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1.
目的 研究促红细胞生成素(EPO)及其受体(EPOR)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况及其对NSCLC发生发展的影响.方法 qPCR、western blot检测EPO/EPOR在9种肺癌细胞系中的表达水平;MTT法检测rhEPO促细胞增殖的作用,流式细胞术检测rhEPO对细胞凋亡和周期的影响,Transwell检测细胞迁移;qPCR、western blot检测rhEP0对Cyclin D1和Cyclin A表达水平的影响.结果 EPO/EPOR在部分肺癌细胞中高表达,rhEP0促进高表达EPO/EPOR的肺癌细胞的增殖,而对肺癌细胞凋亡和迁移无影响,rhEP0诱导Cyclin D1表达,使用Jak2/Stat5抑制剂或干涉Jak2/Stat5后rhEP0作用消失.结论 高表达EPO/EPOR非小细胞肺癌通过Jak2/Stat5/Cyclin D1通路促进自身增殖.  相似文献   
2.
目的通过观察可溶性IL-13受体α2(sIL-13Rα2)对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠气道炎症的影响,了解sIL-13Rα2对哮喘潜在的治疗价值。方法 24只BALB/c小鼠随机分成正常对照组、哮喘组及sIL-13Rα2治疗组,哮喘组和sIL-13Rα2治疗组以鸡卵白蛋白(OVA)致敏和激发,建立哮喘模型,对照组用生理盐水代替OVA。sIL-13Rα2治疗组每次激发前30min腹腔注射sIL-13Rα2100μg,正常对照组及哮喘组则用生理盐水替代。比较各组支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数、肺组织学检查。结果与正常对照组相比,哮喘组BALF中细胞总数及嗜酸粒细胞百分比显著增加(P值均〈0.001),血清及BALF中IL-13明显增多(P值均〈0.001),病理示肺组织损害明显。与哮喘组相比,sIL-13Rα2治疗组BALF中细胞总数及嗜酸粒细胞百分比显著降低(P值均〈0.001),血清及BALF中IL-13明显减少(P值均〈0.001),病理示肺组织损害明显减轻。结论 sIL-13Rα2可明显减轻哮喘小鼠气道炎症。  相似文献   
3.
目的:应用酵母双杂交系统从人外周血白细胞cD-NA文库中筛选与转录因子Foxp3相互作用的蛋白,为进一步研究Foxp3的转录调控机制奠定基础。方法:首先构建pG-BKT7-Foxp3△2酵母双杂交诱饵载体,转化AH109酵母细胞,检测其毒性及自激活作用;然后将诱饵质粒与人外周血白细胞cDNA文库共转AH109酵母细胞,筛选了与Foxp3△2存在相互作用的蛋白。结果:成功构建了pGBKT7-Foxp3△2酵母表达载体,经转染AH109酵母细胞,无有毒性,无自激活作用。获得了40个阳性克隆,经生物信息学分析,其中9个具有开放读框。结论:应用酵母双杂交技术筛选出一组可与Foxp3△2相互作用的候选蛋白,为进一步研究Foxp3△2功能奠定了基础。  相似文献   
4.
目的 构建HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid的原核表达载体并鉴定其基因工程菌种稳定性.方法 应用PCR技术以pCMV-e23sFv-Fdt-tBid为模板扩增e23sFv-Fdt-tBid片段,并将其克隆人pET-22b原核表达载体;将该表达载体转化BL21大肠杆菌并挑取表达蛋白较高的克隆菌,划线接种传代50次;通过革兰氏染色方法、扫描电镜形态观察、菌种质粒酶切鉴定及蛋白诱导表达的Western blot分析鉴定e23sFv-Fdt-tBid免疫促凋亡蛋白表达工程菌的稳定性.结果 成功构建pET-22b-e23sFv-Fdt-tBid原核表达载体,并在BL21大肠杆菌中诱导表达;革兰氏染色方法、扫描电镜形态观察、菌种质粒酶切鉴定及Western blot法鉴定结果表明基因工程菌种稳定性良好,可以稳定表达免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid.结论 成功构建了HER2靶向免疫促凋亡蛋白原核表达载体,鉴定了表达该免疫促凋亡蛋白的基因工程菌种稳定性,为HER2靶向免疫促凋亡蛋白e23sFv-Fdt-tBid的应用研究奠定了基础.  相似文献   
5.
血管生长抑制因子基因的克隆及其在昆虫细胞中的表达   总被引:5,自引:1,他引:4  
目的;获得具有高活性的Angiostatin表达,为进一步研究及应用奠定物质基础。方法:用PCR法人纤维蛋白酶原plasminogen基因中,获得Angiostatin(kringlel-4)基因,测序验证后,将正确的Angiostatin(K1-4)序列,插入Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,转染昆虫细胞sf9,表达Angiostatin。结果:获得了正确序列Angiostatin cDNA  相似文献   
6.
7.
骨形成蛋白(Bone Morphogenetic Protein,简称BMP)是一类可以诱导异位宿区间充质细胞分化成软骨和骨细胞的蛋白质,在促进骨修复中具有较高的应用价值,为了在大肠杆菌中有效地表达人BMP,我们将人BMP1,BMP2A和BMP3的cDNA分别插入表达载体中,获得预期结果。1 材料和方法 人骨形成蛋白cDNA 1,2A和3由口腔医学院杨连甲教授赠送,表达载体pBV220由张德震博士赠送,表达载体pSM43由陈苏民教授构建.人BMP1 cDNA先以“缺口双链”定位插入突变技术,将其5’端信号肽序列去掉,并引入起始密码ATG,将经改造的人BMP1 cDNA 5’端1.44  相似文献   
8.
特异性血管生成抑制素的制备及其抑制血管生成作用   总被引:5,自引:1,他引:4  
目的:从血浆中纯化制备有特异抑制血管生成活性的天然angiostatin蛋白,为研究和应用要下基础,方法:制备L-lysine偶联的的Sepharose4B亲和层析柱,从血浆中纯化纤溶酶原用弹性蛋白酶在体外进行有限消化,再经L-lysineSepharose4B亲和层析纯化获得天然angiostatin片段,通过体外血管内皮细胞生长抑制分析和体内鸡胚尿囊膜血管生成抑制实验测定纯化蛋白活性。结果:以  相似文献   
9.
目的:筛选CD20分子的模拟表位肽,构建针对CD20分子的治疗性疫苗,以期为淋巴瘤以及其它B细胞相关性疾病的治疗提供新的方向.方法:利用噬菌体随机呈现肽库筛选技术,以人淋巴细胞分化抗原CD20 mAb Rituximab为靶点,筛选CD20分子的模拟表位肽.通过ELISA方法检测筛选出的阳性噬菌体与Rituximab的特异性结合,并以竞争性结合实验检测筛选出的阳性噬菌体与Raji细胞表面的CD20分子竞争结合Rituximab的能力.最后以Sanger双脱氧链终止法测定DNA序列,推断其氨基酸序列.结果:成功筛选出针对CD20 mAb Rituximab的阳性噬菌体,获得了CD20分子的模拟表位肽QDKLTQWPKWLE.获得的阳性噬菌体能够与Rituximab特异性结合,并且表达该表位的噬菌体可以竞争性抑制Rituximab与天然CD20分子的结合.结论:CD20分子的抗原表位肽QDKLTQWPKWLE能够与mAb Rituximab特异性结合,与天然CD20分子竞争性结合mAb Rituximab,并具有潜在的应用价值.  相似文献   
10.
杨辉  颜真  韩苇  王俊楼  赵宁  张英起  苏成芝 《医学争鸣》1999,20(9):S036-S037
0 引言 人肿瘤的发生、转移和血管形成密不可分.近年来,已发现多种具有血管形成活性的因子,如纤维细胞生长因子(FGF),转化生长因子(TGF),血管形成素(angiogenin)等.其中血管形成素是第一个肿瘤来源的具有血管形成活性蛋白,在体外可以诱导鸡胚绒毛尿囊膜及兔角膜血管形成[1],因此可能在肿瘤发生中有重要作用.文献[2,3]报道,从人肝cDNA文库中获得人血管形成素的基因全长,并推导出氨基酸.我们利用RTPCR从人肺癌细胞株A549中提取总RNA,成功克隆了人血管形成素cDNA,其序列…  相似文献   
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