结核杆菌热休克蛋白肽段对胶原诱导性关节炎保护作用的研究

目的：研究结核杆菌HSP65肽段（P256-270）和结核杆菌HSP70肽段（P111-125）对类风湿关节炎动物模型——胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠的保护性作用。方法：结核杆菌HSP肽段滴鼻免疫大鼠，观察其对CIA的防治效果，观察指标包括关节炎指数评分、关节病理学分析、酶联免疫斑点实验（ELISPOT）检测脾脏淋巴细胞分泌细胞因子（IL4、IFN-γ）水平、流式细胞术分析外周血T淋巴细胞亚群及酶联免疫吸附实验（ELISA）测定血清中抗CⅡ抗体水平。结果：分别经结核杆菌HSP65和HSP70肽段滴鼻免疫的实验组大鼠，与阳性对照组比较，关节炎指数明显下降（P〈0．05），病理变化减轻，抑制性细胞因子IL-4水平升高（分别为P〈0．05和P〈O．01），而炎性细胞因子IFN-1水平降低（P〈0．01），CD4^＋／CD8^＋T细胞比值降低（P〈0．05），血清中抗CIⅡ抗体水平也降低（分别为P〈0．05和P〈0．01）。结论：应用结核杆菌HSP65肽段或HSP70肽段能减轻CIA大鼠的症状和体征，其作用机制与调节T细胞的功能有关，此研究可为探讨人类RA新的免疫治疗方法提供依据。     

临床输血病历分析

随着医疗法律法规和技术操作规范的完善,以及医院质量管理年活动的开展,病历文书质量作为医疗质量的一个重要环节,也是医疗质量检查的重要内容,其重要性已备受关注。而输血病历是临床治疗疾病、抢救患者实施输血的原始记录,也是处理与输血有关医疗纠纷的法律依据之一。认真做好输血病历的规范化工作,不仅是安全输血的需要,也是保护患者、医院、供血单位和医护人员合法权益的需要。为了解本院临床输血现状,临床输血存在的问题,以采取相应对策,进一步提高本院输血病历规范化工作水平,笔者对本院输血病历进行调查分析,报告如下。     

血小板输注无效的预防及处理

随着输血技术的发展、成分输血的推广,血小板在临床上的应用越来越广泛,血小板输注已成为临床输血治疗的重要手段之一。然而反复输注血小板后,部分患者会出现血小板输注无效（platelet transfusion refractoriness。PTR）。现就其原因及防治对策综述如下。     

胶原诱导性关节炎的评定与T细胞受体-热休克蛋白70DNA疫苗的保护作用

目的:纯化制备含有编码T细胞受体(TCR)Vβ5.2/8.2基因片段与结核杆菌热休克蛋白(HSP)70的一段保守序列P111-125的嵌合DNA疫苗,观察其对胶原诱导性关节炎的保护性作用。方法:实验于2006-07/2007-02在首都医科大学免疫学系实验室完成。①实验分组:36只Lewis大鼠随机分为6组,即正常对照组、胶原诱导性关节炎对照组、空质粒组、pTARGET-TCRVβ5.2-HSP70重组质粒治疗组、pTARGET-TCRVβ8.2-HSP70重组质粒治疗组及pTARGET-TCRVβ5.2-HSP70和pTARGET-TCRVβ8.2-HSP70重组质粒联合治疗组,每组6只。②实验方法:大量纯化制备重组DNA疫苗pTARGET-TCRVβ5.2-HSP70、pTARGET-TCRVβ8.2-HSP70和空质粒pTARGET,观察重组DNA疫苗对胶原诱导性关节炎的保护效果,包括关节炎指数评分、Eli-spot法测定脾细胞分泌的干扰素γ和白细胞介素4的水平、ELISA法测定血清中抗Ⅱ型胶原抗体的水平;光镜下观察大鼠后肢足关节的病理学变化。结果:36只Lewis大鼠均进入结果分析。重组DNA疫苗pTARGET-TCRVβ5.2-HSP70和pTARGET-TCRVβ8.2-HSP70对胶原诱导性关节炎有较好的保护性作用,与胶原诱导性关节炎对照组相比,关节炎指数(P<0.05)下降,炎性细胞因子干扰素γ水平(P<0.05)和抗Ⅱ型胶原抗体水平(P<0.01)降低,抑制性细胞因子白细胞介素4水平(P<0.05)升高,病理学改变较轻。且两种重组质粒联合治疗的效果要比单种质粒好。结论:重组DNA疫苗pTARGET-TCRVβ5.2-HSP70和pTARGET-TCRVβ8.2-HSP70能明显减轻胶原诱导性关节炎大鼠的关节炎症状和病理改变,二者联合应用效果更佳。     

T细胞受体DNA疫苗对胶原诱导性关节炎大鼠保护性作用的研究

目的纯化制备含有编码T细胞受体（TCR）Vβ5．2和TCRVβ8．2基因片段的DNA疫苗，研究其对胶原诱导性关节炎（CIA）的保护性作用。方法大量纯化制备重组DNA疫苗pTargeT—TCR Vβ5．2、pTargeT-TCR Vβ8．2和空质粒pTargeT，观察重组DNA疫苗对CIA的保护效果，包括关节炎指数评分、大鼠后肢足关节的病理学分析、用Eli—spot法观察脾细胞分泌的干扰素（IFN）-γ和白细胞介素（IL）-4水平的改变、用流式细胞术分析外周血CD4^＋t细胞和CD8^＋T细胞亚群及其比值的变化、用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血清中抗Ⅱ型胶原（CⅡ）抗体水平的改变等。用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）及免疫组织化学染色法检测目的基因的转录和表达。结果重组TCRDNA疫苗pTargeT-TCRv135．2和pTargeT—TCRV138．2对CIA大鼠有较好的保护性作用，关节炎指数明显下降（P〈．05），炎性细胞因子IFN-γ水平（P〈0．05）、CD4^＋／CD8^＋比值（P〈0．05）和抗CⅡ抗体水平（P〈0．01）降低，而抑制性细胞因子IL-4水平升高（P〈0．05），病理改变亦较CIA对照组轻。且两种重组质粒联合治疗较单种重组质粒的效果更好。并且在注射部位的肌肉组织内检测到重组蛋白的转录和表达。结论重组表达载体pTargeT-TCR V β5．2和pTargeT-TCR Vβ8．2能明显减轻CIA大鼠的关节炎症状和体征，且二者联合应用效果更佳。