β-arrestin 1促进急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞衰老

目的:探讨β-arrestin1对急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)细胞衰老的作用及其可能机制。方法:收集T-ALL患者骨髓样本和对照样本,应用RT-PCR和Western blot检测β-arrestin1在T-ALL患者中的表达,统计分析β-arrestin1的表达与T-ALL患者临床病理特征及预后的关系。构建稳定敲低或过表达β-arrestin1 Jurkat细胞株,应用CCK-8检测Jurkat细胞数,β-半乳糖苷酶染色(SA-β-gal)法检测β-arrestin1对Jurkat细胞衰老的作用,应用RNA-Seq与KEGG数据交叉分析筛选可能的信号通路,Western blot验证信号通路关键位点。结果:β-arrestin1在T-ALL患者样本中表达降低(P 0.01),且β-arrestin1的表达与外周血白细胞数(r=-0.601)、外周血原始细胞数(r=-0.516)和髓外浸润(r=-0.359)呈负相关,与化疗敏感性(r=0.393)呈正相关。利用敲低或过表达β-arrestin1的稳定Jurkat细胞株发现,β-arrestin1降低Jurkat细胞数(P 0.05),促进Jurkat细胞衰老(P0.05)。RNA-Seq与KEGG数据交叉分析发现,T-ALL患者中β-arrestin1可能通过Ras-p16-pRb-E2F1调控细胞衰老。经Western blot验证发现,β-arrestin1促进Ras和p16的表达,抑制pRB和E2F1的表达(P 0.05)。结论:β-arrestin1可能通过Ras-p16-pRb-E2F1促进T-ALL细胞衰老,延缓T-ALL疾病进程,这为阐释T-ALL新的发病机制提供理论依据。     

重庆部分地区苯丙氨酸羟化酶缺乏症患儿基因突变分析

目的 探讨重庆部分区域苯丙氨酸羟化酶(phenylalanine hydroxylase,PAH)缺乏症基因突变频率和特征,为PAH缺乏症的诊断及治疗提供依据.方法 回顾性分析2014年1月1日至2020年10月25日在重庆医科大学附属儿童医院确诊的45例PAH缺乏症患儿,将苯丙氨酸羟化酶缺乏症分型为经典型苯丙酮尿症(phenylketonuria,PKU)、轻度PKU及轻度高苯丙氨酸血症(hyperphenylalaninemia,HPA),分析其二代高通量测序及多重连接依赖探针扩增技术检测的PAH基因突变情况以及Sanger测序技术对其父母相应变异位点的验证结果.结果 ①45例高苯丙氨酸血症患者中43例均检出2个变异位点(40例为复合杂合突变,3例为纯合突变),且所检测突变位点均来自父母;另外2例为杂合突变,仅检测到1个变异位点.②45例PAH缺乏症患者共检出34种突变,主要以错义突变(52.9％)为主,c.728G＞A突变频率最高(15.9％,14/88),其次为c.158G＞A(11.4％,10/88)、c.1197A＞T(9.1％,8/88)及c.721C＞T(9.1％,8/88).高频突变的区域在第7外显子,包含4种突变,26个变异位点(29.5％).③13例经典型PKU患者检测到11种PAH基因突变,其中突变频率最高的为c.728G＞A(8/25,32％);8例轻度PKU患者检测到9种PAH基因突变,c.728G＞A(3/15,20％)突变频率最高;24例轻度HPA患者共检出24种PAH基因突变,其中c.158G＞A(10/48,20.8％)突变频率最高.结论 重庆市PAH缺乏症患者PAH基因突变以复合杂合为主,主要变异类型为错义突变,具有明显的热点突变(c.728G＞A、c.158G＞A、c.721C＞T及c.1197A＞T).     

PPARγ和FOXO3a在雌激素受体阳性乳腺癌的表达及临床意义

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和叉头框蛋白O3a(FOXO3a)在雌激素受体(ER)阳性乳腺癌组织的表达及临床意义。方法 回顾性分析89例女性ER阳性乳腺癌患者的临床资料,采用免疫组化染色法检测ER阳性乳腺癌组织中ER、孕激素受体(PR)、Ki-67、PPARγ和FOXO3a表达,荧光原位杂交法检测人表皮生长因子受体2(HER2)表达,并分析PPARγ和FOXO3a表达与ER阳性乳腺癌患者临床病理特征的关系。结果 PPARγ和FOXO3a表达均与淋巴结转移和TNM分期有关(P<0.05),而与患者年龄、病变部位、肿瘤直径、组织学分级以及PR、HER2和Ki-67表达无关(P>0.05)。ER阳性乳腺癌组织中PPARγ与FOXO3a表达呈正相关(r_s=0.321,P<0.05)。结论 PPARγ、FOXO3a与ER阳性乳腺癌发生、发展有关,有望成为潜在的治疗靶点。     

APL2008方案治疗43例儿童急性早幼粒细胞性白血病的临床分析

目的：评价采用的APL2008方案治疗儿童急性早幼粒细胞白血病（APL）的治疗现状及预后。方法对2008～2014年新诊43例A PL患儿临床资料进行回顾性分析,对进入A PL2008方案治疗的28例患儿进行疗效统计,总结治疗方案和现状。结果本组患儿中位年龄8岁4个月,男28例,女15例,以感染、贫血、出血、发热伴肝脾淋巴结肿大为主要临床表现。标、中、高危组所占比例分别为27．9％、48．8％和23．3％。11例诊断弥散性血管内凝血（DIC ）。骨髓形态学检查以早幼粒细胞（PMC）异常升高为主。37例患儿免疫分型共同特征表现为CD33、CD117、MPO高表达。43例进行 PML／RARα融合基因检测,阳性率100％,同时进行细胞遗传学分析37例阳性,其中t （15;17）（q22;q11．2）经典遗传学异常28例,有9例少见核型。43例患者中,早期死亡4例,都死于颅内出血,11例早期放弃,28例可进行疗效分析A PL患儿中,死亡2例,复发2例,失访1例。血液学缓解（HCR）率为96．4％,4年总生存（OS）率和无事件生存（EFS）率分别为（85．9±7．6）％和（80．4±8．8）％,去除不规范治疗患儿,2年OS和EFS率分别为（94．7±5．1）％和（88．9±7．4）％。结论 APL的临床表现以贫血、出血、发热伴浸润为主要特征。APL的PML／RARa融合基因与形态学诊断、免疫分型及染色体符合率分别为95．3％、90．2％和86．5％。APL2008方案治疗儿童A PL预后较好。     

β-arrestin1激活JNK信号通路促进慢性髓细胞白血病细胞K562增殖

目的：以CML K562细胞为研究对象,探索β-arrestin1促进CML细胞增殖的相关信号通路。方法以β-arrestin1慢病毒载体感染CML K562细胞,形成稳定的K562-siβ1和K562-β1细胞,及非特异性siRNA对照K562-Ctrl细胞。以此为研究对象,利用细胞计数与CCK-8实验检测细胞增殖能力;Western blot检测蛋白表达;免疫共沉淀（Co-IP）实验检测蛋白间的相互作用。结果细胞计数与CCK-8实验结果显示K562-β1细胞增殖与细胞存活率能力显著高于K562-Ctrl,而K562-siβ1显著低于K562-Ctrl。Western blot结果表明β-arrestin1特异性增强磷酸化JNK表达,JNK抑制剂SP600125能抑制p-JNK表达和K562细胞增殖;免疫共沉淀实验表明β-arrestin1能与Src结合。结论 CML K562细胞中β-arrestin1与Src结合,促进JNK信号通路激活,从而促进细胞增殖。     

IL-35在宫颈癌根治术后复发和转移中的预测价值

目的:探讨宫颈癌手术前后血清IL-35的差异表达及其表达变化对宫颈癌复发和转移的预测作用。方法:收集2009年1月至2014年1月就诊于本院行宫颈癌手术切除的Ia–IIa期宫颈癌患者73例,同期选择73例本院体检的健康患者(正常对照组),ELISA法检测上述两组以及患者术前、术后血清中IL-35的表达水平,同时根据术后是否复发比较术后复发和稳定组IL-35的含量,分析其与临床预后的关系。结果:与正常对照组比较,IL-35在手术前后患者血清中的表达升高,P<0.05。术后患者血清中的表达(213.79±23.89)pg/m L较术前(398.71±31.09)pg/m L降低,术后复发患者血清IL-35的表达(374.25±27.74)pg/m L较稳定期患者(183.65±34.51)pg/m L明显增高,P<0.05。IL-35高表达的患者的无病生存时间(DFS)为9.115月,总生存时间(OS)为18.031月,较低表达者明显缩短,P均<0.05,Cox分析示IL-35的表达可作为DFS和OS的独立预后因子。结论:手术前后血清IL-35的水平可作为宫颈癌根治术后预测复发和转移的可能生物标志物。     

病例193:反复肺栓塞1例

正2018年第6期(截稿日期2018年5月1日)患者,女,48岁,既往体健,因"突发胸闷、呼吸困难4h"于2015年6月入成都中医药大学附属医院(我院)胸痛中心;急诊科快速床旁检验示心肌酶及心肌损伤标志物阴性,D-二聚体10(参考值0.5)mg/L;动脉血气分析示pH 7.084,二氧化碳分压(PCO2)41.5mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),氧分压(PO2)63.5mm Hg,     

头孢吡肟对多重耐药铜绿假单胞菌体外联合药物敏感试验研究

探讨头孢吡肟(FEP)分别与美罗培南(MEM)和环丙沙星(CIP)联合应用对多重耐药铜绿假单胞菌(MDRPA)的体外抑菌作用的影响,为临床治疗MDRPA提供依据。方法 采用棋盘法设计,通过琼脂平板稀释法测定抗菌药物对58 株临床分离的MDRPA 的最低抑菌浓度(MIC),通过计算分级抑菌浓度指数评价药物体外联合抑菌效果。结果 FEP与MEM联合后,表现为协同作用的为32.8%,相加作用的为46.6%,无关作用的为20.6%,无拮抗作用;FEP 与CIP联用后,表现为协同作用的为20.7%,相加作用的为51.7%,无关作用的为27.6%,无拮抗作用。联合应用的药物组合,各药MIC₅₀ 均明显降低,浓度-累积抑菌率曲线均表现为左移。结论 FEP分别与MEM和CIP联用均可以提高各自对MDRPA抗菌作用的敏感性。     

建立HPLC法检测血清尿刊酸并探讨其对儿童白血病的意义

目的建立利用高效液相色谱法(HPLC)检测血清尿刊酸(UCA)的方法,探讨血清UCA浓度对儿童急性白血病的临床意义。方法建立HPLC测定血清UCA浓度的方法,设定与优化HPLC色谱条件并进行验证。收集确诊为急性初诊白血病和非肿瘤血液疾病患者各90例的血清,检测UCA浓度,比较两组间的差异,并探究UCA浓度在白血病中的临床意义。结果成功优化并建立HPLC检测血清UCA方法,流动相乙腈:20 mmol/L KH2PO4,p H3.7为5∶95(V/V),流速为1.2 m L/min,检测波长264 nm的HPLC色谱条件下,反式尿刊酸(trans-UCA)和顺式尿刊酸(cis-UCA)浓度在0.125 g/L~5 g/L范围内与洗脱峰面积呈良好线性关系(R2分别为0.999 6和0.999 9)。批间测量和批内测量的相对标准偏差(RSD%)5%。与对照组相比,急性白血病患儿血清中cis-UCA和trans-UCA浓度明显增高(P0.001);与cis-UCA相比,trans-UCA对急性淋巴细胞白血病(ALL)的危险度分级诊断更有价值。结论 HPLC方法可以测定血清UCA浓度,儿童急性白血病血清中的UCA浓度可为诊断与预后提供线索,具有重要临床意义。