新生早期甲状腺功能减退大鼠心肌甲状腺激素受体mRNA表达的实验研究

目的探讨新生早期甲状腺功能减退（简称甲减）对大鼠心肌发育过程中甲状腺激素受体（TR）各亚型mRNA表达的影响。方法Wistar雌鼠从怀孕15d开始每天经胃灌注1％丙硫氧嘧啶2．5ml，复制甲减仔鼠动物模型，分别于各时间点称体质量后处死仔鼠，取心脏。放射免疫分析法（RIA）动态监测各组大鼠血清FT3、FT4水平，FQ—PCR方法检测各组心肌TR各亚型mRNA的表达差异。结果与对照组比较，甲减大鼠心肌TRα1 mRNA表达量在出生后0、21、45d分别下调90％、15％、36％（tod=8．33，t21d=2．58，t45d=3．25，P〈0．05），表达峰值于生后2周延迟出现。甲减大鼠心肌TRα2 mRNA表达量在出生后0、14、21、45d分别上调22％、72％、82％、36％（t0d=3．89，t14d=11．88，t21d=13．90，t45d=6．19，P〈0．05），表达峰值于生后2周延迟出现。甲减大鼠心肌TRβ1 mRNA表达量在出生后0、14、21、45d分别下调75％、62％、68％、60％（t0d=38．96，t14d=5．22，t21d=17．23，t45d=5．43，P〈0．05），表达变化趋势与对照组一致。结论新生早期甲减大鼠心肌上TR mRNA的异常表达可能与甲减性心脏病的发病机制密切相关。     

G蛋白信号转导异常与阿尔茨海默病

AD是一种以进行性认知功能减退为特征的神经退行性疾病.流行病学调查表明:在65岁以上人群中AD的发病率为5%～10%,85岁以上的老年人中发病率约为25%[1].随着人口老龄化趋势的进展,AD已成为威胁人类生命的主要疾病,其致死率仅次于心脏病、肿瘤和中风.     

针刺治疗老年性痴呆的G蛋白信号转导途径研究

老年性痴呆(AD)是老年人最常见的一种慢性进行性退化性神经变性疾病,以认知和记忆功能下降,生活能力减退及各种精神症状和行为障碍为其三大主要临床特征。据流行病学统计,AD发病率随年龄的增长面增高,65岁人群患病率约5%,85岁以上人群患病率则为20%,而且随着全球人口老龄化的加重,患病人数将逐渐增多。目前,在西方国家及我国大城市,AD已成为仅次于心脏病、恶性肿瘤、中风的第四位死亡病因。该病严重地危害老年人的健康和生活质量,     

ODF诱导骨髓细胞向破骨细胞分化

目的:研究小鼠骨髓细胞在破骨细胞分化因子(ODF)和单核巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)的诱导刺激下向破骨细胞诱导分化的新方法。方法:分离小鼠骨髓细胞,ODF、M-CSF诱导培养,在倒置显微镜下观察细胞形态变化,酒石酸酸性磷酸酶(T-ACP)阳性表达。结果:小鼠骨髓细胞在ODF和M-CSF作用下,表现为长梭形和圆形细胞增多,增大。体外培养6d,有多核T-ACP阳性细胞产生。结论:小鼠骨髓细胞在ODF和M-CSF共同诱导作用下分化成破骨细胞,为体外研究破骨细胞的分化发育和功能调节提供新方法。     

SAMP8海马CA1区突触素表达及针刺的干预作用

目的观察早老性痴呆模型8月龄快速老化小鼠(SAMP8)海马突触素的表达变化及针刺对其表达的影响。方法将30只SAMP8分成P8组和针刺组,以同月龄抗老化小鼠SAMR1为R1组,采用HE染色法观察各组小鼠海马CA1区锥体细胞形态的改变,以real-time PCR和免疫组织化学法观察各组小鼠海马CA1区突触素基因和蛋白的表达情况。结果 SAMP8海马CA1区的锥体细胞排列、形态及结构都明显受到损伤,针刺对其有改善作用。进一步研究发现P8组海马突触素基因和蛋白的表达量与R1组相比明显减少(P0.05),而针刺能增加其表达量(P0.05)。结论 SAMP8海马突触存在分子和形态学的损伤,针刺可通过增加突触素的表达发挥治疗阿尔茨海默病(AD)的作用。     

截短型人骨保护素在CHO-DHFR-细胞中的表达及活性测定

目的:构建截短型人骨保护素(hTOPG)哺乳动物表达载体pcDNA3.1/DHFR-hTOPG, 实现其在CHO-DHFR-细胞中的高效表达, 获取生物活性较高的重组蛋白.方法:利用基因重组技术构建重组表达载体pcDNA3.1/DHFR-TOPG, 按LipofectamineTM 2000试剂盒说明书转染CHO-DHFR-细胞, 以含50 mL/L透析血清的IMDM培养基培养, 氨甲喋呤(MTX)加压筛选高表达细胞株, ELISA法和RT-PCR法测定重组蛋白和基因的表达, 并采用破骨细胞样细胞(OLC)诱导分化抑制实验测定重组蛋白的体外活性.结果:重组蛋白的表达量最高可达6 mg/L·72 h , 且能够明显抑制OLC生成(P<0.05).结论:截短型人OPG在CHO-DHFR-细胞中成功高效表达, 并具有良好的生物学活性, 为进一步的实验研究和临床应用提供了基础.     

黄地散颗粒联合“三焦”针法改善阿尔茨海默病髓海不足证的临床疗效

目的:观察黄地散颗粒联合"三焦"针法改善阿尔茨海默病(AD)髓海不足证的临床疗效及对氧化应激和炎症反应的影响。方法:将106例患者随机按数字法分为对照组和观察组各53例。两组均采用盐酸多奈哌齐片,5 mg·d-1,睡前服用,4周后根据反应增加至10 mg·d-1。对照组采用"三焦"针法。观察组针法同对照组,并口服黄地散颗粒,4 g/次,3次/d。两组疗程均为连续治疗3个月。采用简易精神状态量表(MMSE)和阿尔茨海默病评定量表(ADAS-cog)评价患者认知能力;采用日常生活功能量表(ADL)评价日常生活能力;进行髓海不足证评分;氧化应激包括超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),总抗氧化能力(T-AOC)和总抗氧化能力(T-AOC),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX),炎症因子包括白细胞介素-1β(IL-1β),IL-6,肿瘤坏死因子(TNF)-α和γ-干扰素(IFN-γ)。以上指标均为治疗前后各评价1次。结果:经Ridit分析,观察组临床疗效和中医证候疗效均优于对照组(P0.05);治疗后观察组患者MMSE评分高于对照组(P0.01),ADAS-cog,ADL和髓海不足证评分均低于对照组(P0.01);观察组患者T-AOC,SOD和GSH-PX水平均高于对照组,MDA水平低于对照组(P0.01);观察组患者血清IL-1β,IL-6,TNF-α水平和IFN-γ水平均低于对照组(P0.01)。结论:采用黄地散颗粒联合"三焦"针法能改善AD患者髓海不足证,可以增强患者的认知功能和日常生活能力,调节抗氧化应激反应及抗炎功能的作用。     

三焦针法对SAM小鼠血脑屏障通透性的改善作用及通过RhoA/ROCK通路的调控作用

探讨三焦针法对SAM小鼠血脑屏障（BBB）通透性及RhoA/Rho相关蛋白激酶（ROCK）的影响,并阐明其作用机制。     

三焦针法通过激活SDF-1α/CXCR4通路对快速老化模型小鼠学习和记忆能力的改善作用

探讨三焦针法对快速老化模型（SAMP8）小鼠神经功能和基质细胞衍生因子1α/趋化因子受体4（SDF-1α/CXCR4）通路的改善作用,探讨三焦针法在SAMP8小鼠中的作用机制。     

心复康联合骨髓间充质干细胞对心脏干细胞CD31和VEGFR2蛋白表达的影响

[目的] 观察心复康联合骨髓间充质干细胞(BMSC)调节心脏干细胞(CSC)内皮细胞标记物CD31(CD31)和血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)的蛋白表达。[方法] 原代获取BMSC,制备并鉴定心复康含药血清,酶联免疫吸附法(ELISA法)检测心复康对BMSC分泌基质细胞衍生因子1α(SDF-1α)的影响。组织块贴壁法分离CSC,并行流式细胞分选及免疫荧光鉴定。利用Transwell小室建立细胞共培养体系,实验分为对照组、心复康组、抑制剂组,蛋白质印迹法(Western Blot)分析各组CSC的CD31和VEGFR2蛋白表达情况。[结果] 与另两组相比,心复康组CSC的CD31和VEGFR2蛋白表达显着增高,差异有统计学意义(P<0.05).[结论] BMSC经心复康干预后,可促进CSC的CD31和VEGFR2蛋白表达,提示SDF-1α/CXCR4轴为其作用机制之一。