反相高效液相色谱法测定紫杉醇浓度及其稳定性考察

目的　建立了反相高效液相谱法测定紫杉醇浓度的方法。 方法 　以 C1 8为固定相 ,甲醇 -(5∶ 3∶ 2 )为流动相 ,检测波长 2 3 0 nm。 结果 　紫杉醇在 10～ 10 0μg· ml- 1 范围内呈良好的线性关系。 2 4h内对紫杉醇 -5 %葡萄糖溶液的浓度进行检测 ,结论 　紫杉醇在紫杉醇 -5 %葡萄糖溶液中具有良好的稳定性     

RP-HPLC法测定二甲双胍的血药浓度

目的建立反相高效液相色谱法测定血清中二甲双胍浓度的方法。方法含内标的血清经1.5mL乙腈沉淀,上清经3mL的三氯甲烷萃取浓缩后直接进样。色谱条件为:色谱柱:SymmetryC18;流动相¨乙腈-磷酸缓冲液(0.06M,pH7.3)(1¨3)[内含0.5mM的SDS;10mM的三乙胺(用0.1M的磷酸调pH为7.3)];检测波长;235nm。结果二甲双胍在0.05~1.6μg·mL-1范围内呈良好的线性关系,加权回归系数r=0.99991。日内变异系数4.90%,2.59%,1.03%,日间变异系数8.56%,4.62%,0.72%,方法的相对回收率在97.43~110.88%。结论该方法可用于二甲双胍血药浓度的测定。     

阻断Hedgehog信号通路对HepG2.2.15细胞增殖的影响

目的探讨环耙明阻断Hedgehog信号通路对肝癌细胞HepG2.2.15增殖的影响。方法培养肝癌细胞HepG2.2.15,用5μmol/L、15μmol/L、25μmol/L环耙明处理HepG2.2.15细胞24h、48h、72h,采用MTT检测环耙明对细胞活力的影响;EDU法检测细胞DNA合成情况;Real-timePCR法检测细胞Gli1的表达情况。结果用5μmol/L、15μmol/L、25μmol/L浓度的环耙明处理HepG2.2.15细胞24h、48h、72h后,MTT检测结果显示细胞活力降低,较空白组差异明显(P<0.05);EDU法检测结果显示25μmol/L的环耙明作用于细胞不同时间后,HepG2.2.15细胞的DNA合成率下降,与空白组相比差异有统计学意义(P<0.01);Real-time PCR法实验结果显示5μmol/L、15μmol/L、25μmol/L浓度的环耙明处理组与对照组相比,Gli1表达水平明显降低(P<0.05)。结论不同浓度环耙明能抑制HepG2.2.15细胞的增殖,减少HepG2.2.15细胞的DNA合成率;其作用机制可能与HepG2.2.15细胞中Gli1、mRNA的表达水平下降有关。     

儿童反复呼吸道感染影响因素分析

目的探讨儿童反复呼吸道感染(RRTIs)的相关影响因素,为儿童RRTIs的有效防治提供依据和策略。方法选择183例RRTIs患儿纳入病例组,85例同期门诊体检健康儿童纳入对照组,对以上所有儿童可能导致RRTIs的相关因素进行临床资料调查,并对血清微量元素铁、锌、钙、铜,血清25-羟维生素D[25-(OH)-D]水平及肺炎支原体(MP)-IgM抗体进行检测,并对两组儿童的结果进行对比,对RRTIs的相关影响因素进行多因素Logistic回归分析。结果病例组中剖宫产、母乳喂养、湿疹、变应性鼻炎、哮喘、被动吸烟、多次使用抗菌药物儿童所占百分比与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,哮喘、被动吸烟、多次使用抗菌药物为儿童RRTIs的危险因素,母乳喂养为儿童RRTIs的保护因素。病例组血清微量元素铁、锌、钙及血清25-(OH)-D水平均明显低于对照组,MP-IgM抗体阳性率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论积极控制儿童哮喘,远离被动吸烟,避免抗菌药物滥用,尽量母乳喂养,及时合理补充微量元素铁、锌、钙及维生素D制剂,均衡营养,警惕MP感染,并积极规范治疗,对儿童RRTIs的有效防治非常重要。     

促发低氧性肺动脉高压的新机制--肺微动脉的血管胰岛素敏感性降低及其信号障碍

目的观察低氧诱导大鼠肺微血管内皮细胞（PMVEC）,是否同样存在肺血管的胰岛素敏感性变化？并探讨潜在的分子机制。方法：采用低压低氧法建立低氧性肺动脉高压（HPH）大鼠模型,14只雄性SD大鼠随机分为：正常对照组和HPH组（低氧4周）,每组7只大鼠（n=7）测定两组平均肺动脉压（mPAP）及胰岛素诱导的血管舒张效应。原代培养大鼠PMVEC,分为常氧（21％O2,37℃）和低氧（10％O2,37℃）处理,分别培养6 h、24 h、48 h和96 h收集细胞以Western blot检测Tribbles同源蛋白3（TRB3）、过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR^y）及胰岛素的磷脂肌醇3激酶／蛋白激酶B／内皮一氧化氮合酶（P13K／Akt／eNOS）信号通路蛋白水平,培养基上清检测一氧化氮（NO）生成量。结果：与正常对照组比较,低氧组mPAP明显升高,胰岛素诱导的肺动脉血管舒张作用明显减弱（P〈0．05,P〈0．01）。PMVEC在含胰岛素的内皮培养基培养不同时间,低氧组与常氧组相比,培养6 h NO量明显升高,培养24 h后有所下降,随低氧时间的延长下降幅度增大（P〈0．01）;随低氧时间延长,P13K-p85、p-Akt、p-eNOS表达逐渐下降,低氧时间越长下降幅度越明显,与NO生成相一致,p-ERKl／2随低氧时间延长表达明显升高;随低氧时间延长TRB3表达增加显著,而PPARY表达减少（P〈0．05,P〈0．01）。而不同培养时间常氧组间NO量及上述蛋白表达无显著性差异。结论：低氧可诱导大鼠PMVEC内TRB3的过表达从而负性调控PPARl,引起下游胰岛素信号通路受损,造成肺血管内皮功能异常,进而促进HPH发生。     

骨髓间充质干细胞移植对大鼠血管成形术后内膜增生及炎症因子表达的影响

目的探讨大鼠血管成形术后,骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对血管新生内膜增生及炎症因子表达的影响。方法制作大鼠颈动脉球囊损伤模型48只,随即分成对照组和BMSCs组,每组24只。标记的BMSCs移植到大鼠,对照组注射等量的PBS液。术后取血管组织行免疫组织化学染色检测核转录因子-κBp65(NF-κBp65)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达;HE染色血管组织检测血管形态学变化。术后ELISA检测血清炎症因子的浓度。结果术后14 d,BMSCs组损伤血管局部NF-κBp65、PCNA及α-SMA的表达均较对照组明显减少(P<0.05)。术后28 d,BMSCs组新生内膜面积、新生内膜/中膜面积均较对照组显著减少(P<0.05)。与对照组比较,术后BMSCs组血清TNF-α的浓度明显降低(P<0.01),而IL-10水平显著升高(P<0.01)。结论 BMSCs可发挥免疫调节作用,改善血管炎症反应,抑制血管新生内膜增生。     

HBx-siRNA 下调 HepG2．2．15细胞中血管内皮生长因子的表达

目的：研究 HBx干扰质粒pSIHBV/X对肝癌细胞HepG2．2．15中VEGF表达的影响。方法将针对HBx基因的干扰质粒载体pSIHBV/X转染HepG2．2．15细胞,用Real-time PCR检测转染前后细胞 HBx、VEGF基因 mRNA 表达,Western blot法检测细胞 VEGF蛋白表达。结果Real-time PCR检测结果显示,转染后24 h、48 h、72 h实验组 HepG2．2．15细胞中 HBx基因mRNA相对表达水平分别为（121．13±8．72）、（83．17±7．930）、（56．33±6．17）;24 h、48 h、72 h实验组HepG2．2．15细胞中 VEGF基因 mRNA 相对表达水平分别为（76．26±7．16）、（59．17±6．420）、（42．17±4．33）;Western blot检测结果显示,24 h、48 h实验组 HepG2．2．15细胞中VEGF蛋白相对表达水平分别为（0．357±0．025）、（0．218±0．051）。Western blot及RT-PCR结果显示,与对照组相比实验组中VEGF mRNA 及蛋白的表达量明显下调,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论靶向HBx的siRNA干扰质粒能抑制 HepG2．2．15细胞中VEGF mRNA和蛋白的表达。     

快速反相高效液相色谱法测定血清中卡马西平的浓度

目的 建立了一种简单的卡马西平萃取方法和高效的反相高液相色谱法.方法 血清中卡马西平用乙醚-石油醚(9∶1)单步提取;色谱柱:HYPERSIL ODS(5μm,4.6mm×25mm),流动相:乙睛-0.06mol·L-1 NaAc-HAc(pH4.3)=36∶64(内含0.05%的三乙胺).检测波长285nm,室温,内标:艾司唑仑.结果 卡马西平在2-16μg·mL-1范围内呈良好的线性关系(r=0.9998),平均回收率99.91%(n=9,RSD=1.87%).结论 此方法提取步骤少,方法简单快速、专一性强、费用低,适合临床卡马西平的血药浓度监测.