谷氨酸在分离的小鼠皮层突触连接体的释放

目的分析兴奋性神经递质谷氨酸在体外分离的小鼠皮层突触连接体的释放。方法解剖分离小鼠的大脑皮层,组织经匀浆后使用3层147μm的尼龙网筛进行过滤,离心后重悬沉淀为突触连接体。谷氨酸释放检测实验根据谷氨酸脱氢酶酶促反应原理进行,利用多功能读数仪读取产物烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)的荧光值。采用谷氨酸标准品绘制标准曲线,使用制备的突触连接体进行谷氨酸释放检测,进行3次独立重复实验。结果谷氨酸标准品浓度与荧光值具有良好的线性关系。新鲜制备的突触连接体在加入去极化剂KCl后,释放谷氨酸显著增加并逐渐达到平台期,加入Triton X-100裂解突触连接体后释放谷氨酸明显增加。冻融1次的突触连接体失去活性,与新鲜制备的突触连接体的谷氨酸释放曲线不同。结论对小鼠皮层突触连接体的提取方法进行了改良,检测和分析了兴奋性神经递质谷氨酸在分离制备的小鼠皮层突触连接体的释放。     

慢性氟中毒,砷中毒及氟砷联合中毒大鼠脊髓神经丝蛋白免疫组织化学比较研

用神经丝（ＮＦ）免疫组织化学方法研究了大鼠氟、砷及氟砷联合中毒后３５天、３个月和６个月脊髓神经元的病理性改变。结果：中毒３５天氟砷联合中毒组ＮＦ免疫组织化学反应阴性（－），３个月以后反应增强，呈（＋＋），而氟中毒或砷中毒组中毒３５天反应即呈强阳性（＋＋＋），３个月以后反应减弱，呈（＋＋），且随中毒时间延长，反应进一步减弱，呈（＋），从结果推测中毒早期氟与砷之间有协同作用，中毒晚期有拮抗作用。     

神经生长因子在食管鳞癌细胞中的表达及分泌

目的 探讨神经生长因子（NGF)与食管鳞癌细胞分化的相关性。方法 采用有限稀释法分选出圆形和梭形单细胞克隆,采用无血清悬浮培养获得细胞球细胞, 贴壁的Eca109细胞分别在含血清和不含血清培养基中培养48h;分别采用反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR)技术和免疫印迹法,检测NGF在食管鳞癌细胞中mRNA水平和蛋白水平的表达;免疫荧光技术检测NGF在食管鳞癌细胞中的表达定位;免疫组织化学法检测食管鳞癌组织中NGF的表达定位;用酶联免疫吸附法（ELISA）检测NGF在Eca109细胞培养基中的分泌情况。结果 在Eca109细胞中能检测到NGF的mRNA水平和蛋白水平的表达,其中NGF在细胞球细胞中的mRNA水平和蛋白水平的表达量最高。食管癌组织中检测到NGF表达于细胞质。Eca109细胞在无血清培养条件下能够分泌NGF,且明显高于含血清培养基中的含量。结论 食管癌细胞系Eca109表达并分泌NGF,并且食管癌组织中表达NGF,NGF可能在维持食管鳞状细胞癌的干细胞特性发挥了重要作用。     

不同分化阶段诱导性多能干细胞移植实验研究进展

诱导性多能干细胞(i PSCs)是由动物体细胞重编程得到的具有胚胎干细胞特性的全能干细胞。近年来,随着多能干细胞诱导技术的不断优化以及体外分化技术的飞速发展,多种分化状态的多能干细胞被用于移植实验。我们结合最新研究进展,阐述各种分化阶段诱导性多能干细胞用于动物移植治疗的优缺点,以及最新移植方法所存在的问题。     

斑马鱼视网膜再生研究进展

哺乳动物视网膜损伤后仅有非常有限的自我修复能力。与哺乳动物不同,硬骨鱼类如斑马鱼的视网膜则具有旺盛的再生能力。斑马鱼视网膜损伤后,能够再生其丢失的所有类型的神经元和胶质细胞,并恢复大部分视力。研究表明,斑马鱼视网膜再生的细胞来源是Müller细胞。近年来,关于斑马鱼视网膜Müller细胞去分化及其增殖的分子机制和信号通路的研究取得了许多新的进展。我们就斑马鱼视网膜再生的研究历史、损伤模型和再生细胞来源以及调控的分子机制等做一综述。     

甘肃天祝藏族自治县居民血脂水平调查

目的调查甘肃天祝藏族自治县居民血脂水平及血脂异常发生率。方法采用整群随机抽样方法,选择长期居住该县境内的18~74岁汉族和藏族居民479人为研究对象。按年龄分为18~34岁、35~44岁、45~54岁、55~64岁、65岁以上5个年龄组。所有调查对象均进行血脂等指标测定,并根据2007年中国成人血脂异常防治指南血脂测定标准对血脂异常与否进行判断。结果该地区居民血脂异常发生率为42.17%,血脂异常类型主要以高甘油三酯(TG)、低高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)为主。血脂异常发生率以45~54岁组最高。包括男女性高总胆固醇(TC)血症、高TG血症、高LDL-C血症均为人群最高发生率。血脂异常率表现为男性随年龄增长持续降低,女性随年龄增长总体呈上升趋势。45岁以上女性血脂水平及血脂异常发生率增长速度均快于男性。汉族和藏族血脂异常发生率以及4项血脂指标异常率比较差异均无显著性。结论甘肃天祝藏族自治县居民具有较高的血脂异常发病率,不同性别的血脂异常发病率和类型有较大差异。     

转录因子HOXA5在乳腺癌细胞中的下游信号通路

目的探究转录因子HOXA5在乳腺癌进展中的作用。方法构建过表达HOXA5的稳定转染BT549和SUM159细胞系,在稳转BT549细胞系中利用Transwell检测细胞的转移能力;Western blotting检测上皮-间质转化(EMT)相关蛋白表达水平的变化;平板克隆实验检测细胞的增殖能力;转录组测序技术(RNA-seq)进一步分析HOXA5的调控基因,利用软件Cluster 3.0,Tree View和DAVID生物信息数据库(DAVID Bioinformatics Resources)以及Enrichr分析京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路,绘制热图(heatmap)。结果 BT549细胞系中,稳定转染HOXA5后的实验组细胞迁移能力显著降低(P0.001),且上皮标志物E-cadherin蛋白表达水平显著上调,间质标志物N-cadherin,Twist1、Slug蛋白表达水平显著下调;平板克隆结果表明,实验组形成的克隆数目明显减少(P0.05),克隆大小明显降低。结论 HOXA5通过促进细胞由间质向上皮转化,抑制乳腺癌细胞迁移,并且抑制细胞增殖;HOXA5通过调节糖脂代谢途径调节癌细胞增殖,并且还通过调节细胞运动和黏附相关的基因抑制肿瘤细胞的迁移,通过肿瘤坏死因子(TNF)信号通路发挥抗肿瘤作用。总之,转录因子HOXA5对乳腺癌的发展和恶化起着显著的抑制作用。     

猪脂肪源间充质干细胞诱导成脂分化及Krüppel样因子2的表达

目的旨在阐明猪脂肪源间充质干细胞(AMSCs)在诱导成脂分化过程中Krüppel样因子2(KLF2)的表达模式。方法采用I型胶原酶消化法处理猪脂肪组织,经原代和传代培养分离、纯化和扩增AMSCs,用流式细胞仪检测AMSCs纯度,在倒置显微镜下用形态学和油红O染色法检测AMSCs的成脂分化,用实时定量PCR检测KLF2的表达模式,并与过氧化物酶体增殖物激活受体2(PPARγ2)的表达进行了比较。结果分离、纯化的AMSCs,其间充质干细胞表面抗原CD29、CD44和CD105表达量分别为91.7%、95.1%和95.6%,而造血干细胞表面抗原CD34表达量仅为3.39%;在诱导分化2d后,个别细胞质中出现小脂滴,且含脂滴的细胞数量和脂滴量随诱导时间的延长而增加,在诱导分化第18天成脂分化率达48.2%;在诱导分化第2天、第8天和第16天,KLF2的表达量分别为1.84±0.206、1.07±0.072和0.83±0.095,而PPARγ2 mRNA的表达量分别为3.06±0.542、13.22±0.5736和15.11±1.073。结论获得纯度较高的AMSCs,具有良好的成脂分化潜能,KLF2的表达量在成脂分化早期的前脂肪细胞阶段增加,成脂分化开始后逐步减少,KLF2作为脂肪分化负调控转录因子而发挥作用。     

锥形束CT研究正畸治疗前后的单侧后牙正锁合的髁突变化

目的 应用锥形束CT(CBCT)研究分析单侧后牙正锁合患者的双侧髁突形态及其在关节窝内位置的差异,以及正锁合解除后,患者髁突形态及位置的代偿性改建情况,以期为正畸临床诊疗提供早期依据。方法 选择单侧后牙正锁合18～28岁患者20例为实验组,同期选择安氏Ⅰ类轻度拥挤错颌18~30岁患者25例为对照组,进行面部锥形束CT拍摄,利用3D Examvision成像系统软件进行三维重建,描记测量髁突形态及位置的点和线,对7个不同的测量值进行统计学分析。结果 正畸治疗前,对照组左右两侧髁突形态及其在关节窝内的位置差异无统计学意义（P＞0.05）,实验组正锁合侧关节窝深度及髁突高度高于非锁合侧,差异具有统计学意义（t=13.271,t=15.278, P＜0.01）。正畸治疗正锁合并稳定保持3个月后,实验组正锁合侧关节前间隙、关节后间隙变化与治疗前相比差异具有统计学意义（t=5.524,t=-5.119,P＜0.01）,关节前间隙治疗前大于治疗后; 关节后间隙治疗前小于治疗后。实验组非锁合侧治疗前后髁突形态及其位置变化的差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 单侧后牙正锁合患者双侧髁突形态及其在关节窝内的位置存在差异,矫治正锁合并稳定保持3个月后,锁合侧关节有向前下移动的趋势,而髁突形态并无明显变化。     

西藏世居藏族男青年形态面指数分析

目的探讨西藏世居藏族男青年的形态面指数特征。方法按照国际学术界规定的方法,对西藏世居的242例藏族男青年面宽和形态面高进行活体测量,并计算形态面指数。结果不同年龄段藏族青年的面宽和形态面指数存在显著差异(P0.05或P0.01),形态面指数与年龄呈正性相关(P0.01)。结论藏族青年的形态面指数以超阔面型为主(38.4%),阔面型(33.5%)和中面型(19.4%)次之。