地黄不同方法提取物制剂降糖作用的实验研究

水煎煮中药是中成药生产中最常用的提取方法 ,亦符合传统中医用药习惯。我们的研究表明 ,地黄、黄芪、丹参配伍的中药复方具有改善糖尿病患者的症状和一定的降糖作用[1、2 ] 。鉴于地黄水煮提取物的量很大 ,超出生药干重量的 5 0 % ,不适用于制成胶囊剂。为了减少地黄提取物的总量 ,而又不影响其效果 ,我们观察了地黄水提、醇提及水醇法提取物制剂对小鼠肾上腺素诱发高血糖的降糖作用 ,以寻找合适工艺。1　材料与方法1.1　药物　全部中药材购自贵阳市药材公司。 (1)丹参水煮二次 ,第一次 2h ,第二次 1h ,过滤 ,合并滤液 ,浓缩至相对密度为 1…     

大鼠肾小球系膜细胞原代培养与鉴定

目的: 原代培养及鉴定大鼠肾小球系膜细胞(GMC),探索分离、培养GMC的最佳条件.方法: 对大鼠双肾灌洗后,筛网滤过分离肾小球,并用Ⅳ型胶原酶消化处理,然后种植法体外培养大鼠肾小球.同时采用免疫细胞化学和免疫荧光技术,检测亚代GMC的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)、细胞角蛋白(Cytokeratin)、Ⅷ因子相关抗原抗体的表达,鉴定GMC,并绘制其生长曲线.结果: 种植4 d后,约80%肾小球贴壁,可见卵圆形上皮细胞生长,18 d左右镜下细胞多呈星状或三角形并伴有不规则的突起,21 d后细胞生长密集, 细胞团簇之间形成网络.免疫细胞化学和免疫荧光证实抗α-SMA及抗Vimentin染色阳性,而抗Cytokeratin、抗Ⅷ因子抗体染色为阴性.GMC亚代倍增时间为4 d. 结论: 结果表明,用改良的培养方法成功率高,培养的细胞为大鼠肾小球系膜细胞.     

高血糖和蛋白尿促进肾小管上皮细胞凋亡

目的:探讨糖尿病(DM)病程中高血糖和蛋白尿与肾小管上皮细胞凋亡的关系.方法:SD大鼠随机分为对照组和糖尿病组,注射链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病,分别于糖尿病2周、4周、8周、16周和24周处死动物;检测血糖和24 h尿蛋白量,免疫组织化学检测Bcl-2和Bax蛋白表达,TUNEL法检测细胞凋亡.结果:与对照组相比,...     

丹芪合剂对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞骨形态发生蛋白-7和蛋白激酶Cα表达的影响

目的 观察丹芪合剂对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞骨形态发生蛋白-7 (BMP-7)、蛋白激酶Cα(PKCα)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和纤维连接蛋白 (FN) 表达的影响,以期进一步探讨丹芪合剂防治糖尿病肾病的作用机制。方法 将 SD 大鼠随机分为对照组、模型组和丹芪合剂组,以链脲佐菌素(STZ)复制糖尿病大鼠模型,喂养 12 周后处死大鼠,生化方法测定大鼠血糖、血肌酐 (Scr) 和 24 h 尿蛋白及肾脏指数;PAS 染色观察肾脏病理改变;免疫组化检测肾小管上皮细胞 BMP-7、PKCα、AngⅡ和 FN 蛋白的表达;RT-PCR 方法检测肾皮质 BMP-7、PKCα和AngⅡ mRNA 的水平。结果 与对照组相比,模型组大鼠血糖、Scr、24 h 尿蛋白及肾脏指数均显著升高,肾小管上皮细胞 PKCα、AngⅡ的蛋白及 mRNA、FN 蛋白的表达明显增多,而 BMP-7 蛋白和 mRNA 的表达明显减少;丹芪合剂组上述升高指标均显著低于模型组,并且 PKCα mRNA 未见表达,同时 BMP-7 蛋白和 mRNA 的表达却明显增加;相关分析显示模型组、丹芪合剂组肾小管上皮细胞 BMP-7 分别与 PKCα、AngⅡ和 FN 蛋白的表达呈显著负相关 (P＜0.05)。结论 丹芪合剂可能通过下调肾小管上皮细胞 PKCα和 AngⅡ及上调 BMP-7 表达,使 FN 的沉积减少,从而发挥对糖尿病大鼠肾小管间质损伤的保护作用。     

健康老年人个体外周血液自然杀伤细胞活性的研究

自然杀伤细胞(NK细胞)是存在于■啮动物和人体内的一类不需要经过抗原致敏不依赖抗体和补体介导对靶细胞有直接杀伤作用的淋巴细胞亚群。由于NK细胞能够非特异地识刚病毒、八侵的细菌等感染性病原体和外源性细胞、肿瘤细胞对机体抗感染和免疫监视等功能起重要作用。近十年来国外对NK细胞的生物学性状与效应有一些报道,国内有少量报告。我们研究了老年个体NK细胞活性以及性别对NK细胞活性的影响,现报道如下:     

糖尿病大鼠肾小管TGF-β1和MAPK1/3表达的动态观察

目的:动态观察糖尿病大鼠肾小管转化生长因子-β₁(TGF-β₁)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK_1/3)和纤维连接蛋白(FN)的变化,探讨其在肾小管间质病变发生发展中的作用。方法:将大鼠分为正常对照组;糖尿病1周、2周、4周和8周组。用链脲菌素复制糖尿病模型;免疫组化法检测肾小管间质TGF-β₁、MAPK_1/3和FN的表达;Western blot检测TGF-β₁蛋白质;HE和PAS染色,光镜观察动物肾组织形态;生化法测定血糖、血肌酐及尿蛋白。结果: 正常肾小管可见少量MAPK_1/3表达,而未见TGF-β₁表达。糖尿病1周可见肾小管上皮细胞表达TGF-β₁,并且随着病程发展而增加。MAPK_1/3和FN从糖尿病两周开始表达亦呈持续增加,并且与TGF-β₁及肾重/体重比呈正相关。糖尿病1周时MAPK_1/3与TGF-β₁无显著相关,但与FN呈正相关。 结论:大鼠糖尿病状态诱导肾小管表达TGF-β₁并激活MAPK_1/3,MAPK_1/3介导高糖和TGF-β₁的信号而促进FN的生成和沉积,在糖尿病肾脏肥大和纤维化中可能起重要作用。     

肾小管间质α-SMA表达与大鼠肾炎预后的关系

目的:了解肾毒血清肾炎大鼠肾小管间质α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达与肾炎预后的关系及强的松治疗对其影响。方法:复制大鼠加速型肾毒血清肾炎(NTN)模型,随机分为非治疗和强的松治疗组,在肾炎第7、30、60和90d分别测定血清肌酐(Scr),尿蛋白(UP),肾小管间质形态和α-SMA的表达及分析相互关系。结果:肾小管间质α-SMA的表达与Scr,UP和肾小管间质病变相一致,强的松可抑制α-SMA的表达。结论:α-SMA的表达与肾炎病变的发展有密切关系,强的松影响α-SMA的表达,减少间质细胞的异化,在一定程度上改善肾炎的预后。     

黔园九号芦笋对环磷酰胺所致大鼠骨髓抑制的保护作用

研究口服芦笋干粉对腹腔注射环磷酰胺造成大鼠骨髓抑制的影响。结果表明环磷酰胺注射５天后芦笋组大鼠外周血白、红细胞数的减少明显轻于对照组，注射十天后芦笋组骨髓有核细胞增生活跃，外周血白、红细胞数量的回升也明显快于对照组。本研究表明芦笋对环磷酰胺造成的骨髓抑制有保护作用。     

血浆、肾皮质血栓素A_2和前列环素与实验性肾炎发生发展的关系

血浆、肾皮质血栓素Ａ＿２和前列环素与实验性肾炎发生发展的关系贵阳医学院病理生理学和病理学教研室（贵阳５５０００４）张国忠，李保罗，桂华珍，孙渝，杨国雄血栓素Ａ＿２（ＴＸＡ＿２）和前列环素（ＰＧＩ＿２）与肾疾病的关系越来越受到人们的重视，但一些研究主要...     

肾组织缺失对大鼠血清锌铜的影响

观察了１／４，１／２和３／４肾切除大鼠术后第１０周血清锌、铜水平及肾功能、血浆白蛋白和尿蛋白，并与行假手术未切除肾脏的动物相比较，发现１／４和１／２肾切除动物血清锌铜无明显变化，而３／４肾切除的动物发生了肾功能衰竭，出现显著的蛋白尿和低蛋白血症，血清锌、铜均下降。相关性分析表明血清锌与血浆白蛋白呈正相关，与尿蛋白呈负相关，而Ｓｃｒ和ＢＵＮ无明显相关，血清铜则与这些测定值不显示明显相关。研究提示肾组织缺失时血清锌降低可能是由于其载体———白蛋白的减少及随尿蛋白的大量丢失所致，而可能不受Ｓｃｒ和ＢＵＮ的影响。血清铜水平降低的机制有待于进一步研究