PCR-SSCP银染技术的应用与改进

单链构象多态性(single strand con-formation polymorphism,SSCP)分析技术是由日本国立癌研究中心林健志小组首创,具有简便、快速、敏感和适用于大样本筛查等优点.其基本原理是双链DNA加热变性后形成单链DNA,相同片段长度的DNA由于碱基序列不同,其至单个碱基的不同,     

中国人D13S301位点的微卫星多态及其应用价值

率先在国内应用ＰＣＲ技术扩增Ｗｉｌｓｏｎ病（ＷＤ）基因内部Ｄ１３Ｓ３０１位点的微卫星多态，通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测扩增产物，对８０名正常中国人进行了检测，结果具有１２种不同长度的等位片段，多态信息含量（ＰＩＣ值）为０．８８３，表明该位点在中国人群中具有长度多态性及较高的应用价值。应用该位点对１０个ＷＤ家系进行连锁分析，在２４名无症状个体中检出１２名基因携带者，７名正常纯合子及２名症状前患者，进一步证实该位点可用于ＷＤ的症状前诊断及杂合子筛选。     

缺失型DMD／BMD患者PCR快速检测的可行性与意义

应用对应于Ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因缺失热区的二对ＰＣＲ引物和一对内对照无关引物，在同一反应体系中扩增，检测６６例ＤＭＤ／ＢＭＤ患者。发现其中２５例存在１７号或４９号外显子缺失，与同时采用ｃＤＮＡ探针杂交检测出的３５例基因缺失相比．检出率达７１．４％。说明该扩增系统能够作为快速筛查缺失型ＤＭＤ／ＢＭＤ患者的有效手段。这对指导合理选用探针，尤其在产前诊断方面，具有重要意义。     

基因芯片快速HLA-DR52组分型

目的 用基因芯片对HLA-DR52组快速分型。方法 根据中国汉族人群常见的HLA-DRB位点及其基因多态性的独特序列，设计特异性的寡核苷酸分型探针，制成寡核苷酸芯片。通过组间特异引物扩增基因组DNA，扩增中用荧光标记，扩增标记后的产物与芯片的探针杂交，通过杂交产生的荧光信号确定样品的基因亚型。83份样本分别用基因分型芯片和序列特异性引物聚合酶链反应技术(PCR-SSP)对HLA-DR52组分型。结果PCR-SSP分型DR52组57个位点中，经芯片分型有2个无DR52组位点，3个PCR-SSP分型为DR52组纯合子，芯片为DR52组杂合子，1个PCR-SSP分型为非DR52组纯合子，芯片分型为含有1个DR52组位点的杂合子。结论 基因芯片能对HLA-DR52组快速、准确的分型，比PCR-SSP能更多的检出DR52组位点，特别是能将纯合子进一步分型，适合临床应用。     

胃癌患者APC基因突变的分析

胃癌患者ＡＰＣ基因突变的分析宫立群余龙尹浩然王瑞年邓余朱正纲张熙曾林言箴为了系统研究ＡＰＣ基因突变在中国人胃癌发生中的分子机制，并为寻找肿瘤早期诊断和预后估计的分子生物学指标，我们在２０例人原发性胃癌病例中，用聚合酶链反应—单链构象多态分析法（ＰＣＲ...     

中国人D13S31等位点的多态性及其在Wilson‘s病家系中的应用

本文对９０名无亲缘关系的正常中国人进行了Ｄ１３Ｓ３１和Ｄ１３Ｓ２５区域的限制性片段长度多太性分析（ＲＦＬＰ），表明中国上述位点的多态等位片段与西方人相同，但两者各等位片段的频率差异明显，杂合率亦不同。应用上述位点对４个Ｗｉｌｓｏｎ’ｓ病（ＷＤ）家系进行多位点连锁分析，证实它们可用于ＷＤ的症状前诊断。     

人肿瘤相关基因Dief 33L在肺癌中的表达

目的:观察Dief33L基因在肺癌组织中的表达情况,并初步探讨其与肺癌的关系.方法:通过Northern印迹技术,检测29例肺癌和正常肺组织中的Dief33L基因mRNA的表达,杂交结果用UVP全自动图像分析仪检测杂交信号,并分析mRNA的表达与肺癌临床特征的关系.结果:Dief33L基因在癌旁正常组织中均有不同程度表达,在肺鳞癌组织中均未见表达,在部分肺腺癌组织有表达,且相对表达量较癌旁肺组织显著降低(P<0.05);在有或无淋巴结转移的肺腺癌组织之间相比也有显著差异(P<0.05).结论:Dief33L 基因的表达量降低可能是肺腺癌发生发展过程中一个因素,且可能与腺癌的转移有关.     

LOSS OF HETEROZYGOSITY AT 17p13 IN GASTRIC CANCER AND COLORECTAL CANCER

Bothgastriccancerandcolorectalcancerarecommonhumantumors.Althoughlittleisknownregardingthemolecularpathogenesisoftheneonlasms,itisnowgenerallyacceptedthattheactivationofoncogenesandinactivationoftumorsuppressorgenesmightbecriticalforthetumorcarcinogenesisandprogression.Inthepresentstudy,weemployedtheSouthernhybridizationbyprobesphP53BandPYNZ22,whichwereobtainedfromtheAmericanTypeCultureCollection,todetectthelossofheteroZygosity(LOH)at17pl3ingastriccancerandcolorectalcancer.Wefurtheranaly…     

肝癌高低转移细胞株差异表达基因的初步研究

目的：肝癌高低转移细胞株的基因表达谱的比较。方法：应用cDNA microarray技术，对肝癌高低转移细胞株的基因表达谱进行比较，并应用RT—PCR对部分差异表达的基因进行了验证。结果：肝癌高转移细胞株与低转移细胞株相比，有384个基因存在差异表达，其中12个是位于染色体8p上。选取4个基因用RT—PCR验证，结果与cDNA microarray结论基本一致。结论：肝癌高低转移细胞株基因表达存在明显差别。染色体8p上可能存在促进和抑制肝癌转移的基因。     

肺炎性假瘤18例临床分析

肺炎性假瘤是肺内非特异性炎症所致的肿瘤样病变。临床上易与周围型肺癌混淆。现将我院胸外科1995年1月至2002年12月经手术和病理学检查证实的肺炎性假瘤18例报告如下。1 临床资料1.1 一般资料:男性11例,女性7例,男∶女=1.57∶1。年龄22～65岁,平均42.3岁,其中35岁以下12例。病程:半个月至13年,平均8个月。1.2 临床表现:主要症状为14例间歇轻咳、痰中带血(77.8％)。10例胸痛、胸闷。低热8例,部分病例无自觉症状,4例因体检时发现肺部占位性病变,6例有呼吸道感染史,11例周围血嗜酸性粒细胞增多(7例增至10％以上),8例血沉升高。