以学生为中心的教学法在医学微生物学课程中的尝试

为提高教学质量,培养学生的综合素质,尝试以学生为中心进行医学微生物学教学模式改革。结果证明通过自主学习,学生不仅可以掌握本学科的基本理论知识,而且其分析解决问题的能力、查阅资料获取信息的能力及语言表达能力都得到了锻炼和提高。     

Toll样受体4介导牙龈卟啉单胞菌感染血管内皮细胞过程中的炎性作用

目的探讨Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)在牙龈卟啉单胞菌感染血管内皮细胞过程中所发挥的作用。方法用牙龈卟啉单胞菌分别感染正常EAhy926细胞和TLR4基因敲减的EAhy926细胞后,用RT-PCR和ELISA方法观察2种细胞产生白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素8(IL-8)的能力,用单核细胞黏附实验检测内皮细胞黏附单核细胞的作用。结果牙龈卟啉单胞菌能诱导2种细胞过度表达IL-6和IL-8,促进U937细胞的黏附(P<0.05);敲减了TLR4基因的EAhy926细胞受到牙龈卟啉单胞菌感染后,IL-6和IL8的产生以及单核细胞黏附作用明显低于正常的EAhy926细胞(P<0.05)。结论 TLR4在牙龈卟啉单胞菌引起EAhy926细胞炎性反应过程中具有重要作用。     

低氧增高小鼠脑组织内JNK1的磷酸化水平

目的 观察应激激活的蛋白激酶(JNK/SAPK)磷酸化水平在小鼠脑低氧预适应过程中的变化。方法 利用我室已建立的小鼠低氧预适应模型,制备重复低氧1～4次小鼠(H1～H4),结合应用SDS—聚丙烯酰胺凝胶蛋白电泳(SDS—PAGE)、蛋白印迹(Western bolt)等生化技术,半定量检测海马和大脑皮层内JNK的磷酸化水平。结果 小鼠海马组织内JNK1的磷酸化水平随着低氧次数(H1～H4)的增加而明显增高,且与正常对照组(H0)相比具有统计学上的显意义(P<0.05);而对于大脑皮层组织内JNK1磷酸化水平的增高,则只在低氧1、2次(H1和H2)组有在统计学上具有显著意义(P<0.05);此外,在小鼠脑组织内,尤其是海马组织内未检测到磷酸化JNK2/3。结论 JNK1可能在脑低氧预适应过程中具有重要作用。同时,海马和大脑皮层组织内JNK1磷酸化水平对重复性低氧刺激反应的不一致可能与它们对低氧耐受不同有关。     

人巨细胞病毒pp65在脑胶质瘤中的表达

目的 探讨人巨细胞病毒（HCMV）pp65在脑胶质瘤中的表达及其与肿瘤恶性程度的相关性.方法 手术获取64例脑胶质瘤标本（低级别胶质瘤27例,高级别胶质瘤37例）,免疫组织化学方法检测肿瘤组织中HCMV pp65蛋白表达,ELISA法检测高级别胶质瘤患者和正常人各20例外周血中HCMV-IgG抗体水平.结果 pp65在高级别胶质瘤中的阳性表达率明显高于低级别胶质瘤（97.3%和22%）,强阳性表达率以胶质母细胞瘤最高;高级别胶质瘤患者血清HCMV-IgG水平明显高于正常人群.结论 HCMV pp65在不同级别的脑胶质瘤中均有表达,且表达水平与肿瘤恶性程度相关.     

丝裂原活化蛋白激酶激活通路及其在蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛中的作用

蛛网膜下腔出血(SAH)后脑血管痉挛(CVS)的发病机制特别是信号转导机制是目前研究的热点,对SAH的临床治疗有非常重要的指导意义[1-4].丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs) 是一类存在于所有真核细胞的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,有MAPKs激酶的激酶(MKKKs)→MAPKs激酶(MKKs)→MAPKs的3级级联激活模式.MAPKs激活通路在真核细胞的信号转导过程中起着至关重要的作用,现就MAPKs激活通路的组成、分类及其在SAH后CVS中的作用概述如下.……     

急性缺氧预适应对小鼠大脑皮层和海马组织PKCγ膜转位的影响

目的 :被视为细胞内第三信使的蛋白激酶C(PKC)是由Takai于 1977年发现的 ,PKC是一类使底物蛋白内丝氨酸 /苏氨酸残基磷酸化、通过水解而被激活的蛋白激酶家族 ,只有与膜相连并与DAG结合才能活化。近年来 ,PKC在缺氧 /复氧及缺血 /再灌中的病理作用逐渐受到关注。早期的缺血 /缺     

p27~(Kip1)在RA诱导人神经前体细胞分化中的作用

目的观察全反式视黄酸(RA)对体外培养的人神经前体细胞的诱导作用,研究在这个过程中细胞周期调节蛋白p27Kip1、p21Cip1及相关分子cdk2、cyclinE的变化,探讨p27Kip1在RA诱导的人神经前体细胞分化过程中的作用。方法取12wk的人胚胎前脑纹状体,原代培养人神经前体细胞。在细胞进入对数生长期时给予1μmol·L-1RA诱导。在诱导的d1、3、7,用相差显微镜观察细胞形态的变化;用免疫细胞化学染色、RT-PCR等方法检测p27Kip1、p21Cip1及其相关的cdk2、cyclinE的变化。结果在RA诱导d3,人神经前体细胞形态发生变化,至d7时已接近成熟神经元形态。免疫细胞化学染色结果显示p27Kip1的表达在RA诱导d3增加,在RA诱导d7时明显增加,与未经RA诱导的细胞相比差异有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR结果显示,p27Kip1 mRNA的表达在RA诱导d3增加,并在RA诱导d5达到高峰,而p21Cip1 mRNA的表达在RA诱导后略呈下降趋势。cdk2、cy-clinE的mRNA水平在RA诱导前后没有明显变化。结论p27Kip1在RA诱导的人神经前体细胞分化过程中具有重要作用,并且其表达增加是通过转录水平调节的。     

变形链球菌对EAhy926细胞Toll样受体2和4及白细胞介素6和8表达的影响

目的 观察变形链球菌对EAhy926细胞Toll样受体2和4的表达及炎性细胞因子白细胞介素6和8分泌的影响,初步探讨Toll样受体表达与细胞因子产生之间的关系.方法 变形链球菌作用于EAhy926细胞,RT-PCR法检测EAhy926细胞Toll样受体2和4及白细胞介素6和8的mRNA表达;流式细胞术检测EAhy926细胞表面Toll样受体2和4的表达;细胞生物活性法和ELISA分别检测EAhy926细胞白细胞介素6和8的分泌;抗体阻断实验观察Toll样受体2和4的表达与白细胞介素6和8产生间的关系.结果 将变形链球菌作用于EAhy926细胞6 h,Toll样受体2和4的mRNA表达与加入的细菌量呈一定的剂量依赖关系,以细菌与细胞作用比例为100:1时,Toll样受体2和4的mRNA表达量最高(P<0.05).变形链球菌能诱导EAhy926细胞(100:1)Toll样受体2和4的mRNA和蛋白水平表达增强,在6 h达到高峰,12 h后又逐渐下降(P<0.01).结论 变形链球菌可上调EAhy926细胞Toll样受体2和4的表达,促进炎性细胞因子白细胞介素6和8的产生;白细胞介素6和8的产生与Toll样受体2和4的表达上调密切相关.     

链球菌蛋白对RAW264.7小鼠巨噬细胞免疫学活性的调节作用

目的:探讨链球菌蛋白对RAW264.7小鼠巨噬细胞免疫活性调节及其相关作用机制.方法:不同浓度的链球菌蛋白与RAW264.7小鼠巨噬细胞共同作用后,采用MTT 法检测细胞的增殖活化;吞噬中性红试验观察巨噬细胞的吞噬功能;生物化学法检测巨噬细胞上清液中TNF-α和IL-6 的含量;RT-PCR法检测细胞中TNF-α、IL-6和Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)的mRNA表达情况;流式细胞术检测细胞表面TLR2和TLR4的表达强度.结果:链球菌蛋白对巨噬细胞的生长增殖和吞噬功能有较强的刺激作用(P<0.05),促进TNF-α和IL-6的表达和分泌(P<0.05),并可上调巨噬细胞表面模式识别受体TLR2和TLR4的表达(P<0.05).结论:链球菌蛋白通过刺激RAW264.7小鼠巨噬细胞的增殖,增强细胞吞噬活性以及诱导细胞因子的产生等发挥其免疫调节作用.     

变形链球菌培养上清对EAhy926细胞增殖活性和TLR4表达的影响

目的观察变形链球菌培养上清对EAhy926细胞的增殖活性及TLR4表达的影响。方法变形链球菌培养上清作用于EAhy926细胞,MTT法检测EAhy926细胞的增殖活性;RT-PCR法检测EAhy926细胞TLR4 mRNA的表达;流式细胞术检测EAhy926细胞表面TLR4的表达。结果不同浓度的变形链球菌培养上清作用6 h可促进EAhy926细胞的增殖(P0.05),但12 h后可明显抑制该细胞的生长(P0.05),呈现显著的时间和剂量依赖性。变形链球菌培养上清作用于EAhy926细胞后,TLR4 mRNA和TLR4蛋白表达量随着作用时间延长而逐渐增高,在16 h达到高峰,24 h后又逐渐下降(P0.01)。结论变形链球菌培养上清可明显抑制EAhy926细胞的生长,上调该细胞TLR4的表达。