内毒素、IL－Iβ对家兔下丘脑神经细胞内钙离子浓度的影响

内毒素、ＩＬ－Ｉβ对家兔下丘脑神经细胞内钙离子浓度的影响暨南大学医学院病理生理教研室（广州５１０６３２）李菁，屈洋，张穗梅，李楚杰以往资料揭示下丘脑内Ｎａ＋／Ｃａ２＋比值的变化是发热机制中枢环节之一，但迄今尚无实验直接研究发热时体温变化与下丘脑细胞内...     

α-MSH对脂多糖部分生物学活性的影响

目的:探讨α-黑色素细胞刺激素对LPS部分生物学活性的影响。方法:本文应用比色法、倒置生物显微镜及流式细胞仪观察小鼠腹腔巨噬细胞释放H₂O₂、中性粒细胞凋亡及FITC-LPS与单核细胞的结合情况。结果:LPS可刺激小鼠腹腔巨噬细胞释放H2O2,而α-MSH与LPS共同培养,则能明显抑制巨噬细胞释放H₂O₂(P<0.01);α-MSH及LPS本身均不影响中性粒细胞凋亡(P>0.05),但在LPS作用下,α-MSH可显著促进中性粒细胞凋亡(P<0.01);并且,α-MSH可降低FITC-LPS与单核细胞的结合率及单核细胞表面的平均荧光强度(P<0.05,P<0.01)。结论:α-MSH不仅能有效抑制LPS刺激巨噬细胞释放H₂O₂、促进LPS作用下的中性粒细胞发生凋亡;而且可干扰LPS与单核细胞的结合,发挥其有效的免疫调控作用。     

rhTGF-β1及转染TGF-β1基因对兔角膜内皮细胞增殖的影响

目的： 探讨不同浓度的重组人转化生长因子-β₁(rhTGF-β₁)及TGF-β₁基因转染对体外培养兔角膜内皮细胞增殖的影响。方法: 用MTT法检测不同浓度rhTGF-β₁作用下角膜内皮细胞的增殖。用脂质体介导转染方法，将TGF-β₁基因转移入培养的兔角膜内皮细胞，HE染色法观察细胞组织形态学变化；ELISA法检测转染细胞培养上清中TGF-β₁表达量；流式细胞仪检测细胞生长周期变化；DNA电泳法检测转染细胞凋亡情况。结果: MTT检测示5-20 μg/L rhTGF-β1抑制角膜内皮细胞增殖；0.5-1 μg/L组对增殖无影响；0.05~0.1 μg/L组促进细胞增殖。TGF-β₁基因转染细胞形态无明显异常，细胞培养上清中TGF-β₁的浓度约为(98±3)ng/L。流式细胞仪检测示，基因转染组S期和G₂/M期细胞比例减少、PI值降低，但加入EGF后细胞生长基本正常。DNA电泳检测示基因转染组未见凋亡带。结论: rhTGF-β₁对角膜内皮细胞增殖的影响具有剂量依赖性；TGF-β₁基因转染影响角膜内皮细胞增殖、但不诱发凋亡，其抑制作用可被外源性EGF拮抗。     

角膜内皮细胞稳定表达转化生长因子-β1对小鼠脾脏淋巴细胞细胞因子表达的调控

目的探讨转化生长因子-β1(tromsforming growth factor-β1,TGF-β1)基因转染角膜内皮细胞后表达产物对小鼠脾脏淋巴细胞细胞因子表达的调控作用。方法利用脂质体介导法将TGF-β1基因转染入培养的兔角膜内皮细胞中,并用药物筛选抗性细胞克隆。用免疫组化法检测外源基因的稳定表达。ELISA法检测转染细胞培养上清中TGF-β1表达量,用RT-PCR检测小鼠脾脏淋巴细胞IL-2、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-6mRNA的表达。结果免疫组化染色显示基因转染后筛选出的克隆细胞TGF-β1蛋白表达均为阳性,胞浆呈棕色着色。转染细胞培养上清中TGF-β1的表达量为(597±7)pg/ml,高于对照组。基因转染组淋巴细胞IL-2、IFN-γ、TNF-αmRNA的表达量明显低于正常对照组(P<0.05);IL-4、IL-6mRNA的表达量明显高于正常对照组(P<0.05)。结论TGF-β1基因转染角膜内皮细胞后高表达TGF-β1,致使淋巴细胞发生免疫偏离,作为组织工程角膜种子细胞移植后具有抑制角膜移植免疫排斥反应的潜在可能性。     

雷公藤内酯醇滴眼液防治角膜移植免疫排斥反应的实验研究

目的探讨雷公藤内酯醇(T10)滴眼液局部应用对角膜移植免疫排斥反应的影响.方法建立封闭群大鼠角膜移植模型,随机分组A、B、C组为SD-Wistar组间同种异体角膜移植,SD为受体,Wistar为供体,其中A组为空白对照组,B组为o.5mg@L1T10滴眼液组,C组为1mg@L-1T10滴眼液组,D组为SD-SD对照组,即SD大鼠间同种异体移植组和E组SD自体角膜移植对照组.用裂隙灯显微镜记录及比较各组角膜透明度、水肿度、新生血管度、移植排斥指数(RI)以及角膜排斥发生时间.结果术后各组角膜植片透明度、水肿度、新生血管程度以及发生角膜移植排斥时间,A组与C组比较有显著性差异(P＜0.05);D组和E组比较无显著性差异(P＞0.05).结论T10滴眼液可有效防治角膜移植免疫排斥反应.     

内毒素、IL-1β对家兔下丘脑神经细胞内游离钙浓度的影响

目的:研究内毒素(ET)性发热家兔下丘脑神经细胞内游离钙([Ca²⁺]i)浓度变化及ET、白介素-1β(IL-1β)对正常家兔离体下丘脑神经细胞 [Ca²⁺]i浓度的影响。方法:采用荧光分光光度法,应用钙离子探针(Fura-2/AM),检测 i浓度。结果:(1)微量ET(2 ng/mL)使正常家兔下丘脑神经细胞内 [Ca²⁺]i浓度显著升高;ET性发热家兔下丘脑神经细胞 [Ca²⁺]i水平也显著高于对照组;(2) 3种剂量IL-1β(100、500、1 000 ng/mL)均未能明显影响下丘脑神经细胞 [Ca²⁺]i 浓度。结论:(1)低Ca²⁺参与ET性发热体温调节的作用部位,可能不是在下丘脑神经细胞内;(2)ET引起下丘脑神经细胞 [Ca²⁺]i 浓度变化,不是通过IL-1β直接引起。     

甘氨酸/多粘菌素B合剂对内毒素诱导

目的:探讨甘氨酸和多粘菌素B在体内对内毒素诱导的家兔急性期反应的影响。方法:复制内毒素诱导急性期反应模型,其中实验组预先给予半剂量的甘氨酸/多粘菌素B合剂,当家兔的体温上升至高峰后1h采血,进行白细胞计数、血清C-反应蛋白、微量元素(Cu²⁺、Fe²⁺、Zn²⁺)的测定。结果:预先给予半剂量的甘氨酸/多粘菌素B合剂可以显著抑制内毒素诱导急性期反应,包括对家兔体温、C-反应蛋白以及微量元素(Cu²⁺、Fｅ²⁺、Zｎ²⁺)的变化的抑制等(P＜0.05),并且其效果与预先给予全剂量多粘菌素B无显著性差异(P＞0.05)。结论:在内毒素性疾病治疗中,选择分别作用于内毒素不同结构部位的两种拮抗剂组成合剂,可以利用某些拮抗剂的不同特点相互取长补短,从多个环节上拮抗内毒素的生物学作用,降低单一药物的剂量,减轻毒副反应。     

山茱萸总甙滴眼液防治角膜移植免疫排斥反应的实验研究

目的:观察山茱萸总甙(COG)滴眼液局部应用对角膜移植免疫排斥反应的影响。方法:建立封闭群大鼠角膜移植模型,用裂隙灯显微镜记录及比较各组角膜排斥反应发生时间;并进行病理学和扫描电镜检查。结果:病理学检查B、C组15d时的角膜植片淋巴细胞浸润及新生血管明显少于A组。免疫组化显示:ICAM-1的表达在15d时B、C组明显少于A组。结论:COG滴眼液能有效地防治角膜移植免疫排斥反应。     

甘氨酸对内毒素诱导单核细胞产生IL-1和TNF的影响

内毒素（ＥＴ）是广泛存在于自然界的致病原,是引起临床发热的主要原因,而且又是引起休克、毒血症、霍乱、成人呼吸窘迫综合症、多器官功能衰竭等疾病或病理过程的重要因素。内毒素能激活单核细胞产生多种细胞因子导致体液因子的紊乱从而引起一系列的病理变化和功能失调...     

雌、孕激素对去势雌大鼠血清NO、心肌NOS活性的影响

[目的]通过观测单纯补充雌激素，孕激素和雌孕激素联合治疗对去卵巢雌大鼠（去势大鼠）血清一氧化氮（NO0和心肌一氧化氮合酶（NOS）活性的影响，探讨雌激素保护绝经后妇女心血管系统的作用机制。[方法]采用放射免疫法检测各组血清雌二醇（E2）和孕酮（P）水平，用化学比色法测定血清NO和心肌NOS活性。[结果]血清E2水平和E2/P比值与血清NO水平和心肌NOS活性正相关，去势雌鼠16周后，随着血清E2/P水平和E2/P比值的下降，血清NO水平和心肌NOS活性降低；单纯补充孕激素和联合使用5雌孕激素时，E2/P比值低，血清NO水平和心肌NOS活性低；单纯补充雌激素可提高血清NO水平和心肌NOS活性。[结论]雌激素保护女性心血管系统的作用机制可能与提高NOS活性，增加NO释放量或合成量的作用有关，孕激素可能削弱雌激素的作用；雌激素水平下降和雌孕激素比例失衡可能都是绝经后妇女冠心病发病率升高的原因。