中国部分城市A组轮状病毒感染状况调查及VP7血清型分析

目的 研究我国A组轮状病毒感染状况及VP7血清型分布。方法 利用PAGE电泳检测北京、沈阳、新乡、上海、深圳、广州六个城市1997和（或）1998年秋冬季婴幼儿腹泻A组轮状病毒的感染状况,并采用RT－PCR方法对4种主要的VP7血清型（G1、G2、G3和G4型）进行分型。结果 374份标本中有181份为轮状病毒阳性,检出率48．4％。各地标本的检出率为32％－63％之间,北京、上海地区两年的检出率基本近似。阳性标本经PCR分型方法鉴定G1、G2、G3和G4型的感染率分别为89．5％、6．1％、2．8％和0。有两例为G1和G2型混合感染,另有1例经测序证实为G9型。各地之间、每年之间RV的流行状况略有差异。结论 G1、G2、和G3型是我国A组轮状病毒感染的主要血清型。     

麦胚提取物对成骨细胞TGF—β1和IGF—l表达的影响

目的：通过研究成骨细胞中转化生长因子(TGF)—β1和胰岛素祥生长因子(IGF)—1的表达，进一步探讨麦胚乙醇提取物对大鼠成骨细胞的作用机理。方法：体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞，用免疫组化方法测定成骨细胞中TGF—β1和IGF—1的表达情况，用HPIAS—1000图象分析仪对各组表达进行定量分析。结果：麦胚提取物培养的大鼠第3代成骨细胞的TGF—β1和IGF—1呈阳性表达，麦胚提取物组的TGF—β1和IGF—1平均光密度都显著高于阴性对照组(P＜0．05，P＜0．01)，但与阳性对照组比较无显著差异(P＞0．05)。结论：麦胚乙醇提取物可增强新生大鼠成骨细胞TGF—β1和IGF—1的表达。     

麦胚提取物对大鼠成骨细胞增殖分化和矿化的影响

目的　探讨麦胚提取物对骨质疏松症的防治作用。方法　体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞 ,然后用噻唑蓝 (MTT)法测定麦胚提取物对体外培养成骨细胞的增殖作用 ,氨基安替比林测酚法测成骨细胞内碱性磷酸酶 (ALP)活性 ,茜素红染色方法 (ARS)研究对成骨细胞矿化的影响。结果　 0 10 g·L-1的麦胚提取物可以促进体外培养大鼠成骨细胞的增殖和分化作用 ,0 5 0g·L-1促使成骨细胞矿化结节的形成。结论　麦胚提取物可以提高成骨细胞的增殖和分化 ,并有促进矿化的功能     

重组人热休克蛋白70生物活性的快速鉴定

目的　快速鉴定纯化后的重组人热休克蛋白 70 (rHSP70 )的特异性及其是否具有生物活性。方法　将rHSP70与肿瘤细胞内的小分子多肽在一定条件下温育 ,并利用含 5 %甘油的Nativepage电泳分析。 结果　可快速鉴定出rHSP70是否具有生物活性 ,电泳后凝胶可做Western -blot特异性鉴定。结论　该法操作简便 ,重复性好 ,既可快速鉴定rhsp70的生物活性 ,又可特异性鉴定rhsp70自身     

大豆异黄酮对成骨细胞生长因子表达的影响

目的　探讨大豆异黄酮对成骨细胞胰岛素样生长因子 -1(IGF -1)表达的影响。方法　体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞 ,然后用塞唑盐 (MTT)法测定大豆异黄酮对成骨细胞的增殖作用 ,过氧化物酶标记的链霉卵白素(SP)免疫组织化学染色试剂盒检测IGF -1抗体表达 ,用原位杂交方法检测IGF -1mRNA基因表达 ,用HPIAS -10 0 0图象分析仪对各组表达进行定量分析。结果　大豆异黄酮培养的大鼠第 3代成骨细胞的IGF -1抗体和IGF -1mRNA呈阳性表达 ,并显著高于阴性对照组 (P <0 0 5) ,阳性细胞胞浆呈棕黄色阳性表达。结论　大豆异黄酮可通过促进大鼠成骨细胞IGF -1分泌而影响成骨细胞形成。     

用PAGE电泳法检测腹泻婴幼儿粪便中轮状病毒RNA

目的　探讨婴幼儿轮状病毒感染诊断方法。方法　用聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)检测轮状病毒RNA。结果　 41份腹泻婴幼儿粪便标本中有 16份为RNA阳性 ,阳性率为 39%。结论　用PAGE电泳方法检测轮状病毒RNA准确可靠 ,不易出现假阳性     

大豆异黄酮和钙对大鼠成骨细胞增殖分化和矿化的作用

为探讨大豆异黄酮和钙对体外培养大鼠颅骨成骨细胞增殖、分化和矿化的作用 ,体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞 ,然后用噻唑盐 (MTT)法测定大豆异黄酮和葡萄糖酸钙对体外培养成骨细胞的增殖作用 ,氨基安替比林测酚法测成骨细胞内碱性磷酸酶 (ALP)活性 ,茜素红染色方法 (ARS)研究对成骨细胞矿化的影响。结果单纯补钙组大鼠成骨细胞增殖、分化和矿化无显著促进作用。大豆异黄酮可显著地促进成骨细胞的增殖和分化 ,并促使成骨细胞形成矿化结节 ,而补充大豆异黄酮同时补钙可使矿化结节团块增大。大豆异黄酮可以提高成骨细胞的增殖和分化 ,补大豆异黄酮并补钙更有利成骨细胞的矿化     

轮状病毒感染中血清抗体对病毒多肽的反应性

建立人轮状病毒(HRV)电转印免疫印迹技术(electrotransfering immunoblotting,ETIB)分析了3个不同血清型别的HRV抗原与同型及异型豚鼠抗血清的ETIB反应。在此基础上,以HRV Wa,Yo,Hochi株为抗原,用ETIB法检测46例急性腹泻患儿,17例正常婴幼儿及30例脐带血血清中抗HRV各种多肽的抗体及其出现的动态。结果提示,不同血清型HRV每株的内外衣壳蛋白之间,分别具有共同的某些抗原决定簇。根据HRV ETIB反射扫描结果分析,HRV毒株之间其Vp3,Vp7显示出血清型别的特异性。HRV感染的病儿对Vp2、Vp6的抗体免疫反应性较强。各类多肽抗体的出现似有时间上的序次,其中以Vp6的抗体出现于病程的早期,其次是VpZ抗体。此外还发现病人血清HRV-ETIB反应阳性与自粪便中检出HRV-RNA阳性结果具相关性;在7例HRV-ETIB抗体阳性的脐血和正常婴幼儿血清中,均未发现VpZ的抗体。     

G1型轮状病毒中和抗原VP7基因变异特点

目的 研究我国G1型轮状病毒主要中和抗原VP7基因的变异特点。方法 对1988-1998年收集自北京、沈阳、新乡、上海、深圳、广州、重庆等7个城市的23份G1型轮状病毒毒株VP7cDNA序列进行测定,并结合核酸电泳带型和G1型单抗的ELISA检测结果分析VP7基因的变异特点。结果 我国G1型轮状病毒VP7变异有一定规律,主要集中在aa41、49、57、65、68、74、94、97、147、170、217、218、268、281、291,即VR3-5、VR7-8以及多肽C端的部分区域内,各地区之间没有明显差别,虽然随时间不同个别氨基酸可能发生替换,但仍同属Jpn-417支系;aa91位可能参与构成G1型VP7的抗原表位,某些位点的氨基酸变异可能与核酸带型改变有关。结论 在研制疫苗时,应采用基因和抗原性具有代表性的近期毒株,同时定期监测抗原性的改变。     

精浆免疫抑制物质对小鼠巨噬细胞功能的影响

目的探讨精浆免疫抑制物质（ＳＰＩＭ）对小鼠免疫功能的影响方法从正常男性精液中提取精浆免疫抑制物质．从ＢＡＬＢ／Ｃ雄性小鼠收集腹腔巨噬细胞（Ｍ）．通过Ｍ－ＥＡ花环试验和Ｍ—ＹＣ花环试验观察ＳＰＩＭ不同剂量及不同作用时间对小鼠腹腔Ｍ表面的Ｆｃ受体（ＦｃＲ）和Ｃ３ｂ受体（Ｃ３ｂＲ的影响．结果ＳＰＩＭ作用２４ｈ,小鼠腹腔ＭＥＡ和ＹＣ花环形成率分别为４２±４．６３和４０±５．３９,而７２ｈ分别为７４±７．９６和５９±３．４３．ＳＰＩＭＩ１５０μｇ组的ＥＡ和ＹＣ花环形成率分别为４２±１．７２和３９±２．６５,对照组则为７０±２．１３和７２±２．８７．结论ＳＰＩＭ对小鼠腹腔Ｍ的ＦｃＲ和Ｃ３ｂＲ的抑制作用有剂量依赖关系,并且以作用２４ｈ后其抑制作用达到高峰。