本科生神经生物学实验教学的探讨（摘要）

为了使本科学生能够更加有效和全面地掌握神经生物学研究的技能和方法,以适应神经科学快速发展的需要,我们进行了本科生神经生物学实验教学的探讨.     

肿瘤坏死因子基因多态性与变应性鼻炎相关性探讨

目的　探讨变应性鼻炎 (Allergicrhinitis,AR)患者中肿瘤坏死因子基因 (Tumornecrosisfactor,TNFβ)基因多态性与变应性鼻炎相关性 .方法　利用聚合酶链式反应技术对 6 9例AR及 10 3例正常对照者的TNF基因进行扩增 ,以cfoI进行限制性酶切图谱分析 .结果　①AR患者TNFβ1 / 1 频率占 8.7% ,低于正常对照组的 2 5 .2 % ,(p <0 .0 5 ) ,其余各型与正常对照组无明显差异 (p >0 .0 5 ) .②AR病人中TNFβ等位基因 1 的频率占 36 .9% ,2 的频率占 6 3.1% ,与正常对照组的 1 为 4 8.1%、2 为 5 1.9%有显著差异 (p <0 .0 5 ) .结论　提示TNFβ等位基因 1 与AR的发病呈负关联 ,2 与AR的发病呈正关联     

人CYP3A4第9外显子基因突变频率的检测

目的建立一种简便、准确、实用的人CYP3A4第9外显子基因突变频率的检测方法，并了解汉族人CYP3A4第9外显子的分布特点．方法应用聚合酶链反应（PCR）特异性扩增人CYP3A4第9外显子基因序列，扩增产物用限制性内切酶Hinf Ⅰ酶切，琼脂糖凝胶电泳后，观察酶切位点的限制性片段长度多态性（RFLP）图谱．结果运用PCR—RFLP法检测了92名汉族人CYP3A4第9外显子基因点突变，其中野生型纯合子频率为85．9％，杂合子频率为14．1％，突变型纯合子频率为O．突变等位基因频率为0．0706．结论该方法简便、快速、准确，适合于一般实验室检测及大规模的人群调查，汉族人CYP3A4第9外显子也存在相同的突变位点．     

MDR1 C3435T基因多态性的检测

目的检测汉族人MDR1 C3435T基因的分布情况.方法应用PCR技术对正常人MDR1 C3435T基因进行扩增以Mbo I进行限制性酶切图谱分析.结果汉族人MDR1 C3435T基因中,表现型T/T频率14.42%,表现型T/C40.54%,表现型C/C 45.04%.MDR1 C3435T基因T频率0.3469,基因C频率是0.6531.结论汉族人MDR1 C3435T基因的分布有自已的特点.     

HLA-DR4与类风湿关节炎的相关性探讨

目的探讨HLA-DR4与类风湿关节炎(RA)的相关性.方法采用特异性引物聚合酶链反应方法对广东地区汉族人群52例类风湿关节炎患者及100例正常健康者的HLA-DR4基因进行分析,并测定其基因频率.结果 HLA-DR4基因在52例类风湿关节炎患者中的基因频率(48.1%)显著高于其在100例正常对照组中的基因频率(19.6%,p<0.01).结论 HLA-DR4基因与广东地区人群的类风湿关节炎易感性有关联.     

α1-抗糜蛋白酶信号肽基因与阿尔茨海默病相关性初步探讨

目的探讨阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)患者中的α1-抗糜蛋白酶基因多态性及其与AD的相关性.方法利用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术对48例AD患者及89例对照者的α1-抗糜蛋白酶信号肽基因进行分型,进而进行AD与α1-抗糜蛋白酶信号肽基因多态性的相关分析.结果①AD病人α1-抗糜蛋白酶基因中,基因型A/T占27.1%,明显低于对照组的51.7%(p<0.01,RR=0.355),T/T占60.4%,明显高于对照组的37.1%(p<0.01,RR=2.576),A/A占12.5%,与对照组11.2%无明显差异(p>0.05,RR=1.086).②AD病人中α1-抗糜蛋白酶信号肽基因等位基因A的频率为26.0%、相对危险率(RR)为0.594,T的频率为74.0%、RR为1.683与对照组的A为37.1%、T为62.9%差异无显著性意义(p>0.05).结论 AD病人中α1-抗糜蛋白酶信号肽基因基因型T/T(AACT*T/T)频率明显高于正常人,与AD存在正相关;而AACT*A/T频率则明显低于正常人,与AD存在负相关.     

广东汉族人β2-肾上腺素能受体基因Gln27Glu多态性

目的 探讨β2-AR 16位点基因多态性在广东汉族人群中的分布．方法 应用聚合酶链反应技术对122例正常人β2-肾上腺素能受体基因Gln27Glu进行扩增并进行图谱分析．并结合文献进行了不同种族间的分析比较．结果 广东汉族人群β2-AR基因27位点多态性分布频率：Gln／Gln基因型占36．88％，Gln／Glu基因型占52．46％，Glu／Glu基因型占10．66％．结论 广东汉族人群存在出β2-AR Gln27Glu基因多态性，其分布频率与英美高加索人群有一定差异．     

肿瘤坏死因子基因多态性与变应性鼻炎相关性探讨

目的探讨变应性鼻炎(Allergic rhinitis,AR) 患者中肿瘤坏死因子基因(Tumor necrosis factor,TNFβ)基因多态性与变应性鼻炎相关性.方法利用聚合酶链式反应技术对69例AR及103例正常对照者的TNF基因进行扩增,以cfoI进行限制性酶切图谱分析.结果①AR患者TNFβ1*/1*频率占8.7%,低于正常对照组的25.2%,(p<0.05),其余各型与正常对照组无明显差异(p>0.05).②AR病人中TNFβ等位基因1*的频率占36.9%,2*的频率占63.1%,与正常对照组的1*为48.1%、2*为51.9%有显著差异(p<0.05).结论提示TNFβ等位基因1*与AR的发病呈负关联,2*与AR的发病呈正关联.     

载脂蛋白E基因多态性与阿尔茨默病的关系探讨

目的 :探讨阿尔茨默病 (AD)患者的载脂蛋白E(ApoE)基因的分布 ,分析它们的相互关系。方法 :利用聚合酶链式反应 -限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)技术对AD患者和相应健康对照的ApoE基因进行分型 ,从而进行AD与ApoE等位基因多态性的关联分析。结果 :AD病人ApoE等位基因ε4 占 2 0 .74% ,明显高于正常人对照组的 7.6 4% ,而ε3 则占 6 4.6 3% ,低于正常人对照组的 84.12 % ,均有极显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 :ApoE等位基因中 ,ε4 可能为AD的易感因子 ,而ε3 则为保护因子。     

MTHFR基因C677T和A1298C多肽与直肠癌的遗传易感性

目的探讨叶酸代谢中的亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因单核苷酸多肽与直肠癌风险的关系。方法以聚合酶链反应和限制性片段长度多态方法,对56例直肠癌患者和143例正常人对照的MTHFR基因C677T和A1298C基因型进行检测分析其对直肠癌风险的相关性。结果在正常对照组中,MTHFRC677TCC、CT、TT基因型频率分别为62·90%、35·08%和2·12%,而在直肠癌病人中分别为58·93%、26·77%和14·26%。A1298C与A1298C基因型在病例和对照中的分布差异无显著性意义。MTHFRA1298C基因型在病例和对照中的分布差异无显著性意义,1298变异基因型与677变异基因型之间无协同作用。结论MTHFR单核苷酸多肽不是中国人直肠癌的遗传易感性因素。