中药独活激活Wnt/β-catenin信号通路对骨质疏松大鼠的作用

目的探讨中药独活对去卵巢所致骨质疏松SD大鼠的作用及其可能机制。方法将50只SD大鼠,体重200～250 g,随机分为假手术组、模型组、独活低剂量组(0.9 g/kg)、独活高剂量组(1.8 g/kg)、阳性药组(200 mg/kg依普黄酮),每组10只。利用双侧卵巢切除法制备大鼠骨质疏松模型,手术模型制备成功后,连续灌胃给药60d。测定股骨密度、骨灰重/干重百分比;测定大鼠血清骨钙素(OC)、骨碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、血清钙、无机磷的水平。免疫组化法测定股骨中骨保护素(OPG)、破骨细胞分化因子(RANKL)蛋白表达;Western blot法检测大鼠骨组织中β-catenin、p-β-catenin、GSK-3β、p-GSK-3β蛋白表达。结果独活高剂量和阳性药均能够增加大鼠股骨密度、骨灰重/干重,降低BGP、ALP及TRAP的水平,并增加血清钙的水平,对无机磷的表达无显著性影响,增加骨组织中OPG蛋白表达水平,降低RANKL蛋白表达水平,增加β-catenin、p-GSK-3β蛋白表达水平,降低p-β-catenin、GSK-3β蛋白表达。结论独活高剂量(1.8 mg/kg)对去卵巢导致的骨质疏松大鼠的治疗作用,与激活Wnt/β-catenin信号通路促进骨形成相关。     

PEI修饰的氢氧化铝纳米颗粒增强DC细胞抗原递呈作用的初步研究

目的：探索聚乙烯亚胺（polyethylenimine,PEI）修饰的氢氧化铝纳米颗粒（HS）增强树突状细胞（dendritic cells,DCs）抗原提呈的作用及其机制。方法：DCs负载PEI修饰前后的HS联合卵清蛋白（ovalbum,OVA）抗原后与B3Z细胞共孵育,CPRG (Chlorophenol red-β-D-galactopyranoside)方法检测DCs对OVA的抗原提呈能力,Western blot检测DCs中泛素化OVA蛋白的表达;以不同刺激剂[干扰素(interferon, IFN)-α、R848]与负载HS/PEI-OVA的DCs混合后,收集培养上清ELISA检测白介素（interleukin, IL）-12的表达,与B3Z共孵育后CPRG方法检测不同刺激剂对HS/PEI增强DCs抗原提呈的作用;DCs负载HS/PEI-OVA后与OT-Ⅰ T细胞共孵育,检测OT-Ⅰ T细胞增殖;皮下接种小鼠黑色素瘤细胞B16.OVA构建小鼠黑色素瘤模型,探讨负载HS/PEI-OVA的DCs疫苗体内诱导CD8+IFN-γ+T细胞比率上升及特异性T细胞分泌IFN-γ的能力。结果：与未经PEI修饰的HS相比,HS/PEI能显著增强DCs对OVA抗原的提呈能力,并增加DCs中泛素化OVA蛋白的表达及IL-12的分泌;IFN-α、R848均可进一步增强DCs对HS/PEI-OVA的提呈作用;DCs负载HS/PEI-OVA可显著促进OT-Ⅰ T细胞的增殖;DCs-HS/PEI-OVA疫苗小鼠体内能诱导高效的T细胞应     

“经筋理论”指导下自拟加减葛根汤治疗神经根型颈椎病疗效分析

目的 探讨用“经筋理论”指导下自拟加减葛根汤为主综合治疗神经根型颈椎病的临床疗效。方法 选择神经根型颈椎病242例患者，随机分成治疗组及对照组。其中治疗组122例，男60例，女62例，在基础治疗基础之上，运用改良葛根汤加减中药汤剂治疗，原方基础上佐以补益肝肾，活血化瘀等中药，活血止痛通络。对照组120例，男58例，女62例，在基础治疗基础之上，给予洛索洛芬钠(乐松)60 mg/次，3次/d,连续使用2周。观察其临床治疗效果，评价标准采用中医证候及VAS视觉模拟评分法进行评分。结果 加减葛根汤对于治疗神经根型颈椎病的临床症状均有所减轻或消失，总有效率可达88%(108/122)。疼痛症状依据VAS评分对两组分别进行评定，我们通过对两组数据分析比较发现P<0.001,差异具有统计学意义，且治疗组疗效较对照好患者，VAS评分治疗后较治疗前明显改善。结论 临床基于加减葛根汤为主综合治疗神经根型颈椎病疗效显著，具有很好的临床应用价值，值得推广。     

鲍曼不动杆菌医院感染的临床分布及耐药性分析

目的研究鲍曼不动杆菌（Ab）的临床分布及药敏情况。方法分析非重复分离的524株Ab的科室分布和标本来源，采用K-B法测定17种抗菌药物的耐药性。结果Ab检出率逐年增加，最常出现在痰标本，占79．O‰主要分布在呼吸内科（21．0％）、ICU（19．5％）和神经内科（12．4％）；对鲍曼不动杆耐药率最低的是头孢哌酮／舒巴坦（2．76％），其次是阿米卡星（10．10％）和氨苄西林／舒巴坦（12．60％）。结论Ab呈多药耐药特点，应加强感染者的消毒隔离，合理使用抗生素，控制耐药菌株流行。     

重组人骨保护素与重组核因子κb活化因子受体蛋白对破骨前体细胞分化的影响

目的:对比重组人骨保护素(rhOPG-Fc)与重组核因子κb活化因子受体蛋白(rhRANK)对破骨前体细胞分化的影响.方法:采用成骨细胞与破骨前体细胞RAW264.7混合培养,在地塞米松、1,25 (OH) 2VitD3诱导下生成破骨细胞的方法.研究分3组:rhRANK组:10-5 g/L;rhOPG-Fc组:10-5 g/L;空白对照组.作用9d后观察破骨细胞数目和形态,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色阳性细胞个数,骨磨片吸收陷窝计数.结果:在空白对照组,小鼠成骨细胞与破骨前体细胞RAW264.7混合培养6d后,开始出现多核细胞,9d时可见大量成熟多核细胞,经TRAP染色证实为成熟破骨细胞,而rhRANK组及rhOPG-Fc组TRAP染色阳性多核细胞数较对照组均减少,特别是rhRANK组减少更明显.骨片吸收陷窝计数显示rhRANK组及rhOPG-Fc组较对照组也明显减少,而相对来说,rhRANK组较rhOPG-Fc组更少.结论:rhOPG-Fc与rhRANK均可以有效抑制破骨前体细胞分化成为成熟破骨细胞,且rhRANK较rhOPG-Fc抑制效果更明显.     

重组人骨形态发生蛋白2缓释微球的制备与评价

目的:针对重组人骨形态发生蛋白2(recombinant human bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2)在体内半衰期短、易被稀释代谢的问题,探讨利用聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)制备载rhBMP-2微球的可行性和制备工艺,并观察其载药、释药特性.方法:①采用W/O/W型复乳化-溶剂挥发技术制备rhBMP-2/PLGA缓释微球,并对微球的粒径和形态、包封率和载药量,体外释放性质进行测定.②异位成骨实验:昆明小鼠12只,在右侧大腿股内侧肌袋内植入含rhBMP-2的50 mg PLGA微球,4周后取材,观察成骨情况以初步检测微球中的蛋白质活性.结果:①rhBMP-2/PLGA缓释微球形态良好,粒径主要集中在50～60 μm,包封率为(37.52±4.31)%,载药率为(5.12±1.32)%.②微球的释放存在突释,7 d内释放的药物量超过40%,大约90%的药物量于42 d内释放完全.③载药微球植入鼠股部肌袋4周,材料周围有明显的骨形成.结论:制备的rhBMP-2/PLGA微球可以缓慢释放有活性的rhBMP-2,具有临床应用的可行性.     

评价护理干预对复杂性肛瘘患者术后伤口愈合的促进作用

目的探究护理干预对复杂性肛瘘患者术后伤口愈合的促进作用。方法对照组患者采取常规护理,而实验组采用的是有针对性护理干预。结果观察组患者术后切口愈合时间、疼痛评分和住院时间方面远远强于对照组,效果存在着明显差异性。结论对复杂性肛瘘手术患者实施围手术期针对性护理干预具有重大的参考意义。     

多孔碳酸化羟基磷灰石水泥修复双侧股骨髁骨缺损:同体随机对照16周组织学结果验证

背景:课题组采用发泡剂成孔技术,制成了有知识产权的新型骨修复材料多孔碳酸化羟基磷灰石,既保留了碳酸化羟基磷灰石骨水泥原位固化性能等所有的优点,同时又形成多孔结构.目的:通过动物实验进一步验证制备的新型骨修复材料多孔碳酸化羟基磷灰石水泥修复骨缺损的效果.设计、时间及地点:同体对比观察实验,于2000-01/2002 08在解放军总医院骨科研究所及医学动物实验中心完成.材料:以碳酸钙、磷酸氢钙等化学试剂为原材料,通过高温烧结合成碳酸化羟基磷灰石粉体,粉体与固化液相混合原位固化形成碳酸化羟基磷灰石;在碳酸化羟基磷灰石粉体中加入成孔剂,成孔剂在骨水泥固化过程中发生化学反应产生二氧化碳气体,由此形成多孔碳酸化羟基磷灰石.方法:采用10只新西兰大白兔在双侧股骨髁制备直径为5.5 mm、深12 mm的骨缺损动物模型,随机选择侧作为实验组,调和多孔碳酸化羟基磷化石,迅速将其置于特制的注射器中,注入骨缺损.另一侧为对照组,骨缺损直接填充碳酸化羟基磷化石.主要观察指标:分别于术后2,4,8,12,16周分批处死动物.通过X射线和组织学观察其修复效果.结果:实验组骨缺损逐渐被新生骨填充,骨组织逐渐改建,趋于成熟.对照组材料的边缘区有新骨生长,并随时间呈递增趋势,材料的中央区未见新骨组织.术后16周影像学检查,实验组材料与周围正常骨的密度相当,很难区分界线,对照组材料的可视面积明显减少.结论:多孔碳酸化羟基磷灰石水泥具有原位固化性能和良好的生物相容性,能作为自体骨移植的一种替代物修复骨缺损.     

全髓置换后深静脉血栓的预防

目的:比较低分子肝素和吲哚美辛对预防全髋置换后深静脉血栓发生的疗效.方法:选择北京世纪坛医院骨科收治的股骨头无菌坏死患者120例,男62例,女58例,年龄38～82岁,平均66.9岁;均计划行全髋置换.全部患者随机分为3组,对照组(n=41):没有接受抗凝预防治疗;低分子肝素组(n=40):接受低分子肝素治疗,以患者的体质量计算,给予皮下注射范围1900～3800 U/d;吲哚美辛组(n=39):接受吲哚美辛治疗,剂量为2次/d,口服25 mg/次,均从置换前1d至出院当天.对比观察各组患者全髋置换后深静脉血栓的发生情况.结果:120例患者在全髋置换后第1周行彩色多普勒超声检查,发现65例患者有深静脉血栓(54%),其中18例深静脉血栓发生在非手术侧肢体.在手术侧肢体发生深静脉血栓的患者中18例有临床症状(28%),在非手术侧肢体发生深静脉血栓的患者均未见临床症状.对照组深静脉血栓的发生率为71%,明显高于低分子肝素组48%和吲哚美辛组45%(P<0.05).结论:全髋置换前应用低分子肝素或吲哚美辛明显降低了深静脉血栓发生.