人IL-12对结肠癌干细胞生物学特性的影响及其机制

目的研究人IL-12对结肠癌干细胞(cancer stem cells,CSCs)生物学特性的影响及其机制。方法 IL-12/慢病毒重组质粒转染结肠CSCs构建IL-12过表达细胞模型,将IL-12过表达CSCs接种NOD/SCID小鼠,观察成瘤情况,Transwell检测结肠CSCs侵袭性,流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫组化检测CK20表达,Western blot检测STAT6、p-STAT6、survivin、IL-12和IL-4蛋白表达。结果体外实验证明,IL-12使CSCs侵袭性降低40%,细胞成球能力降低,凋亡增加[(45.2±5.6)%vs(4.1±1.2)%]。转染IL-12的CSCs在小鼠体内肿瘤生长能力降低,抑瘤率63.53%;慢病毒/IL-12转染CSCs形成的肿瘤体积(189±21)mm3,质量(1 958.2±41.2)mg;而空载体转染CSCs形成的肿瘤体积(1 785±32)mm3,质量(5 369.8±41.3)mg。Western blot检测表明,IL-12过表达显著降低结肠CSCs上清IL-4和p-STAT6表达。结论 IL-12降低结肠CSCs自我更新能力及侵袭性,促进其分化和凋亡,可能和IL-4/STAT6通路有关。     

白细胞介素联合放射治疗抗肿瘤研究进展

白细胞介素(interleukin,IL)是在1979年第二届国际淋巴因子研讨会上首次提出的,表示由各种白细胞产生的、介导细胞之间相互作用的细胞因子.至今得到公认的IL有18个,常用为IL-2,IL-4,IL-6,IL-12等,它能有效改善局部免疫微环境,提高抗原递呈能力,调节宿主对肿瘤的免疫应答作用,从而高效活化特异性T淋巴细胞,有利于保护性抗肿瘤免疫的产生[1].放疗(RT)是当前治疗恶性肿瘤最重要的手段之一,但放疗后肿瘤远处转移和对正常组织的损伤,以及某些肿瘤的放射敏感性低等仍是棘手的问题.本文综述近年发表的研究成果,探讨IL与RT联合的分子机制、临床前疗效及临床适用性.     

米非司酮临床应用现状

米非司酮临床应用现状尹晓玲（广东省佛山市永安医院）佛山５２８０００米非司酮是作用于受体水平的新型抗孕酮药物。米非司酮本身无孕激素，雌激素，雄激素，和抗雌激素活性，与孕酮受体和糖皮质激素受体有很强的亲和力，具有很强的抗孕激素和抗糖皮质激素作用，是目前唯...     

药流术后并发急性盆腔炎1例

<正> 患者,女性,22岁,孕1产0,因妊娠46天,在某院行药物流产术,胚胎排出后离院,后阴道持续出血78天,反复在门诊治疗不愈。两天前症状加重,伴发热及下腹疼痛,于96年10月26日来院。检查:贫血外貌,急性痛苦病容,BP14/10kPa,T39.3℃,心     

肿瘤基因治疗联合放射治疗研究进展

近20年来,随着分子生物学、分子遗传学、免疫学等相关学科的发展和渗透,肿瘤基因治疗得以迅速发展,一些肿瘤基因治疗在理论上和技术上已渐趋成熟,并从实验室的基础研究过度到临床应用.肿瘤分子生物学的进展已为肿瘤的放射治疗从分子水平解释和加以认识提供了理论依据,其中基因调控和放射敏感性关系的研究,为恶性肿瘤的放射治疗带来了新的思路和方法;同时,由于放射治疗技术渗入到基因治疗中去,也为肿瘤基因治疗带来新的活力和前景,两者优势互补,有望为恶性肿瘤的治疗提供一个新的,有效的手段.     

131I标记抗肺癌单克隆抗体1 E2在荷瘤小鼠体内分布及对小鼠移植瘤作用

目的:分析碘-131(131I)标记抗肺癌单克隆抗体IE2在荷Lewis肺癌小鼠体内分布,评估瘤内注射碘-131标记抗肺癌单克隆抗体1E2(131I-1E2)对小鼠Lewis肺癌的生长抑制作用.方法:C57BL/6小鼠右后腿皮下接种Lewis肺癌细胞(LLC)l×106只,建立荷Lewis肺癌小鼠模型,免疫组化检测Lewis肺癌细胞(LLC)膜上1E2抗原-氨甲酰磷酸合成酶1(CPS1)的表达.131I标记1E2单抗(氯胺T法),检测标记率、放化纯度、放射性比活度.荷瘤小鼠尾静脉注射标记抗体131I-1E2 18.5 MBq,观察其不同时间点在小鼠体内的分布.成瘤后小鼠随机分为4组,分别瘤内注射生理盐水0.1ml(空白对照),1E2单抗3μg(阳性对照),131I-IGg 18.5 MBq(阴性对照),131I-1E2 18.5 MBq.治疗后每周2次测定肿瘤大小,21天后处死小鼠观察肿瘤组织病理学改变,检测肿瘤体积、重量,计算抑瘤率.结果:1E2抗原-CPs1主要在肿瘤细胞膜表达,131I-IE2标记率为67.73%,放化纯度为95.63%.131I-1E2主要分布在肿瘤组织,治疗后3周试验组肿瘤体积为(0.75±0.15)cm3,重量为(1.60±0.19)g,抑瘤率78.30%,与对照组间比较差异有统计学意义(P<0.01),对照组之间差异无统计学意义(P>0.05).治疗组与对照组间病理学差异显著.结论:131I-1E2瘤内注射可抑制肿瘤的生长,具有潜在的临床应用价值,有可能成为新的肿瘤治疗靶向药物.     

胶质瘤表皮生长因子受体显像的实验研究

目的:探索131I标记表皮生长因子(EGF)对胶质瘤显像的可行性.方法:用神经胶质瘤C6细胞进行放射性摄取和滞留的体外实验;荷胶质瘤裸鼠尾静脉注射131I-EGF,于注射后30min、2h、6h、12h进行131I-EGF在鼠体内的放射性分布研究;在荷瘤鼠与正常对照鼠尾静脉注射131I-EGF后12h进行SPECT显像研究.结果:体外培养C6细胞对131I-EGF有较好的放射性摄取和滞留;在各个时间点,131I-EGF主要分布在荷瘤鼠肝、脾、肾等组织,瘤区放射性分布较高,脑组织最低,随时间延长肿瘤组织放射性分布逐渐增加,在12h时达最高;12h时SPECT显像图像清晰,瘤组织放射性分布明显,肝脾组织放射性分布较高,轮廓完整.结论:131I标记EGF有望为临床神经胶质瘤提供一种新的核医学诊断方法.     

pcDNA3.1(+)-mIL-12在Lewis细胞中生物活性的探讨

目的:建立稳定表达小鼠IL-12(mIL-12)的小鼠Lewis肺癌(Lewis lung carcinoma,LLC)细胞系LLC/mIL-12,为进一步研究mIL-12的免疫调节机制及其抗肿瘤作用奠定基础。方法:构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-mIL-12,脂质体转染LLC细胞并测其表达,流式细胞仪(FCM)观察细胞周期和凋亡,G418筛选获得阳性克隆后大量培养并检测mIL-12活性。结果:pcDNA3.1(+)-mIL-12质粒构建正确并成功转导入LLC细胞,重组质粒在mRNA及蛋白质水平均高表达mIL-12,mIL-12使LLC细胞周期重新分布,并促进其凋亡。LLC/mIL-12细胞培养上清能明显引起刀豆蛋白A(ConA)激活的小鼠脾细胞增殖。结论:成功构建pcDNA3.1(+)-mIL-12真核表达质粒,建立具有mIL-12生物学活性的LLC细胞系。     

小鼠白介素-12真核表达质粒的构建及其表达

目的:构建能在真核细胞内稳定表达小鼠白介素-12(mIL-12)的质粒,为进一步研究mIL-12的免疫调节机制及其抗肿瘤作用奠定基础。方法:通过聚合酶链反应(PCR)扩增质粒pORF-mIL-12(Elas-ti),双酶切后将目的片段mIL-12连接到真核表达载体pcDNA3.1( )质粒上,mIL-12受pcDNA3.1( )中mCMV启动子驱动,将mIL-12全长转录至同一mRNA上,对重组质粒进行鉴定后将其转染小鼠Lewis肺癌细胞(LLC)测其表达。结果:PCR成功扩增出mIL-12片段,PCR鉴定、酶切鉴定及测序均证实pcDNA3.1( )-mIL-12质粒构建成功,RT-PCR及ELISA证实重组质粒在mRNA及蛋白质水平均高表达mIL-12。结论:pcDNA3.1( )-mIL-12真核表达质粒构建成功并能在LLC细胞中稳定表达。