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目的:构建ABH1重组蛋白原核表达载体及建立ABH1蛋白纯化技术。方法:应用PCR技术从人的cDNA文库扩增出ABH1基因片段,并加入限制性内切酶位点和终止子,进而将其插入到原核表达质粒pET-15b中,构建ABH1/15b原核表达克隆,最后用IPTG诱导其在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,用镍柱亲和纯化,离子交换层... 相似文献
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恶性肿瘤是当前威胁人类生命健康的主要疾病之一,尽管手术治疗联合化疗/放疗能够延长患者的生存期,但是这些治疗手段也会损伤正常细胞,产生很多不良反应,再加上很多恶性肿瘤具有侵袭转移和复发等特征,因此,急需发展新的方法来治疗肿瘤患者[1]。随着人们对免疫系统及其调节方式的逐 相似文献
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<正>新型冠状病毒肺炎(COVID-19)因其传播速度快、传染性强及人群易感等特点,已被我国列入乙类传染病并按甲类传染病管理[1]。发热门诊隔离留观的患者具有发热等类新冠症状且面对环境的改变对心理可能带来负面影响。故本研究探讨COVID-19流行期间发热门诊隔离留观患者焦虑抑郁情绪及相关因素,以期尽早识别高危患者并进行心理干预治疗。 相似文献
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目的:建立真核表达载体pEGFP-4.1N稳定转染的乳癌MDA-MB-231细胞系,观察4.1N在MDA-MB-231细胞中的表达和定位.方法:真核表达载体pEGFP-4.1N转化到大肠杆菌中进行扩增,酶切鉴定插入片段后进行测序.脂质体法将重组质粒转染至MDA-MB-231细胞中,经G418筛选抗性克隆,利用倒置荧光显微镜观察融合蛋白在细胞中的定位,并用Western blot检测融合蛋白的表达.结果:真核表达载体pEGFP-4.1N的酶切片段经琼脂糖电泳和测序鉴定结果正确.G418筛选14 d后获得pEGFP-4.1 N稳定转染的MDA-MB-231抗性克隆.荧光显微镜下观察到融合蛋白在MDA-MB-231阳性克隆的细胞质中表达.核内不表达.Western blot亦检测到4.1N融合蛋白的表达.结论:成功建立了pEGFP-4.1N稳定转染的乳痛细胞系MDA-MB-231阳性克隆. 相似文献
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背景与目的:目前,已在多种人类肿瘤中发现蛋白4.1家族成员表达异常.本研究旨在通过检测蛋白4.1家族成员(4.1R/B/G/N)在3株转移能力不同的人乳腺癌细胞株MCF-7、T-47D和MDA-MB-231中的表达和定位,探讨蛋白4.1家族成员与乳腺癌细胞转移能力之间的关系.方法:采用Western blot检测蛋白4.1家族成员在MCF-7、T-47D和MDA-MB-231细胞中的表达;免疫荧光标记对蛋白4.1家族成员在3株细胞中的表达进行定位.结果:4.1R/B/G在3种细胞系中均有表达,在T-47D细胞中的表达量均明显高于在MCF-7细胞中的表达量(P<0.05):但在高转移性的MDA-MB-231细胞中它们的表达水平转而下降.4.1N在T-47D细胞中的表达量明显低于在MCF-7细胞中的表达量(P<0.01),而在MDA-MB-231细胞中的表达则几乎检测不到,提示4.1N表达下调或缺失与乳腺癌细胞转移能力密切相关.4.1R/B/G/N在MCF-7和T-47D细胞中均主要定位于细胞膜及胞间连接处,同时4.1B在细胞核中也有表达;而在高转移的MDA-MB-231细胞中蛋白4.1家族成员均定位于细胞质中,提示蛋白4.1家族成员亚细胞定位的改变可能是乳腺癌细胞转移过程中的重要事件.结论:4.1N表达缺失和蛋白4.1家族成员亚细胞定位的改变与乳腺癌细胞MDA-MB-231的高转移性密切相关. 相似文献
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恶性肿瘤是严重威胁人类健康的重大疾病,随着人们对肿瘤发生机制和免疫微环境认识的深入,在传统手术、放疗和化疗的基础上寻求新的诊断和治疗手段是当前研究的热点。多肽药物相较于小分子化学药物和单抗药物,具有独特的性质,可以作为激素和抑制剂,也可以作为多肽疫苗激活抗肿瘤免疫反应,且有望成为很好的分子诊断工具。综述抗肿瘤多肽药物的作用机制、结构优化、靶向多肽和自组装,以及未来的发展趋势等方面的研究进展。
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