肝癌细胞对艾叶水提物的敏感性

目的研究肝癌细胞对艾叶水提物的敏感性。方法制备艾叶水提物溶液,以17.5,35,70 mg(艾叶)/m l分别处理HepG2细胞,采用倒置显微镜观察肝癌细胞的生长状态,MTT法测定肝癌细胞的活力,集落形成实验测试肝癌细胞的增殖潜力。结果不同浓度的艾叶水提物处理肝癌细胞12 h均使细胞严重皱缩,随作用时间的延长,细胞持续皱缩,甚至死亡,其效果与药物浓度呈正相关;处理肝癌细胞12~48 h,细胞OD值均明显下降,与对照组比较均有差异,差异有统计学意义(P<0.01);计数72 h后各处理组10个以上细胞的集落形成率均为0,对照组为100%。结论肝癌细胞对艾叶水提物极敏感,能导致细胞皱缩,阻止细胞增殖,最终诱导细胞死亡。进一步研究艾叶水提物的活性部位具有重要意义。     

抗肿瘤药物载体的研究进展

恶性肿瘤是严重危害人类健康的难治疾病之一,目前化学药物仍然是必不可少的治疗方法,多年来,抗肿瘤药物的严重毒副作用受到极大的关注.理想的化疗药物应该是只对宿主的特定靶细胞发挥作用,而不对宿主的正常细胞产生效应,或者引起的毒副作用微不足道.……     

用多次酶消化法体外培养的大鼠成骨细胞及其鉴定

目的 针对目前体外培养成骨细胞方法的不足,建立一种理想的原代培养成骨细胞的方法,为骨替代材料的研究提供成骨细胞.方法 本实验用新生1～2天大鼠颅盖骨,采用多次酶消化法进行细胞体外培养.倒置显微镜观察细胞形态,并对其碱性磷酸酶（ALP）活性及矿化能力进行鉴定.结果 所培养细胞具有成骨细胞的形态学特征及体内成骨细胞的生物学行为.结论 本实验体外培养成骨细胞的方法切实可行,可为骨替代材料的研究提供种子细胞,也可为骨细胞生物学和骨组织工程的研究提供一种客观而有效的实验手段.     

艾叶多糖对小鼠免疫细胞分泌细胞因子及其活性的影响

目的 为了探索艾叶多糖对体外培养脾细胞以及巨噬细胞分泌细胞因子或细胞因子活性的影响.方法 常规提取艾叶多糖,体外与培养的小鼠脾细胞以及腹腔巨噬细胞共孵育,通过对L929靶细胞的杀伤力以及胸腺细胞增殖法分别测定脾细胞培养上清液中细胞因子TNF和IL-2的活性,ELISA法检测巨噬细胞培养上清液中细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α的含量.结果 一定浓度的艾叶多糖能明显提高小鼠脾细胞分泌的TNF和IL-2的活性(P＜0.01),对小鼠巨噬细胞分泌IL-1β、IL-6和TNF-α无影响(P＞0.05).结论 艾叶多糖调节免疫功能的部分药理作用与其提高脾细胞的TNF和IL-2细胞因子活性有关.     

2种测定雄黄和牛黄解毒片中可溶性砷含量的方法比较

目的:建立和完善中药中可溶性砷含量测定的方法。方法:采用稀盐酸和人工胃液2种溶剂分别提取雄黄和牛黄解毒片中的可溶性砷,比较古蔡氏法和二乙基二硫代氨基甲酸银(DDC-Ag)法测定可溶性砷含量的结果。结果:古蔡氏法测定样品中的可溶性砷符合2005年版《中国药典》(一部)的要求;DDC-Ag法测定可溶性砷浓度在0～6.00μg·mL-1范围内与吸光度呈良好的线性关系(r=0.9993),平均回收率为99.73%,RSD=2.88%。结论:2种方法各有优缺点。古蔡氏法测中药中可溶性砷含量,方法简单,成本低;但DDC-Ag法比较准确,成本较低,两法均可作为中药中微量可溶性砷含量的测定方法。     

杜氏利什曼原虫前鞭毛体的培养和染色方法的改进

诊断黑热病最可靠的方法是检查病人体内有无病原体。但有时由于所得的材料含虫量较少 ,涂片检查往往为阴性 ,给诊断带来一定困难。为提高病原体检出率和诊断率 ,常采用体外培养法培养出前鞭毛体 ( promastigote)后再进行制片 ,染色。培养时一般多采用三 N( Nory- Mac Neal- Nicoll)培养基 ,但通过多年实践 ,我们发现三 N培养基由于温度的作用和在试管内较长时间的液体浸泡 ,使培养基变得脆而软 ,制片时出现许多琼脂碎片 ;涂片前也因反复洗涤离心的作用均影响了制片效果。为提高黑热病诊断依据和制片的质量 ,我们经反复试验 ,对三 N培养基…     

小鼠腹腔巨噬细胞的分离培养与鉴定

目的:建立一种简便的巨噬细胞分离与培养方法,为骨替代材料降解产物的研究提供巨噬细胞。方法:以无血清DMEM培养液灌洗小鼠腹腔,10min后吸出灌洗液于含10%胎牛血清的DMEM培养液中培养。采用HE染色和倒置显微镜观察细胞形态;酸性磷酸酶及非特异性酯酶染色测定细胞内酶的表达;墨汁颗粒吞噬实验检测其吞噬功能。结果:获得高纯度的巨噬细胞,具有巨噬细胞的形态特征,良好的吞噬功能,含水解酶类。结论:本法是一种简易而实用的体外分离培养腹腔巨噬细胞的方法。     

发状念珠藻胞外聚合物分离纯化及抗肝癌活性初步研究

目的 分别从发状念珠藻原植体和悬浮培养的发状念珠藻悬浮培养体系中分离纯化胞外聚合物,并初步检测胞外聚合物体外抗肝癌活性.方法 通过DEAE Sepharose FF柱层析,分别对发状念珠藻水提取物和悬浮培养的发状念珠藻悬浮培养体系进行分离纯化胞外聚合物,并用MTT法检测1 mol/L NaCl洗脱的组分对人肝癌细胞HepG2生长的影响,同时应用试剂盒检测了细胞凋亡相关基因Caspase-3活性.结果 无论发状念珠藻水提取物还是悬浮培养的发状念珠藻悬浮培养体系分离得到酸性成分占优势,相比较之下原植体荚膜聚合物对人肝癌细胞HepG2生长有较强的抑制作用,但二者不存在显著差异,胞外聚合物诱导HepG2的caspase-3活性逐渐增强,很可能通过caspase-3凋亡途径抑制肿瘤生长.结论 无论是原植体荚膜聚合物还是悬浮细胞胞外聚合物对人肝癌细胞Hep生长均有抑制作用,悬浮培养有望成为原植体提取物替代品.     

艾叶水提物的分离提取及其抗肝癌活性研究

目的 研究艾叶水提物的抗肝癌活性.方法 采用水浴回流法获得艾叶总水提物,采用乙醇沉淀法,从总水提物中获得去多糖提取物和多糖2种粗提物,分别以不同的浓度作用肝癌HepG2细胞48h,倒置显微镜观察细胞的形态,MTT法测定细胞活力.结果 不同浓度的总水提物和去多糖提取物处理肝癌细胞12h均可使细胞明显皱缩,48 h大量细胞死亡,细胞OD值与对照组比较均明显减小(P＜0.01);高浓度多糖处理肝癌细胞24 h也较对照组有明显变化,细胞皱缩,OD值减小(P＜0.05),但12 ～24 h OD值显示活细胞数量有增加的趋势,低、中浓度多糖对肝癌细胞的形态和数量无明显影响.结论 艾叶水提物具有抗肝癌作用,去多糖提取物和总水提物均能使肝癌细胞形态改变而死亡,有较强的抗癌活性,多糖能抑制肝癌细胞增殖,抗肝癌活性较弱.     

成骨细胞的数量对体外钙化结节形成的影响

随着成骨细胞体外培养技术的发展,其体外培养已成为骨组织工程及骨替代材料研究的一个重要手段.成骨细胞的体外钙化是体外培养成骨细胞的一个重要生物学特征,对成骨细胞的鉴定、与材料的相容性及其材料的生物学效应的研究尤为重要.成骨细胞的接种浓度对其体外钙化有一定的影响,国内外文献未见关于这方面的报道.成骨细胞体外钙化形成条件的研究可望为骨替代材料的研究提供参考.