P<0.01）。 结论:BMSCs对NSCs有促进其增殖和向神经元分化的作用。NSCs与BMSCs联合移植可能会增强NSCs移植的抗脑损伤作用。     

高压氧对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后在体神经干细胞的影响

目的： 新生鼠的神经生发区-室管膜下区（SVZ） 和海马齿状回（DG）聚集了多种不同发育阶段神经干细胞（NSCs），它们可分化产生新的神经元和胶质细胞。本研究探讨缺氧缺血性脑损伤（HIBD）对脑生发区NSCs的损伤及高压氧（HBO）对此损伤的影响。从在体NSCs 探讨HBO对新生大鼠HIBD的保护作用机制。 方法： 新生7 d龄SD大鼠随机分为4组：① 正常对照组（CON，n=16）；② HIBD 模型组（HIBD，n=16）；③ 高压空气组（HBA，n=16）；④HBO治疗组（n=16）。Rice法复制HIBD模型，并予HBA或HBO治疗，每天1次共7 d。BrdU免疫组化显示在体NSCs。并取损伤侧脑SVZ区组织，体外NSCs培养并进行神经干细胞球计数。 结果： HIBD组生发区在体BrdU 阳性细胞和体外培养的神经干细胞球数目明显少于对照组。HBO组SVZ区的BrdU阳性细胞增多；体外培养的神经干细胞球增多。HBA组增加不明显。 结论： 新生大鼠HIBD后生发区NSCs减少，HBO治疗可以减轻HIBD后NSCs的死亡。HBA治疗无明显作用。     

神经干细胞移植对HIBD新生大鼠学习记忆的影响

目的：探讨脑内移植胚鼠神经干细胞 (NSCs)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后学习记忆的影响。 方法： 分离孕龄14 d的Sprague-Dawley（SD）大鼠胚胎前脑皮质，采用无血清悬浮培养的方法获得细胞克隆；7 d龄新生大鼠随机分为假手术组（n=10）、HIBD组（n=11）和移植组（n=13），后两组结扎左侧颈总动脉联合8%氧吸入制作HIBD模型，损伤后3 d利用立体定位仪分别在左侧海马区植入培养基作为对照或BrdU 标记的NSCs，观察植入4 周后大鼠学习记忆功能的恢复情况。计数海马CA1区正常神经元，间接免疫荧光法观察移植细胞在脑内的存活、迁移情况。 结果： 在放射形迷宫测试中，移植组较对照组表现出明显的改善，觅水时间缩短(61.40 s±24.83 s vs 89.32 s±31.52 s)，错误次数（2.65±0.57 vs 3.78±0.41）及重复次数明显减少(0.32±0.43 vs 0.81±0.47)(P<0.05)。BrdU间接免疫荧光显示移植后4周，在脑内可见存活的NSCs在海马内广泛分布；尼氏染色显示移植可明显减少海马CA1区的细胞丢失。 结论： 脑内移植胚鼠NSCs对HIBD新生大鼠的学习记忆恢复有良好的促进作用。     

人骨髓基质细胞脑移植改善大鼠缺氧缺血性脑损伤

目的观察人骨髓基质细胞(BMSCs)移植对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的保护作用,探讨BMSCs脑移植治疗HIBD的可行性。方法36只新生大鼠随机分为对照组、HIBD组和移植组(均n=12)。HIBD组和移植组大鼠7日龄时结扎左侧颈总动脉后吸入8%氧气2h制成HIBD模型。对照组仅分离左颈总动脉,不予结扎和缺氧。分离培养人BMSCs,损伤后3d将BMSCs立体定位脑移植到移植组大鼠左侧感觉运动皮层。3～4周龄时,观察大鼠行为学和组织学的改变,并用免疫荧光检测移植细胞的存活情况。结果缺氧缺血后3周,HIBD组海马DG区和皮层单位面积内神经元数目较正常组减少[海马DG区:(39.2±5.6)个vs(51.1±3.9)个,P<0.001;皮层:(12.3±3.0)个vs(17.8±3.0)个,P<0.001]。BMSCs移植后海马DG区和皮层单位面积内神经元数目[海马:(44.9±3.1)个,皮层:(17.5±3.1)个]较HIBD组增加(P<0.01)。与对照组比较,HIBD组在T迷宫、感觉运动功能测试中表现出明显的不足。BMSCs脑移植组各项行为学测试成绩较HIBD组均有明显改善。免疫荧光显示移植后3周,BMSCs在脑内存活。结论BMSCs脑移植可以改善新生鼠HIBD。     

儿科教学中PBL与剖析病例法相结合的教学模式探索

对PBL与剖析病例法相结合的教学模式在儿科见习教学中的应用进行了初步探索。从这一教学模式的设计理念、实施方法、效果评价及目前条件下存在的问题进行了探讨，为儿科临床教学改革积累了经验。     

Ⅰ型戊二酸尿症一例

患儿男，8个月。因头竖不稳1个月来我科门诊。患儿系第一胎足月，因胎盘老化剖宫产出生。1分钟Apgar评分10分，出生体重3800g。母乳喂养，6个月添加米粉。患儿出生6个月内发育基本正常，2个月能抬头，4个月能背靠物体坐稳。但7个月时发现患儿头竖不稳，至今不能独坐。曾在外院作头部CT和脑电图未发现异常，发育商(DQ)71分(为临界值)，诊断为“脑瘫”。予以康复治疗无明显好转，来我科门诊。患儿既往体健。父母均体健，非近亲结婚。家族中无类似患者，也无其他遗传性疾病史。体查：头围41．0cm、体重8．20kg、身高67．0cm。     

儿科临床教学中培养学生创新思维的理论与实践

该文从理论上阐述了培养创新型医学人才的必要性与可行性、医学生创新能力培养的主要制约因素。从实践上对培养儿科专业创新型医学人才的主要措施进行了探讨,为培养创新型医学人才积累了经验。     

喘息婴幼儿外周血气道炎症相关介质水平的研究

目的 通过检测喘息婴幼儿外周血相关炎症介质水平,从辅助性T细胞（Th）1/Th2失衡及气道炎症两个方面探讨婴幼儿喘息发生的可能机制。方法 选取急性喘息发作婴幼儿50例为喘息组,25例健康婴幼儿为健康对照组。喘息组患儿依据喘息发生次数分为首次喘息组（首发组）25例和反复喘息组（反复组,发作次数≥ 2次）25例;根据是否存在哮喘发生的高危因素分为有高危因素组22例和无高危因素组28例;根据病原学检测结果分为病原学阳性组23例和病原学阴性组27例。检测各组外周血Th1细胞因子白介素（IL）-2,Th2细胞因子IL-4、IL-5、IL-13、转化生长因子-β1（TGF-β1）,以及总IgE （TIgE）水平。喘息组患儿同时送检外周血嗜酸性粒细胞（EOS）计数,并采集标本进行呼吸道病原学检测。结果 喘息组外周血IL-4、IL-5、IL-13、TGF-β1及TIgE水平较健康对照组均明显升高（P < 0.05）;外周血IL-2、IL-4、IL-5、IL-13、TGF-β1及TIgE水平在首发组与反复组,有哮喘高危因素组与无哮喘高危因素组,以及病原学阳性组与病原学阴性组之间比较,差异均无统计学意义（P > 0.05）。相关性分析表明喘息组外周血EOS计数与IL-4水平呈正相关（P < 0.01）;IL-4水平与IL-5、IL-13水平呈正相关（P < 0.01）;IL-5水平与IL-13水平呈正相关（P < 0.01）;IL-2水平与TGF-β1水平呈正相关（P < 0.05）。结论 喘息婴幼儿存在Th1/Th2失衡,表现为Th2优势表达;IL-4、IL-5、IL-13、TGF-β1及IgE共同参与了婴幼儿喘息性疾病的发病过程。喘息婴幼儿存在气道炎症,与喘息发作次数、是否存在哮喘高危因素及病原学检测是否阳性无关。