基于RNA干扰技术的多巴胺D2 受体低表达 的高催乳素MMQ 细胞模型构建

目的 利用 RNA 干扰技术建立多巴胺 D2 受体（D2R）低表达的高催乳素大鼠垂体瘤 MMQ 细胞模型。方法 设计 3 对可沉默 D2R 基因表达的小干扰 RNA（siRNA）序列,转染 MMQ 细胞,建立包 括 siRNA1 组、siRNA2 组、siRNA3 组、阴性对照（siNT）组和空白对照（CTRL）组的 5 组细胞模型,采用 Western blot 法检测各组 MMQ 细胞 D2R 蛋白表达。选择干扰高表达细胞株,加入溴隐亭 1 μmol/L 进行 干扰,采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法、Western blot 法及实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）法分别观 察干扰后 MMQ 细胞催乳素的分泌、催乳素蛋白相对表达量及催乳素 mRNA 水平。结果 5 组 D2R 蛋 白相对表达量比较,差异有统计学意义（F=19.936,P＜ 0.01）;其中 siRNA1 组、siRNA3 组 D2R 蛋白相对 表达量［（0.23±0.12）、（0.57±0.24）］与 siNT 组（0.81±0.24）、CTRL 组（0.94±0.21）比较,差异均有统计学 意义（均P＜ 0.01）;siRNA1 组、siRNA3 组对 MMQ 细胞的 D2R 蛋白表达抑制率分别为 74% 和 35%。干扰 后,siRNA 组、CTRL 组、siNT 组 MMQ 细胞催乳素分泌、催乳素蛋白相对表达量、催乳素 mRNA 水平比 较,差异均有统计学意义（F=10.898、7.485、7.898,均P＜ 0.05）;siRNA 组催乳素分泌高于 siNT 组、CTRL 组［（2.91±0.12）ng/ml 比（2.14±0.15）、（2.09±0.44）ng/ml］;siRNA 组催乳素蛋白相对表达量高于 siNT 组、 CTRL 组［（0.99±0.67）比（0.85±0.13）、（0.82±0.12）］;siRNA 组催乳素 mRNA 水平高于 siNT 组、CTRL 组 ［（1.00±0.07）比（0.69±0.09）、（0.73±0.14）］,差异均有统计学意义（均P＜ 0.05）。结论 基于 RNA 干扰 技术构建的 D2R 低表达的高催乳素 MMQ 细胞模型为目标药物治疗高催乳素血症的靶点研究提供了可 靠的细胞模型。     

甘丙肽抑制大鼠垂体腺瘤细胞体外侵袭性

目的 探讨甘丙肽对大鼠垂体腺瘤细胞侵袭性的作用及其受体机制.方法 提取大鼠垂体腺瘤GH3细胞RNA,反转录后测定甘丙肽及其3个受体亚型的表达情况;将大鼠垂体腺瘤GH3细胞分为对照组、甘丙肽药物处理组和选择性甘丙肽2型受体激动剂AR-M1896组,利用MTT方法检测对照组和实验组在给药后12、24和36 h各分组细胞活力...     

血管内皮生长因子及其受体表达水平下调增加垂体腺瘤卒中风险

目的 探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体在垂体腺瘤中的表达与垂体腺瘤卒中之间的关系。方法 本实验运用实时定量核酸扩增检测系统(real-time quantitative PCR,QPCR)检测了166例垂体腺瘤标本中VEGF及其受体mRNA的表达,结合病理结果,免疫组织化学和临床资料特点分组进行统计学分析。结果 出现肿瘤卒中的无功能腺瘤中VEGF和VEGF-3的表达水平降低与肿瘤卒中有关(P<0.05);VEGF-1和VEGFR-2表达水平与肿瘤卒中无明显相关(P>0.05)。结论 无功能垂体腺瘤的VEGF和VEGFR-3的表达下降与垂体腺瘤卒中有关。     

甘丙肽对幼年大鼠蓝斑神经元兴奋性的影响及作用机制

目的探讨甘丙肽(galanin,GAL)对幼年大鼠蓝斑神经元兴奋性的影响,研究甘丙肽与其受体(GalR)和钾离子通道的作用机制。方法制备幼年大鼠脑片,采用全细胞记录法记录灌流给予甘丙肽后,蓝斑神经元静息膜电位水平和自发动作电位的发放频率;灌流给予不同浓度甘丙肽2型受体(GalR2)激动剂AR-M1896和不同类型钾离子通道阻断剂后,研究甘丙肽对幼年大鼠蓝斑神经元兴奋性的影响。结果甘丙肽能够诱导蓝斑神经元膜电位发生超级化并抑制其动作电位的发放,但GalR2激动剂AR-M1896只有在高浓度(1μM)时才能够诱导蓝斑神经元膜电位发生轻微的超级化并减少动作电位的发放;电压依赖性钾通道阻断剂四乙胺(Tetraethylammonium,TEA)能够部分阻断甘丙肽的抑制作用,内向整流钾通道阻断剂Ba Cl2能够显著阻断甘丙肽的抑制作用,而其他钾通道阻断剂,如ATP敏感性钾通道阻断剂格列本脲(Glybenclamide)、大电导钙依赖的钾通道(BK通道)阻断剂北非蝎毒素(Charybdotoxin)、小电导钙依赖的钾通道(SK通道)阻断剂蜂毒明肽(Apamin)均未能阻断甘丙肽的抑制作用。结论甘丙肽能够抑制幼年大鼠蓝斑神经元的兴奋性,其抑制作用可能主要是通过甘丙肽1型受体(GalR1)产生的,并且这种抑制作用可能与TEA敏感的钾通道和内向整流钾通道相关,而ATP敏感的钾通道和钙依赖的钾通道不参与其中。     

神经肽Y基因多态性与5-羟色胺再摄取抑制剂疗效关联性

目的探讨神经肽Y(NPY)基因多态性rs16147与选择性5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRI)疗效之间的关系。方法对50例处于发作期、接受SSRI抗抑郁药物治疗的抑郁症患者,治疗3个月,应用汉密尔顿抑郁量表(HAMD-17)评定其症状严重性,每月评定一次。测定患者NPY基因多态性rs16147,采用重复测量的方差分析判断不同基因型与患者疗效之间的关系。结果抑郁症患者中,AA基因型9例,AG基因型20例,GG基因型21例。重复测量的方差分析,HAMD评分的基因型效应(F=3.08,P=0.059)和时间效应(F=308.18,P=0.000)。AA基因型的有效率88.9%,AG基因型的有效率75.0%,GG基因型70.0%。结论 NPYrs16147位点不同基因型之间抗抑郁疗效之间没有显著差异,但A等位基因型的患者疗效优于G等位基因型的患者。     

淫羊藿苷抗抑郁及对皮质酮致PC12细胞损伤的保护作用研究

目的：研究淫羊藿苷的抗抑郁及对皮质酮致PC12细胞损伤的保护作用。方法：采用大／小鼠强迫游泳、小鼠悬尾三种实验模型,将动物随机分为对照组、淫羊藿苷低剂量组、淫羊藿苷高剂量组、阿米替林组,观察药物对大／小鼠强迫游泳不动时间、小鼠悬尾不动时间的影响;并在细胞水平建立皮质酮损伤PC12细胞模型,观察淫羊藿苷的细胞保护作用。结果：在大／小鼠强迫游泳和小鼠悬尾实验中,淫羊藿苷可显著缩短大／小鼠的强迫游泳不动时间和小鼠悬尾不动时间,与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）;在皮质酮损伤PC12细胞的模型上,淫羊藿苷可显著提高PC12细胞的存活率,拮抗皮质酮诱导的细胞损伤作用。结论：淫羊藿苷具有明显的抗抑郁效果,其抗抑郁作用与神经细胞保护作用有关。     

甘丙肽在成年雄性小鼠睾丸和附睾中的表达定位研究

目的:研究甘丙肽在成年雄性小鼠睾丸和附睾中的表达和定位,探讨甘丙肽在雄性生殖器官中的作用。方法:采用免疫组化法检测甘丙肽在睾丸和附睾组织中的表达。结果:甘丙肽在成年小鼠睾丸和附睾组织中均有表达。睾丸组织间质细胞、支持细胞和各级生精细胞呈阳性染色,主要表达于胞膜及胞质;附睾管高柱状细胞、低柱状细胞的胞膜及胞质呈阳性染色,且甘丙肽在附睾体和尾部表达较强,在头部远段表达较弱。结论:甘丙肽在成熟小鼠睾丸和附睾组织中均有表达,其生理功能尚待阐明。     

下丘脑饮食中枢八肽胆囊收缩素对大鼠胃运动的调节作用及其机制分析

本文探讨下丘脑饮食中枢(摄食中枢——下丘脑外侧区,LH和饱中枢——下丘脑腹内侧区,VMH)八肽胆囊收缩素(CCK-8)对清醒大鼠胃运动的调节作用。胃收缩运动采用应力传感器记录;中枢和外周给药分别经脑内埋植注射套管和颈外静脉插管;用微电极记录