高分子聚合物微流控细胞芯片的改性研究

目的 探讨2种不同硅烷化试剂对高分子聚合物材料PDMS芯片的改性效果和改性后芯片在细胞捕获/筛选的初步应用.方法 接触角实验考察不同硅烷化试剂处理的PDMS样本亲水性,筛选硅烷化试剂及其浓度,以芯片上的非特异性细胞捕获实验验证筛选结果,并连接抗体构建功能化芯片,进行细胞捕获实验的初步研究.结果 2种硅烷化试剂均对...     

功能化微流控细胞芯片的构建及初步应用

目的 构建一个结构简单,并有利于细胞贴壁培养的微流控芯片系统.方法 利用生物交联剂将RGD肽共价连接在芯片微通道表面,通过与细胞膜表面整合素家族的特异性识别,促进细胞的黏附与贴壁生长;考察不同浓度RGD的功能化效果.结果 化学交联法能将RGD有效的固定在芯片微通道表面,形成均匀一致的RGD层.RGD功能化处理的细胞...     

机械拉伸对人肺上皮细胞粘附及[Ca2+]i的影响

目的探讨周期性拉伸应变对人肺上皮细胞H727的力学性质及其[Ca2 ]i的调控作用.方法应用微管吸吮系统测定细胞与基底间的粘附力和细胞的铺展面积,用荧光探针Fluo-3/AM测定拉伸应变对人肺上皮细胞H727[Ca2 ]i的影响.结果在应变为15%,频率为40次/min的拉伸刺激下,与其静态对照组相比,细胞与基底间的粘附力和细胞的铺展面积均增加;拉伸5 min后,[Ca2 ]i比对照组有明显增加,用三七总皂苷阻断胞内Ca2 离子通道后,细胞对应变的响应仍表现出[Ca2 ]i的升高,但与未加三七总皂苷的实验组相比,[Ca2 ]i响应应变后的升高由原来的3.4倍的增加降低为1.5倍的增加.结论在人肺上皮细胞H727响应周期性拉伸应变的过程中,[Ca2 ]i的升高既有胞外钙内流的参与,也有胞内钙库的释放作用,其中胞外钙通过跨膜通道的内流起主要作用.     

超临界二氧化碳技术在医药领域的应用

CO2气体在临界点(Pc=7.374×104kPa,Tc=304.1 K)附近,具有高扩散系数、低粘度和良好的溶解能力的性质,超临界CO2技术就是基于这些性质发展起来的。与传统方法相比,该技术具有快速、高效、节能、环保的优点,可广泛的用于医药、香料、冶金、石油化工、环保等领域。本文将从超临界     

(E)-苯乙基-3-(3,5-二羟基-4-异丙基苯基)丙烯酸酯对小鼠皮炎湿疹的治疗作用初步研究

目的研究(E)-苯乙基-3-(3,5-二羟基-4-异丙基苯基)丙烯酸酯(THCA354)凝胶剂对小鼠变应性接触性皮炎(ACD)的治疗作用及机制。方法通过对小鼠耳廓涂抹2,4-二硝基氟苯(DNFB)诱导建立ACD模型,测定给予DNFB刺激后24 h的耳肿胀厚度和对小鼠耳组织进行病理组织形态学分析来共同评价THCA354凝胶剂的抗过敏作用效果;采用ELISA法和RT-PCR定量检测小鼠耳组织中炎症细胞因子含量及m RNA表达水平,初步阐明其作用机制。结果与阴性对照组相比,局部涂抹THCA354的小鼠耳肿胀程度、淋巴细胞浸润程度、耳组织匀浆中促炎细胞因子含量和m RNA表达水平均显著降低,抗炎细胞因子的含量和m RNA表达水平均显著升高。结论 THCA354可能是通过改变炎症细胞因子的分泌和m RNA表达水平,调节T细胞亚群的平衡从而发挥抗过敏作用。     

胍丁胺的柱前衍生方法及评价

胍丁胺是精氨酸脱羧基生成的内源性代谢产物,生物学作用丰富,广泛存在于植物、细菌及哺乳类动物的各种组织中。胍丁胺极性强,相对分子质量小,其结构中无紫外和荧光吸收基团,难以气化,加之内源性胍丁胺含量低,生物样品中干扰成分较多,一般方法难以检测。胍丁胺与荧光试剂进行柱前衍生化,不仅可以增加胍丁胺的相对分子质量,还可以使其带上荧光,大大提高检测灵敏度,使内源性胍丁胺得到很好的分离,是目前测定胍丁胺含量的重要方法。该文对胍丁胺近年来常用的柱前衍生化试剂进行了总结,并对各种衍生试剂的优缺点、最佳衍生条件及检测方法做了比较全面的分析,旨在为后期测定胍丁胺的含量及生物学研究提供方法与思路。     

生物医学专业仪器分析教学改革的探索与实践

根据现代仪器分析的发展趋势和特点,针对目前仪器分析课程的教学状况,从教学内容、教学方法、教学手段和考核评定体系等方面对医学生仪器分析课程进行了改革探索和实践,取得了一定的成效。     

微流控免疫芯片富集/捕获肠出血性大肠杆菌O157∶H7的研究

目的 探讨基于免疫微珠的微流控芯片识别捕获EHEC O157:H7的效率.方法 采用化学共价连接的方法将抗EHEC O157:H7抗体固定于粒径为50 μm的玻璃微珠上,再将微珠填充于PDMS/玻璃复合芯片中,建立由流体控制、免疫反应构成的细菌分选芯片;通过对进样流速、冲洗流速及冲洗时间的优化,在降低芯片对细菌的非特异性吸附的同时,增加芯片的特异性捕获效率.结果 在10μl/min和5 min的最佳冲洗流速和冲洗时间下,该芯片在10 min内可完成对EHEC O157:H7的捕获,捕获效率达到40.00%～63.96%,且实验组与对照组有统计学差异(P<0.01).结论 本研究构建的 EHEC O157:H7识别芯片具有较高的捕获效率.     

离子对高效液相色谱法测定体外人血浆中盐酸二甲双胍浓度

目的建立了一种简便、快速的体外人血浆中盐酸二甲双胍的离子对高效液相色谱方法。方法盐酸二甲双胍血样以乙腈除蛋白，用C18反相柱，0．01mol·L^-1NaH2PO4和0．0075mol·L^-1十二烷基磺酸钠-乙腈（65：35）为流动相；流速：1．0ml／min；苯妥英钠为内标；在235nm波长进行检测。结果该方法的线性关系良好（r=0．9993），线性范围为0．05～4ug·ml^-1，检出限为0．010ug·ml^-1。高、中、低3种浓度的日内、日间精密度、方法回收率和萃取回收率均符合方法学要求。结论该法简便，准确可靠，结果稳定，可用于盐酸二甲双胍的药代动力学研究和生物利用度研究。