冠心病患者血脂相关指标与冠状动脉狭窄的相关性分析

目的 评估血脂相关指标对冠心病患者冠状动脉狭窄病情评估的临床价值.方法 回顾性纳入422名行冠状动脉造影检查的患者,记录相关实验室检查数据.根据冠脉狭窄程度分位冠状动脉狭窄程度<50％组和≥50％组,根据Gensini评分分为G1组(积分<4),G2组(积分4～20),G3组(积分21～32),G4组(积分>32)四组...     

虹膜角膜内皮综合征继发青光眼1例

虹膜角膜内皮综合征(iridocorneal endothelial syndrome,ICE综合征)是一组临床上少见且愈后较差的眼病,以角膜内皮异常、虹膜基质萎缩、虹膜周边前粘连、房角关闭及继发青光眼为主要特征。因发病率较低,发病机制复杂,目前尚待进一步研究。现将我院收治的1例ICE综合征继发青光眼的病例分析如下。患者女性,46岁。入院前1个月患者无明显诱因出现     

老年黄斑变性患者ABCR基因特定变异的检测

目的 评价ABCR特定的变异与老年黄斑变性(AMD)的关系.方法 选取经眼底检查和荧光造影检查后临床诊断为AMD的患者50例,同时选取年龄、种族相匹配的30例作为对照.PCR选择性扩增ABCR基因的外显子21、40、42、48,应用直接测序法进行DNA序列分析.结果 在48号外显子,2例(4%)AMD和1例(3%)正常对照检测到D2177N变异,差异无统计学意义(P=1.000).21号外显子有1例AMD 检测到A1038V变异,对照组未发现该变异,差异无统计学意义.另1个曾经报道检出率很高的可能与AMD有关的变异G1961E(位于42号外显子)在两组均未发现.结论 曾经报道的两个被认为与AMD有关的ABCR变异:D2177N和G1961E可能不是中国黄种人的主要AMD致病因素.     

血糖及糖化血红蛋白的检测及干扰研究进展

2010年美国糖尿病协会将糖化血红蛋白（HbA1c）检测作为筛选和诊断糖尿病指标,其参考界值为HbA1c≥6.5%。至此,HbA1c同血糖一样正式成为糖尿病诊断检测指标。血糖及HbA1c作为杰出的糖尿病诊疗指标,其检验方法灵活多变且较易受外界多种因素影响,干扰检测结果的准确性。随着检验技术的进步,临床与糖尿病诊疗相关的生物传感器的应用逐渐广泛,本文将针对二者常见检测方法的干扰因素做一综述。     

家庭回访干预对中重型颅脑损伤患者预后的影响

目的探讨家庭回访及护理干预对促进中重型颅脑损伤患者身心康复的影响。方法将140例中重型颅脑损伤患者按入院时间先后分为实验组72例和对照组68例,实验组在患者出院之日起至6个月内医生护士电话回访和预约上门服务进行家庭现场康复指导,对照组采用常规出院指导,门诊定期复查。结果干预后两组患者对疾病相关知识及康复训练的掌握、患者的满意度、并发症的发生率等方面差异有统计学意义（P〈0.05）。结论家庭回访不仅对改善颅脑损伤患者的机能状态、降低并发症的发生率等方面有积极作用,而且能有效解决患者出院后护理支持不足的问题。     

孕酮对大鼠急性高眼压模型的视神经保护作用

目的 通过建立大鼠急性高眼压模型,检测孕酮(PROG)对急性高眼压下大鼠视网膜神经节细胞的保护作用.方法 选取健康Wistar大鼠35只,分3组,Ⅰ组即正常组5只(10眼),Ⅱ组即孕酮腹腔注射组15只和Ⅲ组即生理盐水腹腔注射组15只,Ⅱ、Ⅲ组左眼采用前房加压灌注法制成急性高眼压模型,右眼为自身对照眼,最终弃去不符合标准的眼球,每组取10只眼球固定后行石蜡切片,做HE染色及Thy-1.1免疫组化、TUNEL原位凋亡检测.结果 Ⅱ、Ⅲ组模型眼的视网膜神经节细胞数均较I组和自身对照眼明显减少(P＜0.05);但Ⅱ组模型眼视网膜神经节细胞数多于Ⅲ组模型眼(P＜0.05);Thy-1.1阳性细胞数Ⅱ、Ⅲ组模型眼均低于对照眼(P＜0.05);但Ⅱ组模型眼Thy-1.1阳性细胞数多于Ⅲ组模型眼(P＜0.05).TUNEL染色阳性细胞数Ⅱ、Ⅲ组模型眼均高于对照眼(P＜0.05),Ⅱ组模型眼TUNEL染色阳性细胞数少于Ⅲ组模型眼(P＜0.05).结论 孕酮对大鼠急性高眼压模型的视网膜神经节细胞有保护作用.     

脑膜炎球菌fHBP的克隆表达与免疫原性研究北大核心CSCD

目的选用pET蛋白表达系统重组表达A、B两个亚家族的fHBP蛋白(fHBP-A和fHBP-B),制备脑膜炎球菌蛋白疫苗,并对其进行免疫原性检测,评价该蛋白疫苗抵抗脑膜炎球菌感染的保护作用。方法以脑膜炎球菌Nm048(A家族)与Nm035(B家族)菌株裂解液为模版扩增目的基因fHBP-A与fHBP-B,与原核表达载体pET-24b连接,构建重组质粒pET-24b-fHBP-A和pET-24b-fHBP-B。分别用pET-24b-fHBP-A和pET-24b-fHBP-B转化大肠埃希菌,通过Western blot检测目的蛋白表达情况并用Ni^(2+)柱层析和凝胶过滤层析进行纯化。将家兔随机分为4组,fHBP-A实验组、fHBP-B实验组、fHBP-A+fHBP-B实验组用相应重组蛋白免疫,对照组注射PBS。采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测免疫家兔抗血清与靶菌的结合情况,通过血清杀菌力试验(serum bactericidal assay,SBA)评价该疫苗诱导的免疫保护效果。结果 PCR扩增出约760 bp的目的基因片段,经双酶切和测序鉴定重组质粒pET-24b-fHBP-A与pET-24b-fHBP-B构建成功.重组菌经IPTG诱导后采用Ni^(2+)柱层析和凝胶过滤层析纯化获得2个蛋白,纯度均>90%。分别用fHBP-A、fHBP-B及其混合产物免疫家兔制备的抗血清,滴度分别为1.8×10~4、4.9×10~5、4.8×10~5。经流式细胞术检测,不同抗原组合免疫抗血清均能与靶菌结合,血清杀菌力试验检测相应的杀菌效力均SBA>1∶8,其中fHBP-A+fHBP-B免疫抗原组抗血清的杀菌滴度较高且具有交叉反应。结论 2个亚家族的fHBP蛋白疫苗能诱导家兔产生较强的体液免疫,fHBP-A+fHBP-B具有较好的免疫原性,为脑膜炎球菌蛋白疫苗的研发奠定了基础。     

SJIR-2 基因真核表达载体的构建及在真核细胞内表达的研究

目的 构建 ＳＪＩＲ － ２ 基因的真核表达载体，检测该基因在真核细胞内的表达，为进一步研究该 基因作为血吸虫免疫疫苗打下基础。 方法 ＰＣＲ 反应扩增出目的基因 ＳＪＩＲ － ２ 后插入到真核表达载体 ｐＥＧ ＦＰ 中，双酶切鉴定并进行序列测定，以脂质体介导的方法转染 ２９３Ｔ 细胞，再以 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 方法检测该基因 的编码蛋白在 ２９３Ｔ 细胞内的表达情况。 结果 ＰＣＲ 反应扩增出目的基因 ＳＪＩＲ － ２，构建了 ｐＥＧＦＰ － ＳＪＩＲ － ２ 真核表达载体，双酶切鉴定插入片段大小正确，ＤＮＡ 测序结果与 ＧｅｎｅＢａｎｋ 中的 ＳＪＩＲ － ２ 基因序列同源性为 １００％ ，重组基因成功转染进 ２９３Ｔ 细胞中，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 检测出该蛋白在 ２９３Ｔ 细胞内的表达。 结论 成功构 建了 ｐＥＧＦＰ － ＳＪＩＲ － ２ 真核表达载体，该基因编码的蛋白可以在真核细胞内表达，为我们进一步探索 ＳＪＩＲ － ２ 基因的重组疫苗在血吸虫病防治中的作用打下基础。     

孕酮对去卵巢大鼠的视神经保护作用

目的:用去卵巢大鼠建立更年期动物模型,给予不同浓度孕酮,检测血清中一氧化氮(NO)含量的变化,观察孕酮对视网膜神经节细胞凋亡影响。方法:用放射免疫分析方法(RIA)测定血清中孕酮浓度,用比色法测定血清中NO的含量;用TUNEL原位凋亡技术检测视网膜神经节细胞凋亡。结果:NO浓度随孕酮水平增加而升高,视网膜神经节细胞凋亡与孕酮含量呈负相关。结论:适量孕酮可能通过促进NO生成,从而抑制视网膜神经节细胞的凋亡,进而发挥其视神经保护作用。     

RNA干扰Ku70基因对宫颈癌Hela细胞放射敏感性影响的实验研究

目的观察ku70基因短干扰RNA(siRNA)对宫颈癌Hela细胞放射敏感性的影响。方法采用集落形成技术测定不同剂量射线照射对Hela细胞存活率的影响,观察Hela细胞对射线照射的敏感性。采用时定量PCR技术(quantitiv real time PCR,QRT-PCR)检测Ku70 mRNA水平表达。采用Western Blot免疫印记技术检测Ku70蛋白表达。采用RNA干扰(RNAi)技术抑制Hela细胞中Ku70蛋白的表达,观察Ku70蛋白表达下调对Hela细胞放射敏感性的影响。采用集落形成技术测定4.0 Gy射线照射对Hela细胞存活率的影响。进而分析Hela细胞对射线的放射敏感性。结果宫颈癌Hela细胞对1.0-4.0 Gy射线照射不够敏感,有相当高的辐射抗性。量效实验证实,1.0-6.0 Gy射线照射后,HeLa细胞中Ku70 mRNA及Ku70蛋白表达均明显增高。时效实验证实,4.0 Gy射线照射后8 h-72 h,HeLa细胞中Ku70 mRNA及Ku70蛋白表达均明显增高。本实验成功的构建了Ku70基因RNA干扰载体pSilencer-4.1-Ku70,稳定转染HeLa细胞后,有效抑制Ku70蛋白的表达。稳定转染pSilencer-4.1-Ku70干扰质粒并抑制Ku70蛋白表达后,HeLa细胞对射线照射的放射敏感性显著增高(P0.001)。结论 Ku70 siRNA有效下调Ku70 mRNA水平,抑制Ku70蛋白的表达,可明显提高Hela细胞对辐射的敏感程度。本研究结果还提示,Ku70基因可作为衡量宫颈腺癌辐射敏感性指标,为临床合理筛选患者进行放疗、预测放疗疗效提供一条适用途径。