天然胡萝卜素对地鼠颊黏膜癌癌前病变局部免疫调节作用的实验研究

目的 :探讨天然胡萝卜素对口腔颊黏膜癌前病变逆转中的局部免疫调节作用。方法 :用二甲基苯并蒽 (DMBA)诱发制作地鼠口腔颊黏膜癌前病变模型。将 65只地鼠分为 4组 ,空白对照组 5只 ,3个实验组各 2 0只。对口腔黏膜癌前病变地鼠以 0 .5 %天然胡萝卜素溶液灌胃 ( 15mg/kg/d ,5d/周× 4周 )或在口腔颊黏膜癌前病变区贴敷天然胡萝卜素口腔膜 ( 1cm× 1cm /10mg ,5d/周× 4周 )。应用流式细胞仪检测空白对照组、癌前病变组和灌胃组、贴膜组治疗 4周和停药后 6周肿瘤坏死因子 (TNF -α)和白细胞介素 10 (IL -10 )表达量。结果 :地鼠颊黏膜癌前病变组TNF -α和IL -10表达量明显高于空白对照组。经用天然胡萝卜素治疗后 ,灌胃组和局部贴膜组均显示TNF -α表达量明显下降 (P <0 .0 1) ;贴膜组可使IL -10表达量降低 (P >0 .0 5 ) ,而灌胃用药组IL -10表达量无明显降低 ,与癌前病变组比较无明显差异 (P >0 .0 5 ) .结论 :天然胡萝卜素对地鼠颊黏膜癌前病变具有一定的局部免疫调节作用 ,其确切的作用机制有待深入研究。     

伊红染液的改良及使用体会

在HE染色中,细胞核的着色情况固然十分重要,但在临床诊断中胞质染液伊红的衬托作用也非常关键,胞质的着色浓淡应以苏木精胞核着染浓淡为标准,以色彩对比适当、鲜明艳丽为佳[1].常规HE染色中胞质着色有时不稳定,而改进的混合伊红染液为醇溶性溶液[2],不但沉淀过多、浪费试剂,而且脱色较重,液体使用时间短.我们在实际工作中对伊红染液进行了改良,不但节省了试剂且效果很好,配置后一次使用时间较原来延长1倍.     

细胞DNA定量分析法在浆膜腔积液鉴别诊断中的应用

目的探讨细胞DNA定量分析法在良恶性浆膜腔积液鉴别诊断中的应用价值。方法将297例份浆膜腔积液（胸水、腹水、心包积液）分别制成4张薄层细胞涂片,2张做巴氏染色、行常规细胞学检查,2张经Feulgen染色、行细胞DNA定量分析。结果297例份标本,常规细胞学检查发现138例（44.5%）异常,DNA定量分析发现131例（44.1%）异常;常规细胞学检查诊断为癌及可疑癌细胞的84例中均出现DNA异倍体,常规细胞学检查发现异型细胞的54中47例（87%）出现DNA异倍体。结论细胞DNA定量分析可进一步认证常规细胞学检查结果并弥补其不足,二者联合应用可鉴别浆膜腔积液的性质。     

流式细胞术测定食管癌中PCNA、p27的表达

目的 探讨细胞周期调控蛋白PCNA、p27在食管癌中的表达以及与食管癌的分化和淋巴结转移的关系。方法 采用流式细胞术定量检测65例食管鳞状细胞癌上PCNA、p27蛋白的表达强弱(用荧光指数FI表示)。结果 PCNA在低分化型(G3)鳞癌上的表达量明显高于分化型(G1，G2)鳞癌(P=0．0002)；p27在低分化型鳞癌上的表达量明显低于分化型鳞癌(P=0．0042)。PCNA与p27呈负相关。该两种基因蛋白的表达强弱均与淋巴结转移无关。结论 PCNA、p27的表达强弱与食管癌的分化密切相关。     

细胞DNA定量分析法在判断良恶性胸、腹水中的临床应用

目的 应用自动细胞DNA定量诊断系统,鉴别诊断良恶性胸、腹水标本.方法 202 例胸、腹水标本,经细胞采集器处理,每例制成4张薄层细胞片,2张细胞片做巴氏染色,用于常规细胞学检查;另2张经 Feulgen染色,用自动细胞DNA定量分析系统检测.结果 202例标本常规检测为阴性胸、腹水112例,DNA定量测定为阴性116例.常规检测找到癌细胞51例,找到可疑癌细胞5例,找到少许异型细胞34例.DNA定量测定可见大量异倍体细胞65例,少量异倍体细胞21例.结论 应用自动细胞DNA定量分析系统可弥补常规形态学工作的不足,二者协同诊断,可发现早期癌变的胸、腹水,使细胞学检查工作更完善、客观.     

微波技术在制作牙体组织切片中应用

牙体组织由牙釉质、牙本质、牙骨质3种钙化的硬组织和1种牙髓组织组成。因其十分坚硬，渗透性极差，脱钙、浸蜡时间均较长，制作完整的切片较困难。我们在制作牙体组织切片的实际工作中体会到采用微波技术处理牙体组织，制作常规石蜡切片及进行免疫组化染色过程中，注意在关键环节上的处理，可缩短制作周期，并获得令人满意的效果。     

免疫组织化学染色中消除内源性生物素的方法研究

内源性生物素(endogenous avidin-bindingacticity,EABA)指得是体内能够与亲和素结合的分子或基因.虽然早已被发现,但是由于对它的研究或观察的样本较少,所以未引起人们的高度重视.随着免疫组织化学技术的发展,在应用单克隆抗体检测石蜡包埋组织,加热抗原修复在增强抗原决定簇表达的同时,也增强了组织中内源性生物素的反应.常用的SP法属于亲和素一生物素法之一,如果待检组织和细胞中富含EABA,则可出现假阳性,导致假阳性结果.     

常规HE染色中蓝化方法的改进

HE染色是病理技术人员的基本功,是生物学尤其是病理学及细胞学诊断工作中必不可少的染色方法。病理组织学的基本知识,绝大部分都是从观察HE染色标本中得来,其染色是否成功直接影响其他方法的选择与进行。但是在临床工作中我们发现,一些前期处理均好的切片,一旦进入氨水中进行蓝化时会出现个别脱片现象,尤其像脱钙后的骨组织、冷冻切片中的脂肪组织、平滑肌组织及甲状腺等纤维成分或脂肪成分多的组织更甚。为了克服其影响因素,减少或不出现脱片现象,我们对常规应用的1%氨水进行了改进,选用免疫组化染色常用的PBS(即磷酸盐缓冲液)替代氨水…     

内源性生物素对免疫组化染色的影响及消除方法

免疫组织化学技术因其结果定位明显,操作简单,实验条件及设备要求不高,又能将形态、代谢和机能密切结合起来,使纯形态的病理学发展成了形态与免疫信号相结合的现代病理学,已被广泛应用于临床病理诊断及各种科研工作.然而在免疫组化的实际应用过程中常会遇到的非特异性染色,从而对实验结果的判定造成严重影响.使用生物素-卵白素或生物素-链霉卵白素检测系统,热修复抗原后的组织中内源性生物素着色(假阳性)影响染色结果,特别是富含线粒体的组织,如甲状腺、肝脏、肾脏组织中,其定位于细胞质极易引起误判,非免疫动物血清封闭无效[1],为此我们进行了实验摸索,总结出一种消除非特异性染色的方法.     

使用新型全自动免疫组织化学染色仪与手工操作比较的体会

随着医学实验技术的发展及免疫组织化学在病理诊断和鉴别诊断中的地位不断提高，做好免疫组化工作显得尤为重要。不单纯是得到很好的抗原恢复、有敏感的检测系统和使用范围广的抗体就能染好免疫组化。在实际操作和应用中，必须做到细心和掌握更全面的知识。遇到各种各样的问题时，就能得到正确地解决方案。给病理诊断提供正确的免疫组化结果。但人的影响因素非常大，就是技术再好，总会因情绪、时间、