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1.
2.
TNFα对大鼠肺微血管内皮细胞NO的产生及NOS mRNA表达的影响   总被引:12,自引:0,他引:12  
目的 阐明肿瘤坏死因子α(TNFα)对内皮细胞一氧化氮(NO)的产生及两型一氧化氮合酶(NOS)mRNA表达的影响及其规律。方法 以大鼠微血管内皮细胞为材料,测定细胞培养上清液中NO2^-水平并应用定量RT/PCR技术检测内皮细胞NOS mRNA表达水平。结果 应用TNFα(100ng/ml)作用于内皮细胞6h后,发现培养上清液NO2^-水平较对照组显著升高(P〈0.05),而6h以内两组无显著差  相似文献   
3.
TNFα对血管内皮细胞的损伤作用及其分子机制   总被引:3,自引:1,他引:2  
TNFα是一种重要的炎症介质。血管内皮细胞是TNFα作用的靶细胞之一。由TNFα引起的血管内皮细胞损伤在很多炎症性疾病的发病中具有重要意义。本工作主要研究不同浓度的rhTNFα(简称TNF)引起大血管内皮细胞(人脐静脉内皮细胞)和微血管内皮细胞(大鼠肺微血管内皮细胞)形态、功能、代谢的损伤以及其与内皮细胞中原癌基因表达的关系,试图从中说明TNF引起血管内皮细胞早期损伤的部分分子机制。1-细胞增殖动力学:在体外培养的大血管内皮细胞(HVEC,第3~4代)中发现,加入TNF(20~40ngmL)后…  相似文献   
4.
目的: 探讨NFκB以及抗氧化剂在大鼠肺微血管内皮细胞中对TNF-α加LPS诱导的iNOS基因表达的作用及其机制. 方法: 通过免疫组化染色ABC法用抗内皮细胞抗体CD31对培养的大鼠肺微血管内皮细胞进行鉴定. Griess法测定细胞培养上清液中的亚硝酸盐浓度以反映NO的生成. Northernblot结合RT-PCR分析iNOS mRNA水平. EMSA法测定细胞核内NFκB的结合活性. 结果: TNFα(100 U/ml)加LPS(1 ug/ml)处理内皮细胞2 h后iNOS mRNA水平明显上升(P<0.05), 24 h后能明显增加NO的生成(P<0.01). 用放线菌酮(10 mg/ml)或抗氧化剂吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(pyrrolidine dithiocarbamate, PDTC, 0.1 mmol/L)或氮乙酰基半胱氨酸(N-acetylcystenine, NAC, 20 mmol/L)处理内皮细胞能降低TNF-α和LPS诱导的亚硝酸盐(NO)生成和iNOS mRNA表达(P<0.05). 抗氧化剂PDTC和NAC对NO诱导生成的抑制作用呈现剂量-效应关系. TNF-α(100 U/ml)加LPS(1 μg/ml)能刺激内皮细胞中NFκB的激活和转位. 当内皮细胞培养体系中加入PDTC(0.1 mmol/L)或NAC(20 mmol/L)1.5 h后这种激活作用被阻滞. 结论: ① TNF-α加LPS能够在转录或转录后水平诱导iNOS基因表达. ② TNF-α加LPS诱导的iNOS基因表达依赖于NFκB的激活. ③抗氧化剂能够通过抑制NFκB的激活来抑制iNOS基因的诱导表达.  相似文献   
5.
TNF-α引起的微血管内皮细胞功能障碍及其细胞分子机制1   总被引:2,自引:0,他引:2  
血管内皮细胞是肿瘤坏死因子(TNF-α)作用的靶细胞之一. 由TNF-α引起的血管内皮细胞损伤在很多心脑血管疾病和血栓性疾病的发病中具有重要意义. 本工作主要研究不同浓度的rhTNF-α(简称TNF)引起微血管内皮细胞功能、代谢的早期损伤以及其与微血管内皮细胞中原癌基因和凋亡相关基因表达的关系, 试图从中说明TNF引起微血管内皮细胞功能障碍的表现及其部分细胞分子机制.  相似文献   
6.
抗氧化剂和NFκB对大鼠肺微血管内皮细胞iNOS表达的影响   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的 :探讨NFκB在大鼠肺微血管内皮细胞iNOS基因诱导表达中的作用及抗氧化剂对内皮细胞iNOS诱导表达的影响及其机制。方法 :Griess法测定细胞培养上清液NO-2 水平以反映NO的生成 ,Northern印迹分析iNOSmRNA水平 ,EMSA法测定细胞核内NFκB的结合活性。结果 :抗氧化剂可阻断内皮细胞培养体系LPS和TNFα诱导的NO生成及iNOSmRNA的表达 ;LPS和TNFα可诱导大鼠肺微血管内皮细胞NFκB的激活并可被抗氧化剂阻断。结论 :LPS和TNFα诱导的内皮细胞iNOS基因表达依赖于NFκB的激活 ;抗氧化剂可通过抑制NFκB的活化而阻断iNOS基因的诱导表达  相似文献   
7.
TNFα引起的微血管内皮细胞功能障碍及其分子机制   总被引:2,自引:0,他引:2  
血管内皮细胞是肿瘤坏死因子 (TNFα)作用的靶细胞之一。由TNFα 引起的血管内皮细胞损伤在很多心脑血管疾病和血栓性疾病的发病中具有重要意义。本工作主要研究不同浓度的mTNFα(简称TNF)引起微血管内皮细胞的功能、代谢的早期损伤以及其与微血管内皮细胞中原癌基因和凋亡相关基因表达的关系 ,试图从中说明TNF引起微血管内皮细胞功能障碍的部分分子机制。1 细胞增殖动力学 在体外培养的肺微血管内皮细胞 (PMVEC)中发现 ,加入TNF( 2 0ng/mL)后 ,细胞形态从圆形、多角形变成梭形 ,细胞的纵轴拉长 ,横轴缩小 ,…  相似文献   
8.
TNF-α引起的微血管内皮细胞功能障碍及其细胞分子机制   总被引:6,自引:0,他引:6  
血管内皮细胞是肿瘤坏死因子 (TNF α)作用的靶细胞之一。由TNF α引起的血管内皮细胞损伤在很多心脑血管疾病和血栓性疾病的发病中具有重要意义。本工作主要研究不同浓度的rhTNF α(简称TNF)引起微血管内皮细胞功能、代谢的早期损伤以及其与微血管内皮细胞中原癌基因和凋亡相关基因表达的关系 ,试图从中说明TNF引起微血管内皮细胞功能障碍的表现及其部分细胞分子机制。实验是在体外培养的第二代大鼠肺微血管内皮细胞(RPMVEC ,简称内皮细胞 )中进行的。细胞经光镜、电镜的形态观察 ,vWF免疫组化阳性 ,CD3 1免疫…  相似文献   
9.
目的 :探讨NFκB以及抗氧化剂在大鼠肺微血管内皮细胞中对TNF α加LPS诱导的iNOS基因表达的作用及其机制。方法 :通过免疫组化染色ABC法用抗内皮细胞抗体CD31对培养的大鼠肺微血管内皮细胞进行鉴定。Griess法测定细胞培养上清液中的亚硝酸盐浓度以反映NO的生成。Northernblot结合RT PCR分析iNOSmRNA水平。EMSA法测定细胞核内NFκB的结合活性。结果 :TNFα(10 0U/ml)加LPS(1ug/ml)处理内皮细胞 2h后iNOSmRNA水平明显上升 (P <0 .0 5 ) ,2 4h后能明显增加…  相似文献   
10.
TNFα血管内皮细胞的损伤作用及其分子机制   总被引:5,自引:0,他引:5  
  相似文献   
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