用RPMI1640EDTA稀释液作血小板直接计数

称取RPMI 1640 400mg(日本),EDTANa_2200mg(AR),蒸馏水100ml,将其混合溶解后加三氯甲烷2滴(防腐),加100g/LNaOH 溶液至微红色(pH7.4)为止放冰箱备用。用本稀释液和尿素稀释液同时计数30例正常人血小板数,结果,本法244.5±     

彩色多普勒超声心动图在老年动脉导管未闭封堵术中的价值

目的探讨彩色多普勒超声心动图(CDE)在老年动脉导管未闭(PDA)封堵术中的价值。方法封堵术前应用CDE筛选25例老年PDA适应证,彩色多普勒血流显像(CDFI)分流束血流信号估测PDA肺动脉端直径,与心血管造影对照,经统计学相关处理判断其正确性;连续波多普勒(CW)测量三尖瓣最大反流速度峰值,根据简化伯努利方程ΔP=4V2估算跨三尖瓣压力阶差,再加上右心房固有压力估测肺动脉压力,与心导管对照,经统计学相关处理判断其正确性;所有患者均行封堵术介入治疗,封堵术后再应用CDE判断封堵术疗效。结果根据CDE特征筛选25例老年PDA实施封堵术全部获得成功,封堵术后CDE判断疗效满意。CDFI测量分流束血流信号估测PDA肺动脉端直径与心血管造影对照,呈正相关(r=0.71,P<0.001);CW估测肺动脉压力与心导管对照,呈正相关(r=0.63,P<0.001)。结论CDE在老年PDA封堵术中具有重要价值,封堵术前筛选适应证应用CDFI估测PDA肺动脉端直径和应用CW估测肺动脉压力是关键,封堵术后判断疗效应用CDFI观察有无过PDA残余分流很重要。     

大型动脉导管未闭封堵术后左心室功能变化

目的:探讨存在左心室扩大的动脉导管未闭(patent ductus arteriosus,PDA)患者封堵术后左心室(left ventricular,LV)大小和功能变化规律。方法:以伴左心室扩大的青少年和成人PDA患者为研究对象,成功封堵PDA后定期随访LV大小和功能。术后24 h LV内径恢复正常者随访6个月;术后24 h未恢复正常者,随访至LV内径恢复正常。结果:共纳入患者391例,男63例,年龄(35±16)岁,PDA肺动脉端直径(7±2)mm。失访36(9.2%)例。封堵术后次日左心室大小和射血分数(LVEF)均明显减小(P<0.05)。术后次日,1,3,6和12个月LV大小恢复正常者分别为140(35.8%)例,108(30.4%)例,38(10.7%)例,23(6.5%)例和11(3.1%)例。12个月时LV内径未恢复正常35例(9.9%),其中7例于术后1.5~4年恢复正常,28例随访1~4.5年,LV大小仍未恢复正常。术后次日LV内径恢复正常和12个月仍未恢复正常患者,LVEF均于术后半年恢复至术前水平。结论:对于伴有LV增大的PDA患者,封堵术可致LVEF下降,术后需6个月方缓慢恢复,部分患者封堵术后需数年LV方能恢复正常大小。     

RAC1活化介导缺氧的人脐静脉内皮细胞凋亡*☆

背景：目前研究证实,Rac1蛋白能够调控甘油醛-3-磷酸脱氢酶氧化酶的表达,刺激内源性活性氧产生,引起内皮细胞毒性改变。 目的：探讨Rac1蛋白在缺氧诱导的人血管内皮细胞凋亡中的作用及其调控机制。 设计、时间及地点：单一样本观察,于2007-01/2008-05在解放军沈阳军区总医院医学实验科完成。 材料：自备人脐静脉内皮细胞、Phoenix amphotropic 293包装细胞、持续活化型pLNCX-L61Rac1和主导抑制的pLNCX-N17Rac1反转录病毒真核表达载体。 方法：体外培养人脐静脉内皮细胞,将细胞以体积分数为1% O2、5% CO2及94% N2 缺氧条件下培养72 h。用持续活化型pLNCX-L61Rac1 (L61Rac1感染组)和主导抑制型pLNCX-N17Rac1 (N17Rac1感染组)反转录病毒真核表达载体转染人脐静脉内皮细胞,并筛选稳定表达的细胞克隆。 主要观察指标：①感染后稳定表达阳性克隆筛选。②采用pull-down和Western blot分析感染前后细胞内Racl的活化。③采用持续缺氧的方法诱导内皮细胞凋亡,用TUNEL染色和Western blot检测缺氧72 h后各实验组细胞中cleave-caspase3表达。④应用免疫荧光和Western blot分析血清反应因子的表达和定位。 结果：筛选出稳定表达持续活化型pLNCX- L61Rac1和主导抑制型的pLNCX-N17Rac1的人脐静脉内皮细胞克隆;应用pull down和Western blot证实各组细胞内Racl的活化改变;与人脐静脉内皮细胞和N17Rac1感染细胞比较,缺氧72 h后L61Rac1细胞发生明显凋亡。进一步应用Western blot分析证实3组细胞中血清反应因子表达无明显改变,但人脐静脉内皮细胞和N17Rac1-HUVECs中血清反应因子为入核表达,而L61Rac1- HUVECs中血清反应因子蛋白在细胞核周大量表达,血清反应因子发生出核转位。 结论：Rac1参与了内皮细胞凋亡的调控,机制可能与其调控血清反应因子蛋白核转位有关。     

快速起搏大鼠原代培养心房肌细胞内皮素-1表达的变化（英文）

目的：摘要：目的 ：利用原代培养的心房肌细胞建立快速起搏模型,研究在快速起搏早期内皮素-1（ET-1）表达的变化。方法：以原代培养大鼠心房肌细胞,建立快速起搏细胞模型,利用酶联免疫吸附（ELISA）法和逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）方法检测在快速起搏3、6、12、24 h后内皮素-1的mRNA表达和分泌量的变化。结果：与起搏前比较,快速起搏6 h后ET-1的mRNA表达[（0.31±0.02）比（0.52±0.07）、（0.62±0.09）、（0.75±0.05）]和分泌量[（3.4±0.8）ng/L比（6.0±1.4）ng/L、（8.3±1.5）ng/L、（11.2±2.1）ng/L]持续增加（P均〈0.01）。结论：快速起搏早期,原代培养心房肌细胞内皮素-1的mRNA表达和分泌量随起搏时间增加,提示内皮素-1参与了房颤时心房病理重构。     

彩色多普勒超声心动图在老年房间隔缺损封堵术中的价值

目的探讨彩色多普勒超声心动图(CDE)在老年房间隔缺损(ASD)封堵术中的价值。方法选择老年ASD患者64例,封堵术前应用二维超声心动图观察ASD位置,测量ASD大小和残余边缘,彩色多普勒血流显像观察过房间隔分流束血流信号和过心脏瓣膜反流束血流信号,连续多普勒估测肺动脉压,合并心房颤动和多发ASD经食管超声心动图检查,筛选ASD封堵术适应证。ASD封堵术中应用二维超声心动图监视封堵器位置,用彩色多普勒血流显像监视有无过房间隔残余分流。ASD封堵术后应用CDE判断疗效。结果 64例老年ASD患者实施ASD封堵术全部获得成功,ASD封堵术后CDE判断疗效满意。结论 CDE在老年ASD封堵术中有重要价值。ASD封堵术前应用二维超声心动图观察ASD位置、大小和残余边缘,连续多普勒估测肺动脉压,合并心房颤动和多发ASD行经食管超声心动图检查是筛选老年ASD封堵术适应证的关键。     

辛伐他汀对平滑肌祖细胞分化、增殖、迁移及黏附能力的影响

目的：观察辛伐他汀对骨髓源性平滑肌祖细胞（SPC ）分化及增殖的影响,筛选新一代包被洗脱支架药物。方法：采用密度梯度离心法从大鼠骨髓获取单个核细胞,接种于纤维连接素包被的培养板,培养8d后,以平滑肌肌动蛋白（α-SM A ）免疫荧光染色鉴定骨髓源性SPC ,并在倒置荧光显微镜下计数。收集培养8d单个核细胞、贴壁细胞,分别加入不同浓度辛伐他汀（0.01-10μmol/L ）培养8d、24h。分别采用氚标记胸苷（3 H-TdR）摄入法、改良的Boyden小室和黏附能力测定实验观察SPC的分化、增殖、迁移和黏附能力。结果：与对照组（无辛伐他汀干预）相比,0.01μmol/L辛伐他汀显著抑制骨髓单个核细胞向SPC分化[（85±4）个比（79±5）个]、增殖[（4070±184）个比（3833±126）个]、迁移[（44±3）个比（39±3）个]和黏附[（59±5）个比（52±4）个], P均＜0.05,且随辛伐他汀浓度增加S PC数量显著减少（ P＜0.01）。结论：辛伐他汀可抑制骨髓源性平滑肌祖细胞分化、增殖、迁移及黏附能力。     

介入治疗主动脉缩窄14例临床分析

目的探讨球囊成形术和支架植入术治疗主动脉缩窄的有效性和安全性。方法自2005年4月至2010年2月,共对14例患者(男性8例)实施主动脉缩窄球囊成形术和支架植入术,年龄(17±9)岁。根据患者年龄和主动脉缩窄解剖形态选择介入治疗方式。结果单纯主动脉缩窄9例,合并动脉导管未闭5例;膜状主动脉缩窄12例,管状缩窄2例。所有患者均成功实施介入治疗。年龄小于14岁者4例,跨缩窄段压力阶差为(45±9)mmHg,球囊成形术后2例压力阶差消失,2例存在10mmHg以内压力阶差。主动脉缩窄支架植入术10例,跨缩窄段压力阶差为(51±18)mmHg。8例植入覆膜支架,2例植入非覆膜支架。5例合并动脉导管未闭患者中,4例行覆膜支架植入术,1例同时行动脉导管未闭封堵术和非覆膜支架植入术。术后2例患者存在少量压力阶差。所有患者无重大并发症,随访(31±21)个月,未见再狭窄发生。结论介入方式治疗主动脉缩窄安全、可靠,可以取代外科手术成为首选治疗方式。具体采用何种介入治疗方式,需要根据患者年龄和缩窄段解剖形态确定。