上肢挤压伤后神经损伤机制分析与临床治疗

目的 报告上肢挤压伤后神经损伤机制和治疗方法.方法 对2003年3月至2009年5月收治的17例上肢挤压伤后神经损伤患者进行综合性治疗.结果 治疗3周后部分轻症患者受压部位肌群肌张力开始恢复,肌力恢复至M2～M3.6周后,大部分患者受压部位以远肌群肌力逐渐恢复至M3～M4.11例获得6个月至2年的随访,6例失访.11例患肢感觉功能完全恢复.7例患肢功能恢复良好;2例遗留轻度手功能障碍,手指总主动活动度(TAM)较健侧减少20.,肌力M4;2例并发一氧化碳中毒后迟发性脑病的患者,遗留明显的功能障碍,但手部感觉和肌张力恢复良好.按中华医学会手外科学会上肢部分功能评定试用标准评定:优7例,良2例,差2例.结论 上肢挤压伤后神经损伤具有明显的特殊性,应针对其损伤机制予以积极治疗.     

桡动脉逆行岛状皮瓣修复手部皮肤缺损及多指蹼一次成形

应用前臂桡动脉逆行岛状皮瓣对手部创面的修复已广为应用[1].对手掌(背)联合指蹼皮肤缺损的患者,可以应用前臂桡动脉逆行岛状皮瓣覆盖,但需要二次手术重建指蹼.     

大鼠坐骨神经损伤后导向分子Slit2 mRNA表达的变化

目的 探讨轴突导向分子Slit2 mRNA在大鼠坐骨神经损伤后表达的变化及其意义。方法 制备成年Wistar大鼠右侧坐骨神经损伤模型，以9-0无损伤缝线作外膜缝合。通过RT-PCR法半定量检测损伤后各时点近端与远端SLit2 mRNA的表达变化。结果 大鼠坐骨神经损伤后L2h，其近、远端均可检测到Slit2 mRNA的表达并逐步升高，近端伤后第3天达到高峰，远端伤后第5天达到高峰，至第7天均逐渐下降。结论 大鼠坐骨神经损伤后轴突导向分子Slit2 mRNA呈一过性表达，远端与近端表达时相具有时序性。近端与远端Slit2m RNA的表达差异可能是外周神经损伤后恢复不佳的分子生物学基础。     

手外伤术后手部功能锻炼的研究

目的:探讨手外伤后手部功能锻炼的方法及效果。方法:20例严重的手外伤病例通过运动疗法及辅助疗法进行术后手部功能锻炼,观察患者术后一般情况以及手功能的恢复情况。结果:为了尽早恢复手部的功能,在伤口逐步愈合的情况下,在运动疗法的基础上选择多种辅助疗法。通过治疗和手部功能锻炼,患者手部的触觉逐渐恢复,水肿、感染以及疼痛逐渐消失,没有患者发生肌肉萎缩。手外伤术前和术后1、3、6个月,各个时间段之间的一般情况和手部功能的恢复情况差异具有统计学意义(P<0.05)。术后患者手部的功能逐渐改善,6个月时已经有12手基本痊愈,占46%。结论:要充分发挥伤员的积极性,使用各种有用的方法坚持主动功能锻炼,半年左右即可达到良好的恢复效果。     

无细胞神经支架复合骨髓间充质干细胞构建组织工程人工神经修复坐骨神经缺损*☆

背景：作者已经成功制备了无细胞神经移植物,并且复合骨髓间充质干细胞构建组织工程人工神经桥接大鼠坐骨神经缺损。 目的：无细胞神经移植物复合骨髓间充质干细胞构建组织工程人工神经修复大鼠坐骨神经缺损后运动功能的恢复。 方法：成年雄性SD大鼠构建大鼠坐骨神经15 mm缺损模型,分别应用组织工程人工神经、组织工程神经支架或自行神经桥接坐骨神经缺损。桥接后20周再生神经电生理学测定,手术侧胫骨前肌湿质量、腓肠肌组织学及透视电镜分析。 结果与结论：桥接20周后,组织工程人工神经与自体神经移植组胫骨前肌湿质量比较,差异无显著性意义(P > 0.05),神经干传导速度为(30.56±2.15)m/s。结果提示,无细胞神经移植物复合骨髓间充质干细胞构建的组织工程人工神经桥接大鼠坐骨神经缺损后,可以促进再生神经运动功能的恢复。     

桡动脉皮瓣修复手掌手指皮肤缺损及一次性两个以上指蹼重建

[目的]报道应用前臂桡动脉逆行岛状皮瓣一次性修复手掌(背)、手指掌(背)侧及2个以上指蹼皮肤缺损的方法及临床效果.[方法]依据桡动脉主干在前臂桡动脉逆行岛状皮瓣内发出分支的解剖特点,以各分支设计分叶皮瓣,同时修复手掌(背)、手指皮肤及2个手指指蹼间隙的皮肤缺损.[结果]临床观察术后皮瓣色泽良好,不肿胀；皮瓣完全成活,创面全部闭合,分指良好；患者对手部外形及功能满意.[结论]依据桡动脉主干在皮瓣内发出分支的解剖特点,以各分支之间切开皮肤设计分叶皮瓣,皮瓣血运可靠,手术简便、实用,可以一次性修复手掌、手指及2个以上指蹼联合皮肤缺损.     

组织工程化天然神经支架的制备

目的　为修复神经干缺损提供理想的天然神经支架。方法　取Wistar大鼠双侧坐骨神经 ,运用低渗 -脱细胞的组织工程学方法处理大鼠坐骨神经 ,对该神经支架分别进行组织学和透射、扫描电镜检测。结果　神经水平切面上见雪旺细胞基底膜管呈网眼状 ,纵切面上呈典型的长空管状 ;未见轴突、髓鞘和雪旺细胞核。透射、扫描电镜观察 ,空虚的基底膜管内未见残留结构 ,基底膜管壁胶原纤维排列有序。结论　本实验采用的低渗 -脱细胞的组织工程学方法可制备出理想的周围神经支架。该支架可作为神经干缺损的桥接物 ,也可作为神经组织工程种子细胞的支架。     

扫描电镜观察组织工程神经支架与骨髓间充质干细胞的共同培养

目的:扫描电镜观察骨髓间充质干细胞在组织工程神经支架中生长、附着状态,探讨骨髓间充质干细胞与该支架细胞的亲合性。方法:实验于2006-02/2006-12在中国医科大学神经解剖研究室完成。实验材料:180～200g成年清洁级健康雄性wistar大鼠,用于制备无细胞神经移植物,100～120g成年清洁级健康雄性wistar大鼠,用于制备骨髓间充质干细胞,均由中国医科大学实验动物部提供(SCXK(辽)2003-0009)。实验方法:①无细胞神经移植物的制备:参考刘承吉等组织工程化天然神经支架制备方法制备无细胞神经移植物。②骨髓间充质干细胞的体外培养与鉴定:无菌条件下分离wistar大鼠股骨、胫骨,用低糖DMEM培养液反复冲洗骨髓腔,收集冲洗液,1000r/min4℃离心10min,去上清液,DMEM培养液重悬细胞,置于37℃、体积分数为0.05的CO2孵箱内培养,24h半量换液,48h全量换液,每二三天换液1次,5～7d后达到80%融合,0.25%胰酶消化,离心,按1∶2传代培养,留取3代备用。采用免疫组织化学染色法鉴定。③骨髓间充质干细胞植入并与无细胞神经支架联合培养:手术显微镜下将1×107L-1骨髓间充质干细胞多点注入无细胞神经支架内,见支架膨胀隆起后,将支架重新放入培养液内培养7d。④实验评估:将制备的无细胞神经移植物横断面进行扫描电镜观察,骨髓间充质干细胞接种于支架上混合培养7d后,对移植物支架进行扫描电镜观察。结果:①免疫组织化学法鉴定骨髓间充质干细胞:培养的细胞不表达CD34、CD14,表达CD44、CD29,说明实验中分离、培养的细胞不是造血干细胞而是骨髓间充质干细胞。②扫描电镜观察无细胞神经移植物与移植物支架:无细胞异体神经支架在扫描电镜下见正常神经的髓鞘、轴突均消失,仅剩下空虚呈网格状的施万细胞基底膜管。联合培养7d后骨髓间充质干细胞在基底膜管内均匀分布,在管腔内贴附生长,细胞呈椭圆形或多突起形。骨髓间充质干细胞在该支架内均匀分布,并伸出伪足贴附于该支架内。结论:骨髓间充质干细胞在组织工程神经支架内生长良好,形态正常,并伸出伪足与管壁粘连紧密,该支架对骨髓间充质干细胞具有良好的细胞亲合性。     

许旺细胞与脱细胞神经移植物共培养在周围神经损伤修复中的作用

目的:观察体外分离、培养、纯化的许旺细胞对脱细胞神经移植物修复神经损伤的促进作用,为临床应用组织工程化神经修复周围神经缺损提供实验依据。方法:实验于2004-04/2005-04在中国医科大学组织工程实验室完成。纳入普通级雄性Wistar大鼠24只,体质量180～220g。随机分为实验组、空白对照组、自体移植对照组共3组,每组8只。分笼饲养。另纳入5～8d龄Sprague-Dawley乳鼠40只,取其双侧坐骨神经与臂丛神经。实验组大鼠右后腿用种植许旺细胞的ARSN桥接人为造成的神经缺损。空白对照组大鼠右后腿用单纯ARSN桥接人为造成的神经缺损。酶反复消化法与差速贴壁法分离和培养许旺细胞;许旺细胞与10mm长的脱细胞神经移植物共培养后,应用外科手术移植到大鼠坐骨神经缺损处,自体移植对照组大鼠右后腿用单纯切断的神经上下颠倒原位桥接人为造成的神经缺损。13周取材通过透射电镜和扫描电镜观察神经纤维的再生情况。结果:Wistar大鼠24只全部进入结果分析,没有脱失。①实验组较空白对照组的再生有髓神经纤维均匀,轴索略粗,髓鞘厚度有差别,部分神经纤维髓鞘还未形成板层结构,许旺细胞包绕神经纤维,轴索内微丝微管结构较清晰,无髓神经纤维直径较小,不均匀分布在有髓神经纤维之间,由一层纤维结缔包裹形成纤维束,实验组较自体移植对照组的髓鞘略薄,自体移植组再生神经纤维均较粗,许旺细胞包裹轴突形成排列规则、电子密度较高的髓鞘,髓鞘厚薄基本相同。②实验组可见大量许旺细胞呈双极梭形,并且首尾相连排列成链状或网状特征性分布。许旺细胞还可在神经纤维上的胶原丝上附着。③实验组有髓神经纤维数、髓鞘厚度、G率(有髓纤维总面积/神经干总面积)接近自体移植对照组,差异无显著性意义[(5344±592),(5514±373);(3.13±0.16),(3.19±0.25)μm;(48.43±3.62)%,(57.11±2.28)%;P>0.05];与空白对照组比较差异有显著性意义[(5344±592),(3191±236);(3.13±0.16),(1.28±0.33)μm;(48.43±3.62)%,(31.05±4.19)%;P<0.05]。结论:与许旺细胞共培养的脱细胞神经移植物可加快宿主轴索再生,促进神经损伤修复,是临床修复神经缺损的可行办法。